los hábitos tóxicos y su relación con la infertilidad masculina, ha sido objeto de investigación en los últimos años y dentro de los hábitos tóxicos más comunes dentro de la población está fumar el cigarrillo. Por otro lado, la fragmentación del DNA espermático ha sido relacionada con la infertilidad y disminución de la calidad embrionaria en trabajos previos. Este estudio se ha llevado a cabo con la finalidad de investigar la asociación entre el tabaco y la fragmentación del DNA espermático en muestras de semen fresco y capacitado en hombres infértiles que asisten para un tratamiento de reproducción. Un total de 99 pacientes proporcionaron una muestra de semen; se descartaron previamente otras causas de fragmentación del DNA mediante un cuestionario y se establecieron 3 grupos de acuerdo al consumo de tabaco: no fumadores, fumadores moderados (1-19 cigarrillos/día) y muy fumadores (≥20 cigarrillos /día). El análisis de la fragmentación se llevó a cabo mediante la prueba de la Dispersión de la Cromatina (SCD) antes y después del swim-up. No se observaron diferencias significativas en cuanto a la fragmentación del DNA según el hábito de fumar en las muestras en fresco; sin embargo, hubo un incremento significativo de células espermáticas con el DNA fragmentado en los hombres fumadores respecto a los no fumadores en las muestras luego del swim-up. Por lo que podemos concluir que el análisis de la fragmentación del DNA espermático después del capacitado es el que puede realmente detectar el efecto perjudicial producido por el tabaco sobre el espermatozoide. Este efecto nocivo altera el proceso de selección del swim-up en los fumadores, sin embargo, las bases moleculares y celulares de este fenómeno no han sido elucidadas, por tanto es recomendable que los hombres que buscan descendencia eviten el consumo de tabaco.

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AUMENTO DE LA FRAGMENTACIÓN DEL DNA ESPERMÁTICO EN
LOS FUMADORES TRAS LA CAPACITACIÓN MEDIANTE SWIM-UP.
Sperm selection by swim-up in terms of DNA fragmentation as measured by the Sperm Chromatin
Dispersion test (SCD) is altered in heavy smokers.
1 1 2 1 1 2
Thamara Viloria, Nicolás Garrido , José Luis Fernández, José Remohí, Antonio Pellicer, Lourdes Muriel, Marcos Meseguer 1
1 2
IVI Valencia, Universidad de Valencia. Sección de Genética y Unidad de Investigación, Hospital "Teresa Herrera," Complejo
3
Hospitalario Universitario Juan Canalejo, A Coruña, España. Departamento de Obstetricia y Ginecología Hospital Dr. Peset, Valencia,
España.
Peticiones de reimpresión: Dr. Thamara Viloria, IVI Valencia - Universidad de Valencia, e-mail: tviloria@ivi.es.
Resumen: los hábitos tóxicos y su relación con la infertilidad masculina, ha sido objeto de investigación en los últimos años y
dentro de los hábitos tóxicos más comunes dentro de la población está fumar el cigarrillo. Por otro lado, la fragmentación del
DNA espermático ha sido relacionada con la infertilidad y disminución de la calidad embrionaria en trabajos previos. Este
estudio se ha llevado a cabo con la finalidad de investigar la asociación entre el tabaco y la fragmentación del DNA espermático
en muestras de semen fresco y capacitado en hombres infértiles que asisten para un tratamiento de reproducción.
Un total de 99 pacientes proporcionaron una muestra de semen; se descartaron previamente otras causas de fragmentación del
DNA mediante un cuestionario y se establecieron 3 grupos de acuerdo al consumo de tabaco: no fumadores, fumadores
moderados (1-19 cigarrillos/día) y muy fumadores (≥20 cigarrillos /día). El análisis de la fragmentación se llevó a cabo mediante
la prueba de la Dispersión de la Cromatina (SCD) antes y después del swim-up. No se observaron diferencias significativas en
cuanto a la fragmentación del DNA según el hábito de fumar en las muestras en fresco; sin embargo, hubo un incremento
significativo de células espermáticas con el DNA fragmentado en los hombres fumadores respecto a los no fumadores en las
muestras luego del swim-up. Por lo que podemos concluir que el análisis de la fragmentación del DNA espermático después del
capacitado es el que puede realmente detectar el efecto perjudicial producido por el tabaco sobre el espermatozoide. Este efecto
nocivo altera el proceso de selección del swim-up en los fumadores, sin embargo, las bases moleculares y celulares de este
fenómeno no han sido elucidadas, por tanto es recomendable que los hombres que buscan descendencia eviten el consumo de
tabaco.
Palabras clave: Fragmentación del DNA / Prueba de Dispersión de la Cromatina (SCD) / fertilización in vitro /
cigarrillo/ espermatozoide
Abstract: Toxic habits and its relation with male infertility has been a matter of investigation in the recent years and smoking is
one of the commonest life-style toxic exposures to harmful substances. Sperm DNA fragmentation has been previously linked to
infertility and low embryo quality in several works. This cross-sectional study was carried out to investigate the association
between cigarette smoking and sperm DNA fragmentation in raw and capacitated sperm from infertile males undergoing assisted
reproduction treatments (ART).
A total number of 99 infertile males provided one semen sample, other causes of DNA fragmentation was discarded by a previous
questionnaire and three groups were established according to the cigarette consumption: non-smokers, light smokers(1-19
cigarettes/day) and heavy smokers (≥20 cigarettes/day), then analyses of the sperm DNA fragmentation was carried out by the
Sperm Chromatin Dispersion (SCD) test before and after swim-up treatment. We could observed no differences in the sperm DNA
fragmentation in the raw semen samples regardless the smoking habits; nevertheless there is a significant increase in the
incidence of sperm cells with DNA strand breaks in male smokers compare to non smokers after the evaluation of post swim-up
samples. And we concluded that the analysis of sperm DNA fragmentation after capacitation can really detect the detrimental
effect produced by tobacco. This deleterious effect alters the sperm swim-up selective process in smokers but molecular and
cellular basis of this phenomenon remain to be elucidated, but based on these evidences, leaving smoking is advisable in males
attending to reach parenthood.
Key words: DNA fragmentation / sperm chromatin dispersion test (SCD) / In vitro Fertilization / cigarette smoking / sperm

2. A R T Í C U L O S
Thamara Viloria et al. Aumento de la Fragmentacion del DNA...
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INTRODUCCIÓN 1982). El tabaco consiste en su mayo- dios serios, objetivos y completos que
ría de carbohidratos y proteínas (aprox revelen la acción que estos ejercen en
El término “Infertilidad” se define 50%). Otro constituyente significante el espermatozoide, principalmente en
como la incapacidad de una pareja de son alcaloides (0,5-5%) con la nicoti- población con deseos de gestación.
conseguir un embarazo luego de rela- na como compuesto predominante
ciones sexuales regulares no protegi- (90-95% de los alcaloides totales), po- Con este fin, hemos aprovechado el
das. Aproximadamente un 15% de las lifenoles (0,5-4,5%), fitoteroles (0,1- conocimiento ganado en los trata-
parejas con deseo de gestación tienen 2,5%), ácidos carboxílicos (0,1- mientos de reproducción asistida
dificultad de concebir tras este perío- 0,7%), hidrocarbonos aromáticos, al- (TRA) después de la introducción de
do. El factor masculino es por sí solo dehídos, cetonas, aminas, pesticidas, diversos análisis como la prueba de la
el causante de esa infertilidad en un etc (0,01-5%) y más de 30 compues- Dispersión de la Cromatina (SCD) para
20% de los casos y contribuye en otro tos metálicos (Wynder and Hoffmann, estudiar el efecto del tabaco sobre la
30-40%, siendo las alteraciones en el 1967; Internacional Agency for integridad del DNA de los espermato-
semen el origen de la misma Research on Cancer, 1986). zoides antes y después del swim-up
(Rodríguez et al., 2005). en parejas que consultan por infertili-
La nicotina, el principal alcaloide del dad.
El sistema reproductivo es bastante tabaco, está presente en los cigarrillos
complejo, sin embargo, los diseños en una cantidad que varía desde 0,8- Este estudio introduce nuevos avan-
experimentales de pruebas in vitro e 1,8 mg/cigarrillo, dependiendo de la ces respecto a las consecuencias del
in vivo nos pueden ser útiles para de- marca y tamaño del mismo (Benowitz tabaco en la reproducción humana.
tectar algunas alteraciones. Por tanto, et al., 1983; Rosa et al., 1992). Tanto
la reproducción asistida nos brinda un como 1mg de nicotina puede ser ab- Fragmentación del DNA y tabaco:
espacio ideal para estudiar algunos sorbido al fumar 1 solo cigarrillo. Este Se estima que un 25% de las cau-
factores que podrían estar afectando es un alcaloide muy tóxico que se ab- sas de infertilidad son de origen idio-
la calidad seminal y sus implicaciones sorbe rápidamente por el tracto respi- pático y la etiología de algunas de es-
a nivel reproductivo. ratorio, la mucosa bucal y la piel tas causas podría estar relacionada
(Gandini et al., 1997). con daño en el DNA de los esperma-
A lo largo de los años, muchos han tozoides.
sido los factores relacionados a la in- La cotinina, su mayor metabolito, es
fertilidad masculina, como: infeccio- un compuesto más estable que la ni- La fragmentación de DNA en el es-
nes, varicocele (Pomerol, 2002), obs- cotina, con un tiempo de vida media permatozoide está siendo cada vez
trucciones y alteraciones en la pro- de aproximadamente 20h (la vida me- más reconocida como una importante
ducción espermática (Ballescá, dia de la nicotina es de unas 2h) y su causa de infertilidad, y aunque el ori-
2002), causas genéticas (Egozcue, concentración no se ve influenciada gen del daño a nivel del DNA no es
2002) y muchas veces la causa es por otros factores como por ejemplo la claro (Muratori et al., 2000; Sergerie
desconocida y pueden afectar en ma- dieta. En el hombre, la nicotina y/o co- et al., 2005), se han propuesto algu-
yor o menor medida a la calidad semi- tinina ha sido detectada en plasma se- nos mecanismos como: defectos en la
nal. Sin embargo, su relación con los minal de acuerdo al consumo de ciga- compactación de la cromatina duran-
hábitos tóxicos ha sido motivo de in- rrillos (Pacifi et al., 1993, 1995; Vine te la espermiogénesis, inducción de la
vestigación en los últimos años, de et al., 1993; Zenzes et al., 1999), lo apoptosis durante el proceso de es-
sus resultados se han descrito algunos que indica el paso de estos metaboli- permatogénesis e inducción de daño
agentes ambientales tóxicos que pue- tos a través de la barrera hemato-tes- de DNA en espermatozoides diferen-
den deteriorar la espermatogénesis, ticular. ciados maduros por espermatozoides
ejerciendo efectos nocivos a nivel pre- inmaduros que producen niveles ele-
testicular, testicular o post-testicular Esto sugiere que ciertos componen- vados de radicales libres (ROS)
(Oliva et al., 2001; Pflieger-Bruss et al., tes del tabaco interactúan, directa o (Garrido et al., 2004).
2004). Uno de estos agentes es el con- indirectamente, afectando la función
sumo del tabaco; el cual está amplia- y viabilidad de los gametos; y el meca- Una causa potencial de la fragmen-
mente reconocido como un problema nismo que envuelve este resultado tación de DNA es la exposición a toxi-
de salud pública y una de las mayores aún necesita ser elucidado. nas ambientales; sin embargo, pocos
causas de muertes prevenibles. datos apoyan el concepto de un im-
Aproximadamente una tercera parte de El incipiente incremento del interés pacto negativo extenso de contami-
la población mundial mayor de 15 años público respecto al declive del poten- nantes ambientales en los resultados
es fumadora (World Health cial fértil masculino, y sobre todo, el del análisis del semen (Sun et al.,
Organization, 1997). Así mismo, el taba- deseo de conocer el efecto que tienen 1997). Algunas de estas toxinas se
co afecta la salud reproductiva. los componentes medioambientales y podían relacionar con el consumo de
El cigarrillo contiene algunos cientos ocupacionales, y los hábitos de la so- tabaco.
de compuestos (Dube and Green, ciedad actual, hacen necesarios estu-

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La relación entre el cigarrillo y la Se les realizó el test de SCD, sin co- Posteriormente, el sobrenadante (0,1-
fragmentación del DNA del esperma- nocer, si eran fumadores o no. 0,5ml) fue separado en otro tubo.
tozoide ha sido establecida por algu- Posteriormente a los análisis, se pro- Luego, para la determinación de la
nos autores (Sun et al., 1997; cedió a hacer una encuesta a los pa- fragmentación del DNA se tomaron
Muratori et al., 2000; Zenzes, 2000). cientes acerca de sus hábitos tabáqui- alícuotas (entre 10 y 100µl) con con-
No obstante, Sergerie et al. (2005) cos en el momento en el cuál fue rea- centraciones entre 5-10 millones de
han reportado una no asociación en lizado el ciclo y los 3 meses anterio- spz/ml de cada muestra de semen an-
hombres sanos fumadores y no fuma- res. Se estipularon tres grupos según tes y después del swim-up para ser
dores; y Belcheva et al. encontraron el consumo diario de cigarrillo en los procesadas como describe Fernández
que el daño en el DNA de los esper- varones: no fumadores (n= 51), fuma- et al. (2003).
matozoides de los fumadores estaba dores moderados: de 1-19 cigarrillos
incrementado con respecto al de los por día (n= 21) y varones muy fuma- Se establecieron 5 patrones de SCD:
no fumadores, pero esta diferencia no dores: más de 19 cigarrillos por día a) Células espermáticas de halo gran-
resultaba estadísticamente significati- (n= 27); y se analizaron los datos. de (CHG): su anchura es similar o
va. más grande que el diámetro menor
Aquellos pacientes que hubieran del nucleoide; b) Células espermáti-
Uno de los mecanismos sugeridos consumido drogas o alcohol en los 3 cas de halo mediano (CHM): su halo
podría estar relacionado con la inter- meses previos a la realización del es- está entre aquellos con halo grande y
ferencia nicotínica sobre la organiza- tudio, fueron incluidos. También éstos halo muy pequeño. Células espermá-
ción de la membrana espermática y fueron excluidos, si tenían historia re- ticas sanas (CS): este subgrupo inclu-
por lo tanto en la reacción acrosómica ciente de fiebre o exposición a gona- ye las HG y HM, es decir, aquellas sin
(Arabi, 2004) inducida por ZP3, una dotoxinas como quimioterapia, radio- fragmentación de DNA; c) Células es-
proteína de la zona pelúcida que des- terapia, pesticidas o exposición ocu- permáticas de halo muy pequeño
empeña un papel fundamental duran- pacional a metales pesados. Además, (CHP): su espesor es similar o más
te la fertilización, funcionando como se investigó acerca de la presencia de pequeño que la tercera parte (1/3) del
un receptor específico para el esper- varicocele, torsión testicular, etc., para diámetro menor del nucleoide; d)
matozoide (Hinsch et al., 2005). no incluirlos en los mismos. Células espermáticas sin halo (CSH);
e) Células espermáticas degradadas
El propósito en este estudio es in- Fragmentación del DNA espermático. (CD): son similares al grupo “d”, pero
vestigar la asociación entre el taba- Prueba de Dispersión de la Cromatina además están débilmente o irregular-
quismo y la fragmentación de DNA del (SCD) mente teñidas. Las células espermáti-
espermatozoide en parejas infértiles cas de halo pequeño, sin halo y degra-
sometidas a tratamientos de repro- El SCD (Halosperm® kit, INDAS la- dadas contienen DNA fragmentado.
ducción asistida, utilizando el SCD an- boratories, España) es una prueba Finalmente los nucleoides que no co-
tes y después del procedimiento de desarrollada recientemente, descrita rresponden a células espermáticas
swim-up como técnica de capacita- por Fernández et al., (2003), basada fueron separados del recuento.
ción espermática en hombres fuma- en el hecho de que en los espermato-
dores y no fumadores. zoides con las cadenas de DNA intac- Análisis estadístico: Las compara-
tas se produce una descompactación ciones de la fragmentación del DNA
MATERIALES Y MÉTODOS de los bucles de DNA, empaquetados con respecto a los 3 grupos estudia-
en la matriz nuclear, tras haber sido dos antes y después del swim-up, se
Población: La población objeto de expuesto a un tratamiento ácido, se- realizaron por la prueba de análisis de
estudio son pacientes infértiles que guido a un tratamiento con agentes varianzas (ANOVA) cuando los datos
asisten a tratamientos de reproduc- reductores y detergentes. Esta des- seguían una distribución normal,
ción asistida en nuestro centro, del compactación produce un halo alre- mientras que cuando estas seguían
cual se seleccionaron aleatoriamente dedor de la matriz nuclear que se una distribución anormal se utilizó la
las muestras de semen de los maridos puede visualizar por microscopía de prueba de Kruskal-Wallis (prueba no
de parejas que asisten al laboratorio campo claro usando tinciones habi- paramétrica). El análisis estadístico
de andrología del IVI para un trata- tuales como el Diff-Quick. Por el con- fue llevado a cabo usando el
miento de infertilidad con previo con- trario, si una de las cadenas de DNA Statistical Package for the Social
sentimiento de los pacientes, ya que está dañada, no se produce halo, ob- Sciences (SPSS Inc., Chicago, IL,
son pruebas que no se realizan de ru- servándose núcleos condensados. USA). La significancia estadística se
tina en el laboratorios. Un total de 99 ha definido como P<0,05.
hombres proporcionaron 99 muestras Para el análisis de las muestras se
de semen para ser analizadas. El ran- realizó el estudio macro y microscópi- RESULTADOS
go de edad fue de 26 a 49 años, con co del semen según lo descrito ante-
una media de 36. riormente. Todas las muestras fueron Los resultados de la fragmentación
procesadas por swim-up. del DNA de espermatozoides en las

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Thamara Viloria et al. Aumento de la Fragmentacion del DNA...
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muestras de los pacientes antes de ficativas. nificativamente luego del swim-upen
ser procesadas por swim-up de acuer- los fumadores moderados y muy fuma-
do al número de cigarrillos fumados De igual forma, en los porcentajes de dores (Phb=0,001 y Pic<0.001 respec-
por los varones, no revelaron diferen- CSH y CD se observó que los daños en tivamente) en comparación con aque-
cias significativas entre los 3 grupos el DNA de los espermatozoides de los llos hombres sin este hábito, lo que in-
estudiados dependiendo de la canti- fumadores moderados estaban incre- dica una positiva selección de esper-
dad de cigarrillos por día. Hombres no mentados, pero las diferencias no re- matozoides con DNA fragmentado lue-
fumadores, fumadores moderados y sultaron estadísticamente significativas. go de la capacitación en los hombres
muy fumadores, tuvieron similar pa- fumadores. Particularmente en los
trón de distribución entre las diferentes Posteriores comparaciones múltiples hombres muy fumadores este incre-
categorías de acuerdo al tamaño del entre la fragmentación del DNA de las mento fue de más del 100%.
halo luego de hacer el SCD, es decir, muestras de semen antes y después
porcentajes de células con CHG, CHM, del swim-up de acuerdo al número de Incluso, en los hombres no fumado-
CS, CHP, CSH y CD (Figura 1a y 2a). cigarrillos fumados (comparaciones en- res se observó una gran disminución de
tre figuras 1a con 1b y 2a con 2b res- las CSH y CD (Pjk=0,007 y Plm=0,006
Las Figuras 1b y 2b, muestran los re- pectivamente), mostraron que en los respectivamente), lo cual supone una
sultados de la fragmentación del DNA hombres muy fumadores hubo una dis-
reducción de espermatozoides con
de espermatozoides en las muestras minución significativa (aproximada-
DNA fragmentado luego del swim-up
luego de ser procesadas por swim-up mente del 50%: 72,8 IC 95% [23,8-
en este grupo, sin embargo esta dis-
de acuerdo al número de cigarrillos fu- 67,3] y 47,3 IC 95% [9,4-97,4]) de las
minución no fue significativa.
mados. CHG (Pde=0,020), luego del swim-up.
Por tanto, estos hallazgos en las alí-
Comparaciones entre esos grupos No se encontraron diferencias signifi-
cuotas post swim-up sugieren que el
muestran diferencias significativas en cativas en las CHM entre los grupos an-
tes y después de la capacitación.
tabaco altera selectivamente la habili-
las CHP. Los porcentajes de CHP en los
fumadores moderados se incrementa- También, en los hombres muy fumado- dad del proceso de selección espermá-
ron respecto a aquellos que no fumaban res se encontró una disminución muy tica en los hombres fumadores.
(15,0 IC 95% [6,4-46,0] y 12,2 IC 95% marcada en las CS (que son el total de
[0,0-32,7]) (Pab=0,020), al igual que en las células no fragmentadas) luego del
los hombres muy fumadores compara- swim-up (Pfg<0,001) (78,7 IC 95%
do con el grupo de los no fumadores [44,4-95,3] y 60,0 IC 95% [15,4-
(19,2 IC 95% [0,9-46,0] y 12,2 IC 95% 98,7]); adicionalmente, se observó un
[0,0-32,7]) (Pac=0,013), demostrándo- incremento de este tipo de células es-
se así un daño en la calidad del DNA permáticas (CS) en el grupo de hom-
entre fumadores en general (modera- bres muy fumadores luego del procesa-
dos y muy fumadores) y no fumadores. miento por swim-up, pero este no fue
Además, los porcentajes de CHG y CS significativo.
se vieron disminuidos en los dos grupos
de hombres fumadores comparados Por otra parte, en el mismo gráfico se
con aquellos que no fumaban, aunque puede observar, desde otro punto de
estas diferencias no llegaron a ser signi- vista que, las CHP incrementaron sig-
Figura 1 Resultados de la fragmentación del DNA en muestras de semen antes y después del swim-up de acuerdo a la cantidad de cigarrillos fumados.

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Figura 2 Representación del total de células sanas (no fragmentadas) en muestras de semen antes y después del swim-up de acuerdo a la cantidad de
cigarrillos fumados.
DISCUSIÓN
Aunque muchos trabajos sugieren Sergerie et al. (2005), describieron la no los mejores espermatozoides (mejor
que existen agentes físicos y químicos asociación entre tabaco y fragmenta- movilidad y morfología), imitando así
en el ambiente, muchos de ellos han ción de DNA espermático en muestras los procesos que ocurren en el tracto
sido introducidos y propagados por la de semen en fresco de hombres sanos reproductor femenino en condiciones
actividad humana, pudiendo afectar (no infértiles); y Saleh et al. (2002), es- naturales. Muratori et al., (2000) des-
la fertilidad masculina (Oliva et al., tudiaron esta asociación en hombres in- cribieron que hasta cierto punto la
2001), sin embargo, el impacto del fértiles y reportaron que las diferencias fragmentación del DNA estaba positi-
consumo de tabaco en la fertilidad entre fumadores y no fumadores no era vamente relacionada con una morfo-
masculina resulta un tema controver- estadísticamente significativa. logía anormal en el espermatozoide y
tido (Vine et al., 1996). asociada con defectos en la cola;
No obstante, encontraron que las pero encontraron una correlación ne-
Los resultados de este estudio sos- muestras de semen de los hombres gativa entre DNA roto y movilidad
tienen que: (i) no hay diferencias en infértiles fumadores tenían altos nive- progresiva.
la fragmentación del DNA de los es- les de estrés oxidativo (OS) que en los
permatozoides en las muestras de se- no fumadores. Esto fortalece los re- Basándonos en trabajos previos,
men en fresco a pesar de los hábitos ta- sultados del presente trabajo y refuer- donde se encontró que las tasas de
báquicos; y (ii) hay un incremento sig- za la hipótesis que el efecto ejercido por fecundación y algunos indicadores de
nificativo en la incidencia de células es- algunos factores perjudiciales, que calidad embrionaria estaban relacio-
permáticas con las hebras de DNA ro- afectan los gametos masculinos, podrí- nados con el alcance de la fragmenta-
tas en los hombres fumadores luego de an estar encubiertos en el eyaculado, ción del DNA espermático post swim-
evaluar las muestras procesadas por siendo los mismos apreciables solo en up (Muriel et al., 2006); éstos en con-
swim-up. la selección de espermatozoides por junto con los resultados del actual es-
swim-up. tudio, se puede concluir que la vía
Primero se realizó la prueba de SCD para determinar la fragmentación del
en las muestras de semen en fresco y Se debe recalcar que las muestras DNA parece evidente que debería ser
el resultado de la fragmentación del empleadas en cualquier TRA están evaluando las alícuotas tras el proce-
DNA en los 3 grupos de hombres es- previamente procesada en el labora- samiento por swim-up.
tudiados, de acuerdo al consumo de torio con la finalidad de eliminar las Con el fin de perfeccionar estos ha-
cigarrillos por día, fue comparable. células no espermáticas y seleccionar llazgos, se hicieron comparaciones

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múltiples entre los 3 grupos estudia- espermático entre hombres infértiles los fumadores, pero posiblemente si
dos y los resultados antes y después (fumadores y no fumadores) luego esté seleccionando mejor los esper-
del swim-up; y diferencias significati- del procesamiento por swim-up que matozoides no fragmentados en los
vas indican que los hombres fumado- pudiera sugerir un posible vínculo no fumadores.
res moderados y muy fumadores pre- con las toxinas ambientales. Otros
sentan un número significativamente estudios llevados a cabo por La suma de ambos efectos se tradu-
mayor de células espermáticas con Belcheva et al. (2004), en donantes ce en esa diferencia significativa lue-
DNA dañado luego del capacitado normozoospérmicos antes de la ca- go del swim-up. Basándonos en estas
que los no fumadores. Es más, los pacitación por Percoll, concluyeron evidencias, es aconsejable que los
hombres no fumadores tuvieron una que la fragmentación del DNA en es- hombres que son atendidos por infer-
disminución significativa de células permatozoides de donantes sanos tilidad en TRA o que buscan descen-
espermáticas degradadas (CD) y en (no infértiles) fumadores permanecía dencia eviten el consumo de tabaco.
general menos espermatozoides con dentro del rango normal. Sin embar-
DNA deteriorado. go, ellos observaron que el fumar ci- BIBLIOGRAFÍA
garrillos inducía un deterioro en la
Estudios previos sobre fragmenta- membrana plasmática de las células Ballescá JL. “Estudio del varón estéril”. En:
ción del DNA espermático y consu- espermáticas. Reproducción Humana 2ª ed. McGraw-
mo de tabaco, han sido realizados Hill Interamericana. Madrid 2002; 279-
en semen en fresco (Sergerie et al., En conclusión, el análisis de la 286.
2000; Saleh et al., 2002) o semen ca- fragmentación del DNA en las mues-
pacitado (Sun et al., 1997; Younglai et tras de eyaculado (en fresco) oculta Belcheva A, Ivanova-Kicheva M, Tzvetkova P,
al., 2001; Belcheva et al., 2004) inde- el efecto perjudicial real del tabaco, Marinov M. Effects of cigarette smoking on
pendientemente, pero no se ha es- ya que no se han encontrado dife- sperm plasma membrane integrity and DNA
tudiado un diseño como el de este rencias con respecto al consumo de fragmentation. Int J Androl 2004;27(5):296-
trabajo donde se han comparado las tabaco, que apuntarían a la conclu- 300.
muestras antes y después del capa- sión “errónea” que el mismo no in-
citado e introduciendo un factor ex- fluye en la fragmentación del DNA. Benowitz NL, Kuyt F, Jacob P III and Jones
terno. RT. Cotinine disposition and effects. Clin.
Pero es luego del capacitado, don- Pharmacol. Ther. 1983. 34, 604-611.
Respecto al procesamiento en el de realmente se puede detectar el
laboratorio, algunos estudios han efecto perjudicial producido por el De Jonge C. The clinical value of sperm nu-
analizado la relevancia de la prepa- tabaco. Este efecto deletéreo está clear DNA assessment. Fertil Steril.
ración del semen en el porcentaje afectando la selección espermática 2002;5:51–53.
de células con DNA fragmentado. por la interferencia en el proceso del
swim-up, demostrando que el taba- Dube MF and Green CR. Methods of collection
La técnica de swim-up para el ca- of smoke for analytical purposes. Recent Adv.
co, altera selectivamente la capaci-
pacitado de espermatozoides móvi- Tobacco Sci. 1982, 8, 42-102.
tación del semen por swim-up en los
les ha sido estudiada por Younglai et hombres fumadores. Las bases celu-
Egozcue J. “Esterilidad masculina de causa
al. (2001), en hombres que asisten lares y moleculares de este fenóme-
genética”. En: Reproducción Humana 2ª
a una clínica de infertilidad, con el no quedan aún por elucidar; pero se ed. McGraw-Hill Interamericana. Madrid
fin de determinar si este procedi- pueden plantear algunas posibles 2002; 309-312.
miento puede ocasionar efectos per- opciones, como: a) que la fragmen-
judiciales en el DNA espermático; y tación del DNA (como proceso conti- Fernandez JL, Muriel L, Rivero MT,
encontraron que no existían diferen- nuo) se produzca también luego del Goyanes V, Vazquez R, Alvarez JG. The
cias significativas entre la fragmen- eyaculado, estando incrementado en sperm chromatin dispersion test: a sim-
tación del DNA en la muestra fresca los pacientes fumadores y subse- ple method for the determination of
y en la procesada por swim-up y por cuentemente las células que están sperm DNA fragmentation. J Androl
el método de swim-up directo (sin algo fragmentadas (halo mediano) 2003; 24(1):59-66.
centrifugar); pero en el mismo, no se terminen fragmentándose completa-
estudió ningún factor perjudicial exter- mente tras la incubación durante 1 Gandini L, Lombardo F, Lenzi A et al. The in-
no como por ejemplo el consumo de hora aproximadamente en el proceso vitro effects of nicotina and cotinine on
tabaco de capacitado; b) además esta obser- sperm motility. Hum. Reprod. 1997, 12,
Al igual que en este estudio, Sun vación luego del capacitado no signifi- 727-733
et al. (1997) describieron un incre- ca que este proceso esté aumentando
mento en la fragmentación del DNA los espermatozoides fragmentadas en Garrido N, Meseguer M, Álvarez JG,
Simón C, Pellicer A, Remohí J

7. A R T Í C U L O S
Diciembre 2006 Vol. 11 • Nº2
21
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