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TÉCNICAS DE
MICROMANIPULACIÓN
CÓMO MEJORAR LAS TASA DE
      GESTACIÓN


        ESTHER GREGORI MACHÍ
          Licenciada en Biología.
          Máster en Biología Clínica y Experimental de la Reproducción.
          Instituto FIVIR
HISTORIA




Patrick Steptoe y Robert Edwards

 Primer “bebé probeta”.
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                             FIV convencional




Complejo Cumulo-Corona-Ovocito        Cultivo ovocito-espermatozoides
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Técnicas de MICROMANIPULACIÓN
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• ICSI “Intracytoplasmic Sperm Injection”: “Pregnancies after
intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte”, Palermo
y cols., 1992.
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Ovocito VG
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                    Ovocito MII
ICSI – Indicaciones


• Factor masculino grave: oligozoospermia, asteno, terato.
• Factor inmunológico: presencia Ac-antispz.
• “Sémenes valiosos”
• Fallos previos de FIV.
• DGP
• Baja respuesta.
• Mala calidad ovocitaria.
• Ovocitos desvitrificados.
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• Ebner y cols., 2002: presión y succión

• Rienzi y cols, 2001.
  Nagy y cols., 2002: ICSI por láser.

• Tesarik y cols., 2002: dislocación ooplasma.

• Baltaci y cols., 2009: activación piezoeléctrica.
IMSI: ICSI Altamente Magnificada
ASSISTED HATCHING


• Cohen, 1989.
• Objetivo: mejorar el potencial implantatorio.
• Metodología: perforación o adelgazamiento ZP
         - Zona Drilling,
         - PZD
         - Ablación por láser
         - Tratamiento enzimático

Balaban, 2002: evaluó los cuatro métodos
diferentes y concluyó que tenían similares tasas
de implantación y embarazo.
ASSISTED HATCHING

• INDICACIONES recomendadas:

  •   Ovocitos de pacientes mayores 37 años.
  •   Ovocitos ZP engrosada, color anormal.
  •   Valores elevado de FSH basal sérica.
  •   Fracaso repetido de implantación.
  •   Embriones de baja calidad.
  •   Embriones congelados/descongelados.

 Mayor incidencia gemelos monocigóticos y
embarazos ectópicos.
ELIMINACION
DE FRAGMENTOS
TRANSFERENCIA de CITOPLASMA


• Hipótesis: efectos ooplasma interfieren en
desarrollo e implantación.

• Ha habido embarazos pero faltan estudios
controlados para verificar sus beneficios.

• Futuro: implicaciones éticas.
CONTRACCIÓN ARTIFICIAL
       CAVIDAD BLASTOCELE

• Blastocele: cavidad llena de agua.

• Para mejorar la vitrificación: reducción
blastocele y salida del agua.

• Las tasas de embarazo mejoran al compararlo
con un grupo control sin micromanipular.

• Mukaida: láser para contracción. Método más
simple y conveniente.
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Tecnicas de micromanipulacion en reproduccion asistida

  • 1. TÉCNICAS DE MICROMANIPULACIÓN CÓMO MEJORAR LAS TASA DE GESTACIÓN ESTHER GREGORI MACHÍ Licenciada en Biología. Máster en Biología Clínica y Experimental de la Reproducción. Instituto FIVIR
  • 2. HISTORIA Patrick Steptoe y Robert Edwards Primer “bebé probeta”. Louise Brown, 1978.
  • 3. HISTORIA FIV convencional Complejo Cumulo-Corona-Ovocito Cultivo ovocito-espermatozoides
  • 6. EL OVOCITO Espacio Perivitelino Zona Pelúcida: glicoproteínas Ooplasma Oolema
  • 7.
  • 8. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN • “Zona Drilling”: ácido Tyrodes. • “Partial Zona Dissection” PZD: incisión en la ZP. • “Subzonal Insertion” SUZI: inserción de spzs en el espacio perivitelino. • Yanagimachi, 1976.
  • 9. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN • ICSI “Intracytoplasmic Sperm Injection”: “Pregnancies after intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte”, Palermo y cols., 1992.
  • 10. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN • ICSI • IMSI • Assisted Hatching: Eclosión Asistida. • Eliminación de fragmentos. • Transferencia de citoplasma. • DGP: biopsia CP o blastómeras. FUTURO: • Clonación. • Células madre. • Transgénicos.
  • 11. ICSI • Denudación ovocitaria: Hyaluronidasa + pipeteo mecánico • Caja de ICSI
  • 12. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN Ovocito VG Ovocito MI Ovocito MII
  • 13. ICSI – Indicaciones • Factor masculino grave: oligozoospermia, asteno, terato. • Factor inmunológico: presencia Ac-antispz. • “Sémenes valiosos” • Fallos previos de FIV. • DGP • Baja respuesta. • Mala calidad ovocitaria. • Ovocitos desvitrificados.
  • 14. ICSI - Modificaciones • Ebner y cols., 2002: presión y succión • Rienzi y cols, 2001. Nagy y cols., 2002: ICSI por láser. • Tesarik y cols., 2002: dislocación ooplasma. • Baltaci y cols., 2009: activación piezoeléctrica.
  • 15. IMSI: ICSI Altamente Magnificada
  • 16. ASSISTED HATCHING • Cohen, 1989. • Objetivo: mejorar el potencial implantatorio. • Metodología: perforación o adelgazamiento ZP - Zona Drilling, - PZD - Ablación por láser - Tratamiento enzimático Balaban, 2002: evaluó los cuatro métodos diferentes y concluyó que tenían similares tasas de implantación y embarazo.
  • 17. ASSISTED HATCHING • INDICACIONES recomendadas: • Ovocitos de pacientes mayores 37 años. • Ovocitos ZP engrosada, color anormal. • Valores elevado de FSH basal sérica. • Fracaso repetido de implantación. • Embriones de baja calidad. • Embriones congelados/descongelados.  Mayor incidencia gemelos monocigóticos y embarazos ectópicos.
  • 19. TRANSFERENCIA de CITOPLASMA • Hipótesis: efectos ooplasma interfieren en desarrollo e implantación. • Ha habido embarazos pero faltan estudios controlados para verificar sus beneficios. • Futuro: implicaciones éticas.
  • 20. CONTRACCIÓN ARTIFICIAL CAVIDAD BLASTOCELE • Blastocele: cavidad llena de agua. • Para mejorar la vitrificación: reducción blastocele y salida del agua. • Las tasas de embarazo mejoran al compararlo con un grupo control sin micromanipular. • Mukaida: láser para contracción. Método más simple y conveniente.
  • 21. FUTURO CLONACION - Transferencia Nuclear de Células Somáticas (SCNT) - Clonación TERAPÉUTICA - Clonación REPRODUCTIVA CÉLULAS MADRE TRANSGÉNICOS