LES EMPREINTES GENETIQUES BERNAT Xavier LS3 BGS
PLAN <ul><li>Introduction </li></ul><ul><ul><li>Généralités </li></ul></ul><ul><ul><li>Définition </li></ul></ul><ul><ul><...
INTRODUCTION <ul><li>Généralités </li></ul><ul><ul><li>ADN  = assemblage de séquences de 4  nucléotides  A, C, T et G. </l...
INTRODUCTION <ul><li>Définition </li></ul><ul><ul><li>Résultat d’analyses ADN </li></ul></ul><ul><ul><li>Technique d’analy...
INTRODUCTION <ul><li>Principe et domaines d’utilisation </li></ul><ul><ul><li>Utilisée à des fins d'identification dans la...
METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>Les séquences d’ADN qui ne codent pour aucune protéine sont répétées, nous en disting...
METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>Méthode PCR (Polymerase Chain Reaction) </li></ul><ul><ul><li>Technique d’amplificati...
METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><ul><li>Différentes étapes de la PCR </li></ul></ul>
METHODES D’ETUDES ET ANALYSES <ul><ul><li>Différentes étapes de la PCR </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Conditions natives (...
METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>A la suite de la PCR, l’analyse du produit se fait grâce à une électrophorèse sur gel...
METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>Méthode RFLP   (Restriction Fragment Length Polymorphism) </li></ul><ul><ul><li>Toute...
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CONCLUSION <ul><li>Grâce à toutes ces méthodes d’analyse, telle que la PCR, le scientifique a pu exploiter les empreintes ...
GLOSSAIRE <ul><li>ADN  : Acide Désoxyribonucléique </li></ul><ul><ul><li>1 : Sucre, phosphate </li></ul></ul><ul><ul><li>2...
GLOSSAIRE <ul><li>Gène  :  séquence d’ADN codant pour la synthèse d’une protéine ou d’ARN </li></ul><ul><li>Loci  :  (plur...
GLOSSAIRE <ul><li>Polymorphisme  :  variation entre individus dans la séquence des gènes. Non pathogène </li></ul><ul><li>...
BIBLIOGRAPHIE <ul><li>www.snv.jussieu.fr/bmedia/PCR/index.htm </li></ul><ul><li>http://fr.wikipédia.org </li></ul><ul><ul>...
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Les Empreintes Genetiques

  1. 1. LES EMPREINTES GENETIQUES BERNAT Xavier LS3 BGS
  2. 2. PLAN <ul><li>Introduction </li></ul><ul><ul><li>Généralités </li></ul></ul><ul><ul><li>Définition </li></ul></ul><ul><ul><li>Historique </li></ul></ul><ul><ul><li>Principe et domaines d’utilisation </li></ul></ul><ul><li>Méthode d’étude et d’analyses </li></ul><ul><ul><li>Méthode PCR </li></ul></ul><ul><ul><li>Méthode RFLP </li></ul></ul><ul><ul><li>Méthode AmpFLP </li></ul></ul><ul><ul><li>Autres méthodes d’analyses </li></ul></ul><ul><li>Conclusion </li></ul><ul><li>Bibliographie </li></ul>
  3. 3. INTRODUCTION <ul><li>Généralités </li></ul><ul><ul><li>ADN = assemblage de séquences de 4 nucléotides A, C, T et G. </li></ul></ul><ul><ul><li>support de l’hérédité et de l’information génétique, déterminant la synthèse protéique par le biais des gènes . </li></ul></ul><ul><ul><li>Les portions codantes sont communes à beaucoup d’individus </li></ul></ul><ul><ul><li>Les portions non codantes sont spécifiques à chaque individu et constituent une signature génétique différente d’un individu à l’autre = empreinte génétique </li></ul></ul>
  4. 4. INTRODUCTION <ul><li>Définition </li></ul><ul><ul><li>Résultat d’analyses ADN </li></ul></ul><ul><ul><li>Technique d’analyse permettant l’établissement la carte d’identité génétique d’un individu et méthode d'identification quasi-absolue. </li></ul></ul><ul><ul><li>Analogie avec les empreintes digitales (propre à chacun) </li></ul></ul><ul><li>Historique </li></ul><ul><ul><li>1953 : découverte de la double hélice d’ADN au sein des chromosomes par J. WATSON et F. CRICK </li></ul></ul><ul><ul><li>Empreintes génétiques : technique développée par A. Jeffrey dans un but pénal </li></ul></ul>
  5. 5. INTRODUCTION <ul><li>Principe et domaines d’utilisation </li></ul><ul><ul><li>Utilisée à des fins d'identification dans la médecine légale et vétérinaire ainsi que dans des tests de paternité. </li></ul></ul><ul><ul><li>De très petits échantillons de tissus du corps (comme des échantillons de sang, de cellules de peau, de salive, de sperme ou de cheveux) peuvent fournir suffisamment d'ADN pour réaliser les tests. </li></ul></ul><ul><ul><li>Pour les enquêtes judiciaires ; Le Fichier national automatisé des empreintes génétiques ( FNAEG ), créé en 1998, est un fichier commun à la police et à la gendarmerie nationale française qui gère les traces d’ADN prélevées au cours des investigations. </li></ul></ul>
  6. 6. METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>Les séquences d’ADN qui ne codent pour aucune protéine sont répétées, nous en distinguons 2 sortes : </li></ul><ul><ul><li>Séquences microsatellites ( STR  : Short Tandem Repeats)  : pour la plupart séquences de 4 nucléotides (entre 2 et 5 sinon) répétées plusieurs fois </li></ul></ul><ul><ul><li>Séquences mini satellites ( VNTR  : Variable Number Tandem Repeats)  : séquences répétées entre 10 et 100 nucléotides. </li></ul></ul><ul><li>Manipulations : </li></ul><ul><ul><li>Extraction de l’ADN de l’échantillon cellulaire </li></ul></ul><ul><ul><li>Détection des loci (séquences répétées) </li></ul></ul><ul><ul><li>Choix de 13 loci pour rendre le résultat fiable </li></ul></ul><ul><li>Il existe plusieurs techniques d’analyse de l’ADN, mais 3 sont les plus utilisées </li></ul>
  7. 7. METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>Méthode PCR (Polymerase Chain Reaction) </li></ul><ul><ul><li>Technique d’amplification génique in vitro, basée sur les propriétés d’hybridation et de déshybridation des brins complémentaires d’ADN en fonction de la température. </li></ul></ul><ul><ul><li>Transitions thermiques cycliques : permettent le contrôle de l’activité enzymatique </li></ul></ul>
  8. 8. METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><ul><li>Différentes étapes de la PCR </li></ul></ul>
  9. 9. METHODES D’ETUDES ET ANALYSES <ul><ul><li>Différentes étapes de la PCR </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Conditions natives ( 0 ) </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Dénaturation initiative ( 1’ ) </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Phase de dénaturation ( 1 ) </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Phase d’hybridation, appariement des amorces ( 2 ) </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Phase d’élongation ( 3 ) </li></ul></ul></ul><ul><ul><li>Avantages </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Nécessite peu d’ADN (1 à 2.10 -9 g) </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Rapide (une journée) </li></ul></ul></ul>
  10. 10. METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>A la suite de la PCR, l’analyse du produit se fait grâce à une électrophorèse sur gel d’agarose, afin de calculer la taille du fragment d’ADN amplifié, un marqueur de taille migre en parallèle à l’échantillon). </li></ul>
  11. 11. METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>Méthode RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) </li></ul><ul><ul><li>Toute première technique d’analyse ADN </li></ul></ul><ul><ul><li>Supplantée par la PCR </li></ul></ul><ul><ul><li>Inconvénients </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Long et laborieux (1 semaine) </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Nécessite beaucoup d’ADN et de bonne qualité </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Taille exacte des bandes ADN est inconnue </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Résultats litigieux (manque de précision) </li></ul></ul></ul>
  12. 12. METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><ul><li>Différentes étapes </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Hydrolyse de l'ADN par une enzyme de restriction, </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Séparation des fragments de restriction par électrophorèse sur gel d’agarose, </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Dénaturation de l'ADN par la soude pour obtenir de l'ADN monocaténaire, </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Transfert sur membrane nylon, renforcement de la fixation. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Séparation en bandes par technique Southern Blot et révélation avec une ou plusieurs sondes </li></ul></ul></ul>
  13. 13. METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>Méthode AmpFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism) </li></ul><ul><ul><li>Technique plus rapide que RFLP </li></ul></ul><ul><ul><li>Utilise la PCR pour répliquer les échantillons d’ADN </li></ul></ul><ul><ul><li>Méthode hautement sensible pour la détection de polymorphismes dans l’ADN </li></ul></ul><ul><ul><li>Avantages  : </li></ul></ul><ul><ul><ul><li>Coût modeste </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Facilité de mise en place et d’exploitation </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Convient aux petits laboratoires </li></ul></ul></ul>
  14. 14. METHODES D’ETUDE ET ANALYSES <ul><li>Autres méthodes d’analyses </li></ul><ul><ul><li>Méthode RAPD (Ramdom Amplification of Polymorphic DNA) ou Analyse par Amplification aléatoire d'ADN polymorphe (PCR avec segments choisis au hasard) </li></ul></ul><ul><ul><li>Analyse de l’ADN mitochondrial (ADN mt) (peu fiable) </li></ul></ul><ul><ul><li>Analyse du chromosome Y (pour les hommes) </li></ul></ul>
  15. 15. CONCLUSION <ul><li>Grâce à toutes ces méthodes d’analyse, telle que la PCR, le scientifique a pu exploiter les empreintes génétiques, faisant ainsi un bon en avant, aidant, la Justice, la médecine, les enfants recherchant leurs vrais parents, allant même jusqu’à dresser un profil de santé de l’individu, dans quelques années, il ne s’agira plus de diagnostic médical mais de pronostic… </li></ul>
  16. 16. GLOSSAIRE <ul><li>ADN : Acide Désoxyribonucléique </li></ul><ul><ul><li>1 : Sucre, phosphate </li></ul></ul><ul><ul><li>2 : Paire de bases azotées </li></ul></ul><ul><ul><li>3 : liaison hydrogène </li></ul></ul><ul><ul><li>A : Adénine </li></ul></ul><ul><ul><li>B : Thymine </li></ul></ul><ul><ul><li>C : Guanine </li></ul></ul><ul><ul><li>D : Cytosine </li></ul></ul><ul><li>Chromosome : forme condensée de l’ADN, </li></ul><ul><ul><li>contient les gènes </li></ul></ul>
  17. 17. GLOSSAIRE <ul><li>Gène : séquence d’ADN codant pour la synthèse d’une protéine ou d’ARN </li></ul><ul><li>Loci : (pluriel de locus) définit un emplace- </li></ul><ul><li>ment précis sur un chromosome </li></ul><ul><li>Nucléotides : composants de l’ADN et de l’ARN </li></ul><ul><li>Composé de 3 parties : </li></ul><ul><ul><li>Un groupement phosphate </li></ul></ul><ul><ul><li>Un sucre (pentose : désoxyribose pour ADN et </li></ul></ul><ul><ul><li>ribose pour ARN) </li></ul></ul><ul><ul><li>Une base azotée </li></ul></ul>
  18. 18. GLOSSAIRE <ul><li>Polymorphisme : variation entre individus dans la séquence des gènes. Non pathogène </li></ul><ul><li>Southern Blot : méthode de biologie moléculaire. Technique permettant de visualiser et de cartographier un fragment d’ADN </li></ul>
  19. 19. BIBLIOGRAPHIE <ul><li>www.snv.jussieu.fr/bmedia/PCR/index.htm </li></ul><ul><li>http://fr.wikipédia.org </li></ul><ul><ul><li>Article : « empreintes génétiques » </li></ul></ul><ul><li>http://www.univ-rouen.fr/ABISS/L1/WEB/empreinte/RFLP.html </li></ul><ul><li>http://google.gp </li></ul><ul><ul><li>Recherches : empreintes génétiques, PCR, ADN, polymorphisme… </li></ul></ul>
  20. 20. FIN DU DOSSIER

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