Este documento compara diferentes métodos de produção de vacinas contra a gripe, incluindo a produção em ovos, cultura de células e produção recombinante de hematoglutinina (HA) em células de inseto. O método de DNA recombinante usa baculovírus para fazer com que células de inseto produzam HA idêntica à do vírus da gripe, permitindo uma produção mais rápida de vacinas sem os riscos associados aos ovos. O processo é monitorizado para determinar o momento ótimo de colheita do HA recombinante

1. Universidade Técnica de Lisboa Instituto Superior Técnico Engenharia Biomédica 2009/2010 Novas formas de produção de vacinas Paula Antunes nº 64407 João Tiago n.º64408

3. Produção com cultura de células

5. BEVS – Baculovirusexpression vector systems

8. dagenéticasubjacenteàscaracterísticas do sistemaimunitário

9. do seuestadogeral de saúdeTipos de vacinas

11. Promove a aglutinação de glóbulos vermelhos às células a que se liga por reconhecimento do ácido siálico

12. ajudar o vírus a deixar a célulainvadida.

13. reconhece e remove o ácidosiálico.

14. existem 9. N1 e N2 emhumanosEste vírus ataca as células das vias respiratórias e é altamente contagioso.

15. Métodos de produção de vacinas da gripe Método dos ovos – 6 a 9 meses Seedvirus Desvantagens: - Milhões de ovos - Necessidade de seleccionar as estirpes que apresentam alta taxa de crescimento em ovos - Cada ovo produz 2-3 doses de vacina injectável - Contra indicada para pessoas alérgicas a ovos

17. RNA

18. proteínas estruturaisproteínas superficiais Desvantagem: - Continua a haver uma selecção das estirpes que consigam sobreviver num substrato de células específicas Vantagens: - Os vírus não têm que se adaptar ao crescimento em ovos. - Fácil controlo do suporte de vida.

19. Método de produção e purificação de HA Workshop “NewCells for NewVaccines II”, Wilmington, 2007 Método de DNA recombinante BEVS – Baculovirusexpression vector systems Baculovirus passa a produzir HA igual ao das produzidas pelo vírus da gripe. recolhidas através de centrifugação Reservatório onde há células de insecto num fermento (bioreactor). purificada

20. Método de DNA recombinante (rDNA) Ocorre quando fragmentos de código genético de dois ou mais organismos diferentes são ligados invitro. Cromossoma Plasmídeo Quebra por enzima de restrição Vector recombinante Fragmento de DNA – gene de HA completo, do vírus da gripe Plasmídeo – DNA do baculovirus

24. Produção mais rápida de vacinas

25. Não é usado o vírus da gripe vivo. Passos de inactivação desnecessários.

26. Não há necessidade de selecção de estirpes. Existe uma correspondência perfeita entre a HA da estirpe e da vacina.

28. McPherson, Clifton E (2008). Developmentof a novel recombinat influenza vaccineininsectcells. Biologicals.

29. Wang K, Holtz KM, Anderson K, Chubet R, Mahmoud W, Cox MM (2006). Expression and purification of an influenza hemagglutinin - one step closer to a recombinant protein-based influenza vaccine. Vaccine.