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Überwachung der Paratuberkulose
         in Österreich


Dr. Eva Geisbauer, Dr. Michael Dünser
Institut für Veterinärmedizinische Untersuchungen Linz
Nationales Referenzlabor für Paratuberkulose
Sichere Lebensmittel – Ernährungssicherung & Ernährungssicherheit
Linz, 30.06.2011

www.ages.at               Österreichische Agentur für Gesundheit und Ernährungssicherheit GmbH
Paratuberkulose (PTB)

• Definition: chronisch verlaufende,
  unheilbare Darminfektion bei
  Wiederkäuern
• Erreger: Mycobacterium avium
  subspezies paratuberculosis (MAP)
• Infektion: Kot, kotverschmutzte
  Milch/Zitzen, Kolostrum  Jungtiere
  am empfänglichsten
• Klinik: unstillbaren Durchfall bei
  erhaltener Fresslust, Abmagerung



www.ages.at                             21
Klinik - Rind




www.ages.at     22
Klinik beim kleinen Wiederkäuer




Die meisten Schafe bzw. Ziegen zeigen normale Kotkonsistenz mit den
typischen Skybala
Leitsymptome: Abmagerung, Submandibuläre Ödemen,
Leistungsdepression, …..
  www.ages.at                                                   23
www.ages.at   24
MAP Darmabstrich, Ziehl-Neelsenfärbung 1000X,
typische „nesterförmige Anordnung der Erreger“




www.ages.at                                      25
Paratuberkulose in Österreich

Screening 1995 - 1997: (GASTEINER et al., 1997)
11.028 Rinder aus 2.757 Betrieben (Stichprobe: 4 ältesten Rinder/Betrieb)
7 % Allied-ELISA AB-positiv

Screening 2002 - 2003: (DREIER et al., 2006)
1 Rind aus 756 Betrieben (Stichprobe: 1 Schlachtrind >2 Jahre/Betrieb)
19 % Svanovir-ELISA AB-positive

Routineuntersuchungen am AGES-IVET LINZ 2010
10.551 Exportrinder
0,92 % Pourquier-ELISA AB-positiv/fraglich


Tatsächliche Paratuberkulose-Prävalenz in Europa ist unklar, (NIELSEN a. TOFT,
2009)
    • unterschiedliche Testsysteme (ELISA, PCR….)
    • teilweise ungeeignete Stichprobenauswahl


Keine Daten zur Paratuberkulose Prävalenz beim kleinen Wiederkäuer in AT


www.ages.at                                                                      26
Warum benötigen wir PTB-
Bekämpfungsprogramme

• PTB ist seit über 100 Jahren eine unterschätzte Seuche
• PTB ist weltweit verbreitet
• PTB ist hat erhebliche wirtschaftliche Bedeutung und verursacht
       -   Reduktion der Milchleistung
       -   Vermindertes Schlachtgewicht
       -   Vorzeitige Abgänge
       -   Mastitiden, Fruchtbarkeitsstörungen…



• Zoonosendiskussion?




www.ages.at                                                         27
PTB-Bekämpfung




Infektionsdruck                             Ausscheider
   reduzieren                               eliminieren




                  Kein Zukauf infizierter
                         Tiere
  www.ages.at                                        28
Stolpersteine
                • Diagnostik
                     - Kein Goldstandard
                     - Verfügbaren Tests sind nicht perfekt
                     - Schwierigkeiten resultieren aus den
                       Erregereigenschaften
                • Umgebungskontamination durch MAP
                • Hoher Anteil an subklinisch infizierten
                  Tieren
                • Verkürzung der Nutzungsdauer
                • Kalkulation der tatsächlichen
                  wirtschaftlichen Schäden
                • Kosten für Diagnostik und Maßnahmen im
                  Bestand
                • Keine Bekämpfung in Ländern, die mit
                  anderen Seuchen wie Tuberkulose,
                  Brucellose usw. befasst sind…




www.ages.at                                                   29
Wechselwirkung Pathogenese-Diagnostik


Erregernachweis            ------------+---+--+-----+++---+----+++-+-++++++
AK-Nachweis               ---------------------+--+-----+---+++-++--+-++++--+
Zelluläre Immunreaktion --------+++++++++++++++++++++-+-+-+--++

                                                              Humorale Reaktion

                                     Zelluläre Reaktion


                  Nachweisgrenze
   Erregerausscheidung

                   Infektion                                      Klinik



   www.ages.at                                                             30
Verordnung

• 3. 4. 2006 in Kraft getreten
• Anwendungsbereich:
     - Rinderbetriebe
     - Schafbetriebe
     - Ziegenbetriebe
     - Wildwiederkäuer in Gatterhaltung
• Anzeigepflicht bei klinischem Verdacht
• Überwachungsprogramm:
     - amtstierärztliche Betriebskontrollen
     - Schlachttieruntersuchung
     - verendete/getötete Tiere (BSE Probenentnahme)


www.ages.at                                            31
Ziele

• Erfassung von klinisch an
  Paratuberkulose erkrankten
  Tieren
• Eliminierung der
  Hochausscheider aus den
  Betrieben
• Senkung des Infektionsdruckes
• Einleitung von
  Hygienemaßnahmen in den
  betroffenen Beständen
                              Super-shedder
                              1012 MAP/g Kot
www.ages.at                                    32
„Keine Wiederkäuer mit
                      klinischer PTB
              in österreichischen Betrieben“




www.ages.at                                    33
Material/Methode

                    US-Material        US-Methode

klin. verdächtige   Serum              ELISA
Tiere
                    Kot                Realtime PCR

patho-anatom.       Leberlymphknoten   Realtime PCR
verdächtige Tiere
                    Darmlymphknoten

                    Darmteile


www.ages.at                                           34
Einsendungen und Ergebnisse
2006-2010
                 Rinder   Schafe   Ziegen   Farmwild


klin.            651      28       8        8
Verdachtsfälle

verdächtige      271      6        3        5
Betriebe

MAP pos. Tiere   194      1        6        1


MAP pos.         97       1        1        1
Bestände

www.ages.at                                            35
Rassenaufteilung der MAP-pos.
Rinder


                                                  Limousin
                                4    4 111
                            7                     Fleckvieh
                        8
                                                  Holstein Friesian
                   15
                                                  Jersey
                                             85   Braunvieh
                                                  Red Friesian
              26                                  Grauvieh
                                                  Angus
                                                  Murbodner

                                42                Blonde Aquitaine
                                                  unbekannt




www.ages.at                                                           36
Einsendungen von Verdachtsfällen an das PTB-NRL
 (2006-2010)
 PTB positive getestete Rinber (2006-2010)



                                                       14/6

                                 128/19




                         70/16
102/26         61/28

                                                              3/0




                                                   239/90
                                          34/9
 www.ages.at                                                  37
Vorgehen bei pos. Fällen

• Tierschutzgerechte Tötung innerhalb von 3 Werktagen
• Reinigungs-, Desinfektions-, Hygiene-,
  Managementmaßnahmen
• Schlachttier-, Fleischuntersuchung: Fleisch untauglich,
  Betriebskontrolle
• Entschädigung bei labordiagnostischer Bestätigung des
  klinischen Verdachtsfalles




www.ages.at                                                 38
Molekulare Typisierung der MAP Isolate
  • Zielsetzung:
         - Etablierung eines standardisierten Typisierungsverfahren
         - Aufbau einer nationalen Stammsammlung
         - Evaluierung von Infektionswegen innerhalb eines
           Bestandes/zwischen verschiedenen Beständen
         - Abklärung von Infektionsverläufen
  • Rückschlüsse auf die Pathogenese und Virulenz der
    Isolate
  • Lebensmittelsicherheit
  • Methoden: RFLP und MIRU-VNTR




  www.ages.at                                                         39
Zusammenfassung

• Erheblicher Bedarf an international vergleichbaren Studien
  zur Paratuberkulose bei Wiederkäuern
• Aufwertung der PTB als international bedeutende
  Tierseuche und Implementierung nationaler
  Bekämpfungsprogramme
• Freiheit von Klinischer Paratuberkulose ist ein erster
  Schritt
• Implementierung von Programmen zur Zertifizierung PTB-
  unverdächtiger/freier Betriebe wäre der 2te Schritt




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Michael Dünser: Überwachung der Paratuberkulose in Österreich

  • 1. Überwachung der Paratuberkulose in Österreich Dr. Eva Geisbauer, Dr. Michael Dünser Institut für Veterinärmedizinische Untersuchungen Linz Nationales Referenzlabor für Paratuberkulose Sichere Lebensmittel – Ernährungssicherung & Ernährungssicherheit Linz, 30.06.2011 www.ages.at Österreichische Agentur für Gesundheit und Ernährungssicherheit GmbH
  • 2. Paratuberkulose (PTB) • Definition: chronisch verlaufende, unheilbare Darminfektion bei Wiederkäuern • Erreger: Mycobacterium avium subspezies paratuberculosis (MAP) • Infektion: Kot, kotverschmutzte Milch/Zitzen, Kolostrum  Jungtiere am empfänglichsten • Klinik: unstillbaren Durchfall bei erhaltener Fresslust, Abmagerung www.ages.at 21
  • 4. Klinik beim kleinen Wiederkäuer Die meisten Schafe bzw. Ziegen zeigen normale Kotkonsistenz mit den typischen Skybala Leitsymptome: Abmagerung, Submandibuläre Ödemen, Leistungsdepression, ….. www.ages.at 23
  • 6. MAP Darmabstrich, Ziehl-Neelsenfärbung 1000X, typische „nesterförmige Anordnung der Erreger“ www.ages.at 25
  • 7. Paratuberkulose in Österreich Screening 1995 - 1997: (GASTEINER et al., 1997) 11.028 Rinder aus 2.757 Betrieben (Stichprobe: 4 ältesten Rinder/Betrieb) 7 % Allied-ELISA AB-positiv Screening 2002 - 2003: (DREIER et al., 2006) 1 Rind aus 756 Betrieben (Stichprobe: 1 Schlachtrind >2 Jahre/Betrieb) 19 % Svanovir-ELISA AB-positive Routineuntersuchungen am AGES-IVET LINZ 2010 10.551 Exportrinder 0,92 % Pourquier-ELISA AB-positiv/fraglich Tatsächliche Paratuberkulose-Prävalenz in Europa ist unklar, (NIELSEN a. TOFT, 2009) • unterschiedliche Testsysteme (ELISA, PCR….) • teilweise ungeeignete Stichprobenauswahl Keine Daten zur Paratuberkulose Prävalenz beim kleinen Wiederkäuer in AT www.ages.at 26
  • 8. Warum benötigen wir PTB- Bekämpfungsprogramme • PTB ist seit über 100 Jahren eine unterschätzte Seuche • PTB ist weltweit verbreitet • PTB ist hat erhebliche wirtschaftliche Bedeutung und verursacht - Reduktion der Milchleistung - Vermindertes Schlachtgewicht - Vorzeitige Abgänge - Mastitiden, Fruchtbarkeitsstörungen… • Zoonosendiskussion? www.ages.at 27
  • 9. PTB-Bekämpfung Infektionsdruck Ausscheider reduzieren eliminieren Kein Zukauf infizierter Tiere www.ages.at 28
  • 10. Stolpersteine • Diagnostik - Kein Goldstandard - Verfügbaren Tests sind nicht perfekt - Schwierigkeiten resultieren aus den Erregereigenschaften • Umgebungskontamination durch MAP • Hoher Anteil an subklinisch infizierten Tieren • Verkürzung der Nutzungsdauer • Kalkulation der tatsächlichen wirtschaftlichen Schäden • Kosten für Diagnostik und Maßnahmen im Bestand • Keine Bekämpfung in Ländern, die mit anderen Seuchen wie Tuberkulose, Brucellose usw. befasst sind… www.ages.at 29
  • 11. Wechselwirkung Pathogenese-Diagnostik Erregernachweis ------------+---+--+-----+++---+----+++-+-++++++ AK-Nachweis ---------------------+--+-----+---+++-++--+-++++--+ Zelluläre Immunreaktion --------+++++++++++++++++++++-+-+-+--++ Humorale Reaktion Zelluläre Reaktion Nachweisgrenze Erregerausscheidung Infektion Klinik www.ages.at 30
  • 12. Verordnung • 3. 4. 2006 in Kraft getreten • Anwendungsbereich: - Rinderbetriebe - Schafbetriebe - Ziegenbetriebe - Wildwiederkäuer in Gatterhaltung • Anzeigepflicht bei klinischem Verdacht • Überwachungsprogramm: - amtstierärztliche Betriebskontrollen - Schlachttieruntersuchung - verendete/getötete Tiere (BSE Probenentnahme) www.ages.at 31
  • 13. Ziele • Erfassung von klinisch an Paratuberkulose erkrankten Tieren • Eliminierung der Hochausscheider aus den Betrieben • Senkung des Infektionsdruckes • Einleitung von Hygienemaßnahmen in den betroffenen Beständen Super-shedder 1012 MAP/g Kot www.ages.at 32
  • 14. „Keine Wiederkäuer mit klinischer PTB in österreichischen Betrieben“ www.ages.at 33
  • 15. Material/Methode US-Material US-Methode klin. verdächtige Serum ELISA Tiere Kot Realtime PCR patho-anatom. Leberlymphknoten Realtime PCR verdächtige Tiere Darmlymphknoten Darmteile www.ages.at 34
  • 16. Einsendungen und Ergebnisse 2006-2010 Rinder Schafe Ziegen Farmwild klin. 651 28 8 8 Verdachtsfälle verdächtige 271 6 3 5 Betriebe MAP pos. Tiere 194 1 6 1 MAP pos. 97 1 1 1 Bestände www.ages.at 35
  • 17. Rassenaufteilung der MAP-pos. Rinder Limousin 4 4 111 7 Fleckvieh 8 Holstein Friesian 15 Jersey 85 Braunvieh Red Friesian 26 Grauvieh Angus Murbodner 42 Blonde Aquitaine unbekannt www.ages.at 36
  • 18. Einsendungen von Verdachtsfällen an das PTB-NRL (2006-2010) PTB positive getestete Rinber (2006-2010) 14/6 128/19 70/16 102/26 61/28 3/0 239/90 34/9 www.ages.at 37
  • 19. Vorgehen bei pos. Fällen • Tierschutzgerechte Tötung innerhalb von 3 Werktagen • Reinigungs-, Desinfektions-, Hygiene-, Managementmaßnahmen • Schlachttier-, Fleischuntersuchung: Fleisch untauglich, Betriebskontrolle • Entschädigung bei labordiagnostischer Bestätigung des klinischen Verdachtsfalles www.ages.at 38
  • 20. Molekulare Typisierung der MAP Isolate • Zielsetzung: - Etablierung eines standardisierten Typisierungsverfahren - Aufbau einer nationalen Stammsammlung - Evaluierung von Infektionswegen innerhalb eines Bestandes/zwischen verschiedenen Beständen - Abklärung von Infektionsverläufen • Rückschlüsse auf die Pathogenese und Virulenz der Isolate • Lebensmittelsicherheit • Methoden: RFLP und MIRU-VNTR www.ages.at 39
  • 21. Zusammenfassung • Erheblicher Bedarf an international vergleichbaren Studien zur Paratuberkulose bei Wiederkäuern • Aufwertung der PTB als international bedeutende Tierseuche und Implementierung nationaler Bekämpfungsprogramme • Freiheit von Klinischer Paratuberkulose ist ein erster Schritt • Implementierung von Programmen zur Zertifizierung PTB- unverdächtiger/freier Betriebe wäre der 2te Schritt www.ages.at 40
  • 22. Vielen Dank für Ihre Aufmerksamkeit! www.ages.at 41