1. NORTHERN BLOT

2. Es una técnica de detección de
moléculas de ácido ribonucleico (ARN)
de una secuencia dada dentro de una
mezcla compleja .

3. Procedimiento northern blot

4. PROCEDIMIENTO
 El procedimiento general comienza  Los sistemas de capilaridad iónica se
con la extracción del RNA total de utilizan para transferir el ARN desde
una muestra de tejido un gel de electroforesis a una
homogenizado. membrana de Northern blot.
 Después del marcaje de la sonda,
 Las muestras de ARN son entonces ésta se hibrida con el RNA en la
separadas por electroforesis en gel. membrana.
 Dada la fragilidad de los geles y la  Finalmente, la membrana debe de
incapacidad de las sondas para lavarse para asegurar que la sonda se
penetrar en la matriz, las muestras de ha unido de forma específica y para
RNA, separadas por tamaño tras la evitar ruido de fondo en las señales
electroforesis, serán transferidas a emitidas por la misma.
una membrana de Nailon por medio
de capilaridad o un sistema de
transferencia al vacío.

5. Northern blot : transferencia por
capilaridad

6. APLICACIONES
 El northern Blot permite observar un
patrón particular de expresión  Los patrones de expresión obtenidos
genética entre tejidos, órganos, nos ayudan a conocer las funciones
estadios del desarrollo, niveles de de los genes. Desde que el RNA se
estrés ambiental, infecciones separó por su tamaño, las sondas
causadas por patógenos y durante el contra el mismo pueden darnos una
curso del tratamiento de las mismas. idea de su tamaño, sugerir ayuste
alternativo, o motivos repetidos en la
secuencia.
 La variación en el tamaño del
 Esta técnica se ha utilizado para producto de un gen puede además
mostrar la sobreexpresión de indicarnos delecciones o errores en el
oncogenes y la desregulación de proceso de transcripción.
genes supresores tumorales en
células cancerosas cuando son  Alterando la sonda podemos conocer
comparadas con tejidos normales. la secuencia e incluso determinar que
región del RNA ha sido deleccionada.

7. APLICACIONES DE LA TRANSFERENCIA
NORTHERN