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REGLAMENTACIÓN Y METODOS DE
MUESTREO DE CANALES EN MATADEROS




                  Alfredo Corujo Fernández
                  Project Manager Food Safety
                  Nutreco España

                                       Agriculture R&D
TEMAS
1. Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria

2. Planes de muestreo

3. Procedimientos toma de muestra

4. Métodos de análisis

5. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D

6. Análisis de tendencias microbiológicas

7. Estudios complementarios


                                                  Agriculture R&D
Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria
 Objetivo de la legislación alimentaria:
 “Lograr un elevado nivel de protección de la vida y
 salud de las personas.”

Libro Blanco sobre seguridad alimentaria:
La politica de seguridad alimentaria bebe basarse en un
planteamiento integrado: Aplicación a toda la cadena de
producción.
Cap. 5 (Higiene): ... “Se desarrollará un procedimiento destinado a
definir criterios microbiológicos y llegado el caso, se establecerán
objetivos de seguridad alimentaria.”

Cap. 6 (Controles): ...”Es necesario aclarar y actualizar la legislación
en vigor sobre los controles alimentarios y garantizar que cubra
todas las fases de producción.”

                                                              Agriculture R&D
Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria

•Reglamento CE nº 1782/002:
Establece los principio y requisitos generales de la
legislación alimenatria, se crea la Autoridad Europea de
Seguridad Alimentaria. Se define la necesidad y
obligatoriedad de trazabilidad a lo largo de toda la cadena
agroalimentaria.

La Comisión Europea elabora el denominado:
“PAQUETE DE HIGIENE” que está compuesto de 4
reglamentos y 2 directivas (aprobadas abril-04, de aplicación
1-enero-2006.



                                                       Agriculture R&D
Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria

•Reglamento CE nº 852/2004 relativo a la higiene de los productos
alimenticios.
•Reglamento CE nº 853/2004 por el que se establecen normas
específicas de higiene de alimentos de origen animal.
•Reglamento CE nº 854/2004 que establece normas específicas
para la organización de controles oficiales de los productos de origen
animal para verificar el cumplimiento de la legislación alimentaria así
como las normas relativas a la sanidad y bienestar de los animales.
•Reglamento CE nº 882/2004 sobre los controles oficiales
efectuados para garantizar la verificación del cumplimiento de la
legislación en materia de piensos y alimentos y de la normativa sobre
salud animal y bienestar de los animales.




                                                              Agriculture R&D
Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria

•Directiva 2002/99 que establece las normas zoosanitarias aplicables
a la producción, transformación, distribución e introducción de los
productos de origen animal destinados al consumo humano.

•Directiva   2004/41 que deroga determinadas directivas que
establecen las condiciones de los productos alimenticios y de las
condiciones sanitarias para la producción y comercialización de
determinados productos de origen animal destinados a consumo humano.


Como complemento a este paquete de higiene:
•Reglamento CE nº 183/2005 por el que se fijan los requisitos en
materia de higiene de piensos.




                                                          Agriculture R&D
Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria
  Reglamento (CE) 2073/2005; Reglamento (CE) 1441/2007
Requisito legal exigible a las empresas agroalimentarias:
Las empresas adoptarán medidas, como parte de sus
procedimientos basados en los principios APPCC y Buenas
Practicas de Higiene para garantizar que:
Criterios de higiene del proceso: suministro,manipulación y
transformación de las materias primas y los productos
alimenticios.
Criterios de seguridad alimentaria aplicables durante toda
la vida útil de los productos, en las condiciones
razonablemente previsibles de distribución, almacenamiento
y distribución.


                                                      Agriculture R&D
Planes de Muestreo
                        Organismo interés
 ARBOL
  DE                        Medido por                NO
                               tests
DECISIÓN                   de presencia
                           ausencia (+/ -)
                                                         Medido por tests
                                                         de cuantificación


                  Planes por atributos de 2 clases


                                                 Planes por atributos de 3 clases
                           Aceptamos la
             NO
                             presencia
                           del organismo
                           en el alimento


                                    SI

       C=0                     C>0

                                                                         Agriculture R&D
Planes de Muestreo
    Grupos de microorganismos por categorías
CATEGORIA: 1,2 y 3
Microorganismos asociados ala vida útil y alteración del producto (Aerobios
mesófilos, esporulados, mohos y levaduras, lactobacillus, microorganismos
lipolíticos).

CATEGORIA: 4,5 y 6
Microorganismos indicadores de higiene. Microorganismos no patógenos
como enterobacterias totales, coliformes totales, E. Coli.

CATEGORIA: 7 a la 15
De la 7 a la 9 corresponden a microorganismos patógenos como Estafilococos
aureus, Bacillus cereus (peligrosidad condicionada a la cantidad).
A partir de la categoría 10 corresponde a microorganismos patógenos como
Salmonella sp, Listeria monocytogenes, E. Coli O157:H7, cuya sola presencia
condiciona su peligrosidad


                                                                  Agriculture R&D
Planes de Muestreo
 Grado importancia
                            Condiciones esperadas de manipulación y consumo del alimento
  (utilidad y riesgo
                                               después del muestreo
       sanitario)

                            Grado peligrosidad         Sin cambio de             Aumento de
                                reducido                peligrosidad             peligrosidad

                                                      Sin modificación      Disminución de vida útil
                            Aumento de vida útil    categoría 2; 3 clases    categoría 3; 3 clases
  Vida útil y alteración    categoría 1; 3 clases         n=5; c=2                 n=5; c=1
                                 n=5; c=3

                                                      Sin modificación
                           Disminución del riesgo   categoría 5; 3 clases    Aumento del riesgo
 Indicadores de riesgo      categoría 4; 3 clases                            categoría 6; 3 clases
  bajo indirecto para la                                  n=5; c=2
                                 n=5; c=3                                         n=5; c=1
          salud


  Patógenos de riesgo       categoría 7; 3 clases   categoría 8; 3 clases    categoría 9; 3 clases
directo, de diseminación         n=5; c=2                n=5; c=1                 n=10; c=1
         limitada

 Patógenos de riesgo       categoría10; 2 clases    categoría11; 2 clases
 moderado directo de             n=5; c=0                n=10; c=0           categoría12; 2 clases
     diseminación                                                                 n=20; c=0
potencialmente extensa

 Patógenos de riesgo       categoría13; 2 clases    categoría13; 2 clases    categoría13; 2 clases
 grave directo para la          n=15; c=0                n=30; c=0                n=60; c=0
        salud

Directrices Generales de Muestreo: CAC/GL 50-2004 (codex)
                                                                                          Agriculture R&D
Planes de Muestreo
                PLAN POR ATRIBUTOS DE DOS CLASES


                              Todas las muestras son  m
                                                           Lote aceptado
n muestras de un               c de n muestras son >m
lote son testadas


                              > c de n muestras son > m    Lote rechazado


Plan de muestreo Salmonella sp en canales: Reglamento 2073/2005
Bovinas, ovinas, caprinas y equinas: n= 50; c= 2
Porcinas: n= 50; c= 5
Pollos y pavos: n= 50; c= 7


                                                                   Agriculture R&D
Planes de Muestreo
                  PLAN POR ATRIBUTOS DE TRES CLASES
                                Todas las muestras son  m
                                                                  Lote aceptado
                                 c de n muestras están
                                entre > m y  M
 n muestras de un
 lote son testadas

                                > c de n muestras están
                                entre > m y  M
                                                                  Lote rechazado
                                Alguna muestra > M

Limites microbiológicos en canales (ufc/cm2, media log. diaria): Reglamento 2073/2005
Bovinas, ovinas, caprinas y equinas: A.M (m= 3,5; M= 5,0); ETB (m= 1,5; M= 2,5)
Porcinas: A.M (m= 4,05; M= 5,0); ETB (m= 2,0; M= 3,0)
Pollos y pavos: No están establecidos limites

                                                                            Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
       Reglamento 2073/2005; Reglamento 1441/2007
       Capitulo 3: Normas generales toma de muestras
Frecuencia del muestreo: Semanalmente de forma aleatoria
Fase de toma de muestra: antes o después del oreo dependiendo de
la especie
Toma de muestras según la ISO 17604:
Destructivos:
Canales bovino, ovino,caprino y equino:
Indicadores: 4 muestras tejido/canal que representen 20 cm2
Pollos Y pavos:
Salmonella:
Mínimo piel de 15 canales
10 g piel de cuello/canal
Mezclar las muestras de 3 canales (5 X 25 g muestras finales)
                                                                Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
                    Reglamento 2073/2005
       Capitulo 3: Normas generales toma de muestras
Toma de muestras según la ISO 17604:
NO Destructivos:
Canales bovino, ovino,caprino y equino:
Indicadores:
Zona de muestreo mínimo 100 cm2; (50 cm2 canales pequeños rumiantes)
Salmonella:
Zona de muestreo mínimo 100 cm2 por área seleccionada

Reducción frecuencia muestreo: 1 Muestreo cada 2 semanas si:
Indicadores: Resultados satisfactorio (6 semanas consecutivas)
Salmonella: Resultados satisfactorio (30 semanas consecutivas)


                                                                  Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
                 TECNICAS DE ASEPSIA DURANTE EL MUESTREO

  Limpieza parte                                         Limpieza parte
superior del calzado                                  inferior del calzado




                                                           Desinfección
     Limpieza
                                                           Mesa trabajo
 Ropa Protectora




                                                                Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
TECNICAS DE ASEPSIA DURANTE EL MUESTREO

          Colocación de
           mascarilla




            Lavado y secado de
                 manos


                                          Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
       TECNICAS DE ASEPSIA DURANTE EL MUESTREO


Paso                                             Paso
 1                                                4




Paso                                             Paso
 2                                                5




                                                 Paso
Paso                                              6
 3


                                                   Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
       TECNICAS DE MUESTREO: ESPONJA ABRASIVA (SALMONELLA)

                               Paso
Paso                            2
 1




                               Paso
Paso                            4
 3




                                                       Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
            AREAS DE MUESTREO: CANALES OVINO Y CAPRINO

Área nº1:
A nivel del músculo cutáneo en el pliegue
de la ijada
Área nº2:
Tercio medio de la canal a la altura de la
última costilla
Área nº3:
A la altura del apéndice xifoides en el
tercio medio de la canal
Área nº3:
Detrás de la escápula a la altura del tercio
medio de la canal




                                                         Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
                  AREAS DE MUESTREO: CANALES PORCINO




1ª MEDIA CANAL:
 Salmonella sp




                         2ª MEDIA CANAL:
                         Análisis de E. Coli



                                                       Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
                   AREAS DE MUESTREO: CANALES BOVINO


Área nº1: Cadera
                                                       Área1
Parte posterior del muslo, sobre el
músculo semitendinoso
Área nº2: Falda
                                                       Área 2
Parte ventral del abdomen, sobre el
músculo recto abdominal
Área nº3: Pecho
Parte ventral del tórax sobre músculos                 Área 3
pectorales que rodean el esternón
Área nº3: Cuello
Cara lateral dorsal de cuello, músculo                 Área 4
trapecio porción cervical



                                                        Agriculture R&D
Procedimientos toma de muestra
                AREAS DE MUESTREO: CANALES POLLO
      Método Excisión                    Método Enjuague
                                 1              3




                                 2              4




  Durante
 eviscerado                Después
                           enfriado
Salmonella sp
                         Salmonella sp
                                                       Agriculture R&D
Métodos de análisis
            Categoría Alimentos                 Microorganismos        Método analítico de
                                                                           referencia
Canales Bovinas, Ovinas, Caprinas, Equinas,     Recuento de colonias        ISO 4833
porcinas, carnes picada, CSM, preparados de          aerobias
carne
Canales Bovinas, Ovinas,Caprinas, Equinas,      Enterobacteriaceae         ISO 21528-2
porcinas

Carne picada, CSM, preparados de carne                 E.coli            ISO 16649-1 o 2


Canales Bovinas, Ovinas, Caprinas, Equinas,         Salmonella            EN/ISO 6579
porcinas, pollos, pavos, carnes picada,CSM,
preparados de carne, productos cárnicos
consumidos en crudo, productos cárnicos (RTE)



Productos cárnicos que pueden o no favorecer         Listeria          EN/ISO 11290 -1 o 2
el desarrollo de L. Monocytogenes.                monocytogenes




                                                                                   Agriculture R&D
Métodos de análisis

    Métodos de análisis por orden de preferencia

1. Anexo I del Reglamento 2073/2005
2. Validación respecto al método de referencia
3. Registrados y certificados por terceros conforme
   protocolo    ISO    16140    u otros   protocolos
   internacionalmente aceptados
4. Validados conforme protocolos internacionalmente
   aceptados y su uso autorizado por la Autoridad
   Competente



                                                 Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
Decisión de la Comisión 2001/471/CE (8 de Junio de 2001):

Frecuencia: entre 10 y 30 muestras cada dos semanas
“Aproximadamente 2/3 del total de las muestras provendrán de superficies que
entran en contacto con productos alimenticios”.

Plan de Muestreo superficies durante diferentes días
Monitoreo de todas las superficies (en un mes)

       Parámetro             Valores aceptables        Valores inaceptables
Recuento total de colonias       0-10/cm2                    >10/cm2
        aerobias
                                  0-1/cm2                    >1/cm2
     Enterobacterias


 “Se registrarán los resultados, los que se presentarán periódicamente
 en forma de histogramas de barras para mostrar la evolución”.


                                                                        Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
        METODOLOGÍA TOMA DE MUESTRA SUPERFICIES

METODO DE CONTACTO CON PLACA DE AGAR: ISO 18593
Enterobacterias: VRBGA
Recuento total aerobios: PCA
Superficies planas
“Utilizar neutralizantes cuando existen residuos de compuestos
desinfectantes”


METODO DE HISOPO
Utilización de plantillas de 20 cm2
En superficies mojadas se podrá utilizar un hisopo seco
Se debe de utilizar para aquellas superficies que sean curvas
“Utilizar neutralizantes cuando existen residuos de compuestos
desinfectantes


                                                                 Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D




                                         Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D




         Superficies lisas y curvas de contacto
                directo con el producto
                                                  Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D




                                        Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats)

     “El muestreo de producto final tiene limitaciones”
         Probability of Missing Contamination
                              % Contaminación Lote
 Nº Muestras
 Analizadas         10%          2%          1%        0.5%
     3              73%        94%          97%        99%
    10              35%        82%          90%        95%
    60            <0.5%        30%          55%        74%
   120            <0.5%        8.5%         30%        55%
   180            <0.5%        2.6%         16%        41%
   240            <0.5%        0.8%          9%        30%
                                                           Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
     Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats)


Fuentes de contaminación ambiental:
        Drenajes
        Suelos
        Paredes
        Evaporadores




                                                                Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
  Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats)

Fuentes de contaminación ambiental:
        Condensados
        Movimientos de aire
        Aerosoles




                                                             Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats)


Fuentes de contaminación ambiental:
        MAQUINARIA

        CARROS
        MESAS TRABAJO




                                                            Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats)


Listeria spp como indicador:

Más común que Listeria monocytogenes, más apropiado
para monitoreo de rutina
Los resultados analíticos más rápidos que para Listeria
monocytogenes
Coste analítico menor que Listeria monocytogenes
Listeria spp. es usado normalmente para monitoreo
ambiental



                                                            Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats)


PLAN DE MUESTREO: CONCEPTO DE ZONA


Zona 1: Superficies de contacto área de producto final
Zona 2: Superficies de no contacto áreas de producto final
Zona 3: Superficies de contacto en áreas de manipulación de
materia prima
Zona 4: Superficies de no contacto en áreas de manipulación
de materia prima

  “Se recomienda la toma de muestra por el método de esponja”




                                                            Agriculture R&D
Muestreo del entorno: Verificación de la L+D
Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats)




                                                            Agriculture R&D
Análisis de tendencias microbiológicas
Gráficos Control Estadístico de Proceso (SPC)

       Y = Log ufc/cm2                   Límite inferior (m)= 3,5
       X=Días                            Límite superior (M)=5,0

                     Representación de media logarítmica diaria
                                    m: 3,5 M: 5,0
               7,0

               6,0                   Area Inaceptable
               M
               5,0
Log ufc/cm 2




               4,0                    Area Dudosa
               m
               3,0

               2,0                   Area Aceptable
               1,0

               0,0
                      1
                      2
                      3
                      4
                      5
                      6
                      7
                      8
                      9
                     10
                     11
                     12
                     13
                     14
                     15
                     16
                     17
                     18
                     19
                     20
                     21
                     22
                     23
                     24
                     25
                     26
                     27
                     28
                     29
                     30
                     31
                     32
                     33
                     34
                     35
                     36
                     37
                     38
                     39
                     40
                     41
                     42
                     43
                     44
                     45
                     46
                     47
                     48
                     49
                     50
                                          Días


                                                                    Agriculture R&D
Análisis de tendencias microbiológicas
Gráficos Control Estadístico de Proceso (SPC)

          Indicadores Microbiológicos




                                                Agriculture R&D
Análisis de tendencias microbiológicas
Gráficos Control Estadístico de Proceso (SPC)

                  Patógenos




                                                Agriculture R&D
Análisis de tendencias microbiológicas
Gráficos Control Estadístico de Proceso (SPC)




                                            Agriculture R&D
Estudios complementarios
ESTUDIOS DE VIDA ÚTIL DE PRODUCTO
Elaboración de modelos matemáticos de pronóstico establecidos para el
alimento de que se trate, utilizando factores críticos de crecimiento o
supervivencia aplicables a los microorganismos en cuestión presentes en el
producto.


                                       ALAS AEROBIO                                  •Indicadores alteración
               10.00
                9.00                                                                 •Mínimo 4 réplicas/día
                8.00 y = 0.6337x + 4.1194
                7.00      R2 = 0.9267                                                •Análisis hasta caducidad
 Log (ufc/g)




                6.00
                5.00
                4.00
                                                                                     •Gráfico dispersión (excel)
                                                             y = 0.61x + 2.559
                3.00
                2.00                                            R2 = 0.9193          •Predicción (µmax)
                1.00
                0.00
                     1      2      3      4    5         6       7       8       9
                                              DIAS
                                              AM   ETB




                                                                                                        Agriculture R&D
Estudios complementarios
CHALLENGE TEST (TEST DE DESAFIO)
Pruebas para investigar la capacidad que tiene el microorganismo en cuestión,
adecuadamente inoculado, para crecer o sobrevivir en el producto en diferentes
condiciones de almacenamiento razonablemente previsibles.




                                                                     Agriculture R&D
Estudios complementarios
CRECIMIENTO DE PATÓGENOS DURANTE LA VIDA ÚTIL
Estudios para evaluar el crecimiento o supervivencia de los microorganismos en
cuestión que puedan estar presentes en el producto durante su vida útil en
condiciones razonablemente previsibles de distribución, almacenamiento y
utilización.                Growth of Escherichia coli O157:H7 in
                           a Dynamic Temperature Environment




                                                                     Agriculture R&D
CONCLUSION
LA PRIORIDAD: LA SEGURIDAD


La actitud     de   dada   eslabón   dela   cadena       es
determinante.
Una incidencia relacionada con la seguridad alimentaria
en una empresa puede arrastrar a un sector.
Es imposible controlar todo.
La prevención es fundamental.
La seguridad se mide en la responsabilidad de todos los
individuos.


                                                  Agriculture R&D
MUCHAS GRACIAS



                 Agriculture R&D

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  • 1. REGLAMENTACIÓN Y METODOS DE MUESTREO DE CANALES EN MATADEROS Alfredo Corujo Fernández Project Manager Food Safety Nutreco España Agriculture R&D
  • 2. TEMAS 1. Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria 2. Planes de muestreo 3. Procedimientos toma de muestra 4. Métodos de análisis 5. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D 6. Análisis de tendencias microbiológicas 7. Estudios complementarios Agriculture R&D
  • 3. Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria Objetivo de la legislación alimentaria: “Lograr un elevado nivel de protección de la vida y salud de las personas.” Libro Blanco sobre seguridad alimentaria: La politica de seguridad alimentaria bebe basarse en un planteamiento integrado: Aplicación a toda la cadena de producción. Cap. 5 (Higiene): ... “Se desarrollará un procedimiento destinado a definir criterios microbiológicos y llegado el caso, se establecerán objetivos de seguridad alimentaria.” Cap. 6 (Controles): ...”Es necesario aclarar y actualizar la legislación en vigor sobre los controles alimentarios y garantizar que cubra todas las fases de producción.” Agriculture R&D
  • 4. Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria •Reglamento CE nº 1782/002: Establece los principio y requisitos generales de la legislación alimenatria, se crea la Autoridad Europea de Seguridad Alimentaria. Se define la necesidad y obligatoriedad de trazabilidad a lo largo de toda la cadena agroalimentaria. La Comisión Europea elabora el denominado: “PAQUETE DE HIGIENE” que está compuesto de 4 reglamentos y 2 directivas (aprobadas abril-04, de aplicación 1-enero-2006. Agriculture R&D
  • 5. Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria •Reglamento CE nº 852/2004 relativo a la higiene de los productos alimenticios. •Reglamento CE nº 853/2004 por el que se establecen normas específicas de higiene de alimentos de origen animal. •Reglamento CE nº 854/2004 que establece normas específicas para la organización de controles oficiales de los productos de origen animal para verificar el cumplimiento de la legislación alimentaria así como las normas relativas a la sanidad y bienestar de los animales. •Reglamento CE nº 882/2004 sobre los controles oficiales efectuados para garantizar la verificación del cumplimiento de la legislación en materia de piensos y alimentos y de la normativa sobre salud animal y bienestar de los animales. Agriculture R&D
  • 6. Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria •Directiva 2002/99 que establece las normas zoosanitarias aplicables a la producción, transformación, distribución e introducción de los productos de origen animal destinados al consumo humano. •Directiva 2004/41 que deroga determinadas directivas que establecen las condiciones de los productos alimenticios y de las condiciones sanitarias para la producción y comercialización de determinados productos de origen animal destinados a consumo humano. Como complemento a este paquete de higiene: •Reglamento CE nº 183/2005 por el que se fijan los requisitos en materia de higiene de piensos. Agriculture R&D
  • 7. Marco Legislativo: Seguridad Alimentaria Reglamento (CE) 2073/2005; Reglamento (CE) 1441/2007 Requisito legal exigible a las empresas agroalimentarias: Las empresas adoptarán medidas, como parte de sus procedimientos basados en los principios APPCC y Buenas Practicas de Higiene para garantizar que: Criterios de higiene del proceso: suministro,manipulación y transformación de las materias primas y los productos alimenticios. Criterios de seguridad alimentaria aplicables durante toda la vida útil de los productos, en las condiciones razonablemente previsibles de distribución, almacenamiento y distribución. Agriculture R&D
  • 8. Planes de Muestreo Organismo interés ARBOL DE Medido por NO tests DECISIÓN de presencia ausencia (+/ -) Medido por tests de cuantificación Planes por atributos de 2 clases Planes por atributos de 3 clases Aceptamos la NO presencia del organismo en el alimento SI C=0 C>0 Agriculture R&D
  • 9. Planes de Muestreo Grupos de microorganismos por categorías CATEGORIA: 1,2 y 3 Microorganismos asociados ala vida útil y alteración del producto (Aerobios mesófilos, esporulados, mohos y levaduras, lactobacillus, microorganismos lipolíticos). CATEGORIA: 4,5 y 6 Microorganismos indicadores de higiene. Microorganismos no patógenos como enterobacterias totales, coliformes totales, E. Coli. CATEGORIA: 7 a la 15 De la 7 a la 9 corresponden a microorganismos patógenos como Estafilococos aureus, Bacillus cereus (peligrosidad condicionada a la cantidad). A partir de la categoría 10 corresponde a microorganismos patógenos como Salmonella sp, Listeria monocytogenes, E. Coli O157:H7, cuya sola presencia condiciona su peligrosidad Agriculture R&D
  • 10. Planes de Muestreo Grado importancia Condiciones esperadas de manipulación y consumo del alimento (utilidad y riesgo después del muestreo sanitario) Grado peligrosidad Sin cambio de Aumento de reducido peligrosidad peligrosidad Sin modificación Disminución de vida útil Aumento de vida útil categoría 2; 3 clases categoría 3; 3 clases Vida útil y alteración categoría 1; 3 clases n=5; c=2 n=5; c=1 n=5; c=3 Sin modificación Disminución del riesgo categoría 5; 3 clases Aumento del riesgo Indicadores de riesgo categoría 4; 3 clases categoría 6; 3 clases bajo indirecto para la n=5; c=2 n=5; c=3 n=5; c=1 salud Patógenos de riesgo categoría 7; 3 clases categoría 8; 3 clases categoría 9; 3 clases directo, de diseminación n=5; c=2 n=5; c=1 n=10; c=1 limitada Patógenos de riesgo categoría10; 2 clases categoría11; 2 clases moderado directo de n=5; c=0 n=10; c=0 categoría12; 2 clases diseminación n=20; c=0 potencialmente extensa Patógenos de riesgo categoría13; 2 clases categoría13; 2 clases categoría13; 2 clases grave directo para la n=15; c=0 n=30; c=0 n=60; c=0 salud Directrices Generales de Muestreo: CAC/GL 50-2004 (codex) Agriculture R&D
  • 11. Planes de Muestreo PLAN POR ATRIBUTOS DE DOS CLASES Todas las muestras son  m Lote aceptado n muestras de un  c de n muestras son >m lote son testadas > c de n muestras son > m Lote rechazado Plan de muestreo Salmonella sp en canales: Reglamento 2073/2005 Bovinas, ovinas, caprinas y equinas: n= 50; c= 2 Porcinas: n= 50; c= 5 Pollos y pavos: n= 50; c= 7 Agriculture R&D
  • 12. Planes de Muestreo PLAN POR ATRIBUTOS DE TRES CLASES Todas las muestras son  m Lote aceptado  c de n muestras están entre > m y  M n muestras de un lote son testadas > c de n muestras están entre > m y  M Lote rechazado Alguna muestra > M Limites microbiológicos en canales (ufc/cm2, media log. diaria): Reglamento 2073/2005 Bovinas, ovinas, caprinas y equinas: A.M (m= 3,5; M= 5,0); ETB (m= 1,5; M= 2,5) Porcinas: A.M (m= 4,05; M= 5,0); ETB (m= 2,0; M= 3,0) Pollos y pavos: No están establecidos limites Agriculture R&D
  • 13. Procedimientos toma de muestra Reglamento 2073/2005; Reglamento 1441/2007 Capitulo 3: Normas generales toma de muestras Frecuencia del muestreo: Semanalmente de forma aleatoria Fase de toma de muestra: antes o después del oreo dependiendo de la especie Toma de muestras según la ISO 17604: Destructivos: Canales bovino, ovino,caprino y equino: Indicadores: 4 muestras tejido/canal que representen 20 cm2 Pollos Y pavos: Salmonella: Mínimo piel de 15 canales 10 g piel de cuello/canal Mezclar las muestras de 3 canales (5 X 25 g muestras finales) Agriculture R&D
  • 14. Procedimientos toma de muestra Reglamento 2073/2005 Capitulo 3: Normas generales toma de muestras Toma de muestras según la ISO 17604: NO Destructivos: Canales bovino, ovino,caprino y equino: Indicadores: Zona de muestreo mínimo 100 cm2; (50 cm2 canales pequeños rumiantes) Salmonella: Zona de muestreo mínimo 100 cm2 por área seleccionada Reducción frecuencia muestreo: 1 Muestreo cada 2 semanas si: Indicadores: Resultados satisfactorio (6 semanas consecutivas) Salmonella: Resultados satisfactorio (30 semanas consecutivas) Agriculture R&D
  • 15. Procedimientos toma de muestra TECNICAS DE ASEPSIA DURANTE EL MUESTREO Limpieza parte Limpieza parte superior del calzado inferior del calzado Desinfección Limpieza Mesa trabajo Ropa Protectora Agriculture R&D
  • 16. Procedimientos toma de muestra TECNICAS DE ASEPSIA DURANTE EL MUESTREO Colocación de mascarilla Lavado y secado de manos Agriculture R&D
  • 17. Procedimientos toma de muestra TECNICAS DE ASEPSIA DURANTE EL MUESTREO Paso Paso 1 4 Paso Paso 2 5 Paso Paso 6 3 Agriculture R&D
  • 18. Procedimientos toma de muestra TECNICAS DE MUESTREO: ESPONJA ABRASIVA (SALMONELLA) Paso Paso 2 1 Paso Paso 4 3 Agriculture R&D
  • 19. Procedimientos toma de muestra AREAS DE MUESTREO: CANALES OVINO Y CAPRINO Área nº1: A nivel del músculo cutáneo en el pliegue de la ijada Área nº2: Tercio medio de la canal a la altura de la última costilla Área nº3: A la altura del apéndice xifoides en el tercio medio de la canal Área nº3: Detrás de la escápula a la altura del tercio medio de la canal Agriculture R&D
  • 20. Procedimientos toma de muestra AREAS DE MUESTREO: CANALES PORCINO 1ª MEDIA CANAL: Salmonella sp 2ª MEDIA CANAL: Análisis de E. Coli Agriculture R&D
  • 21. Procedimientos toma de muestra AREAS DE MUESTREO: CANALES BOVINO Área nº1: Cadera Área1 Parte posterior del muslo, sobre el músculo semitendinoso Área nº2: Falda Área 2 Parte ventral del abdomen, sobre el músculo recto abdominal Área nº3: Pecho Parte ventral del tórax sobre músculos Área 3 pectorales que rodean el esternón Área nº3: Cuello Cara lateral dorsal de cuello, músculo Área 4 trapecio porción cervical Agriculture R&D
  • 22. Procedimientos toma de muestra AREAS DE MUESTREO: CANALES POLLO Método Excisión Método Enjuague 1 3 2 4 Durante eviscerado Después enfriado Salmonella sp Salmonella sp Agriculture R&D
  • 23. Métodos de análisis Categoría Alimentos Microorganismos Método analítico de referencia Canales Bovinas, Ovinas, Caprinas, Equinas, Recuento de colonias ISO 4833 porcinas, carnes picada, CSM, preparados de aerobias carne Canales Bovinas, Ovinas,Caprinas, Equinas, Enterobacteriaceae ISO 21528-2 porcinas Carne picada, CSM, preparados de carne E.coli ISO 16649-1 o 2 Canales Bovinas, Ovinas, Caprinas, Equinas, Salmonella EN/ISO 6579 porcinas, pollos, pavos, carnes picada,CSM, preparados de carne, productos cárnicos consumidos en crudo, productos cárnicos (RTE) Productos cárnicos que pueden o no favorecer Listeria EN/ISO 11290 -1 o 2 el desarrollo de L. Monocytogenes. monocytogenes Agriculture R&D
  • 24. Métodos de análisis Métodos de análisis por orden de preferencia 1. Anexo I del Reglamento 2073/2005 2. Validación respecto al método de referencia 3. Registrados y certificados por terceros conforme protocolo ISO 16140 u otros protocolos internacionalmente aceptados 4. Validados conforme protocolos internacionalmente aceptados y su uso autorizado por la Autoridad Competente Agriculture R&D
  • 25. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Decisión de la Comisión 2001/471/CE (8 de Junio de 2001): Frecuencia: entre 10 y 30 muestras cada dos semanas “Aproximadamente 2/3 del total de las muestras provendrán de superficies que entran en contacto con productos alimenticios”. Plan de Muestreo superficies durante diferentes días Monitoreo de todas las superficies (en un mes) Parámetro Valores aceptables Valores inaceptables Recuento total de colonias 0-10/cm2 >10/cm2 aerobias 0-1/cm2 >1/cm2 Enterobacterias “Se registrarán los resultados, los que se presentarán periódicamente en forma de histogramas de barras para mostrar la evolución”. Agriculture R&D
  • 26. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D METODOLOGÍA TOMA DE MUESTRA SUPERFICIES METODO DE CONTACTO CON PLACA DE AGAR: ISO 18593 Enterobacterias: VRBGA Recuento total aerobios: PCA Superficies planas “Utilizar neutralizantes cuando existen residuos de compuestos desinfectantes” METODO DE HISOPO Utilización de plantillas de 20 cm2 En superficies mojadas se podrá utilizar un hisopo seco Se debe de utilizar para aquellas superficies que sean curvas “Utilizar neutralizantes cuando existen residuos de compuestos desinfectantes Agriculture R&D
  • 27. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Agriculture R&D
  • 28. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Superficies lisas y curvas de contacto directo con el producto Agriculture R&D
  • 29. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Agriculture R&D
  • 30. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats) “El muestreo de producto final tiene limitaciones” Probability of Missing Contamination % Contaminación Lote Nº Muestras Analizadas 10% 2% 1% 0.5% 3 73% 94% 97% 99% 10 35% 82% 90% 95% 60 <0.5% 30% 55% 74% 120 <0.5% 8.5% 30% 55% 180 <0.5% 2.6% 16% 41% 240 <0.5% 0.8% 9% 30% Agriculture R&D
  • 31. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats) Fuentes de contaminación ambiental: Drenajes Suelos Paredes Evaporadores Agriculture R&D
  • 32. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats) Fuentes de contaminación ambiental: Condensados Movimientos de aire Aerosoles Agriculture R&D
  • 33. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats) Fuentes de contaminación ambiental: MAQUINARIA CARROS MESAS TRABAJO Agriculture R&D
  • 34. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats) Listeria spp como indicador: Más común que Listeria monocytogenes, más apropiado para monitoreo de rutina Los resultados analíticos más rápidos que para Listeria monocytogenes Coste analítico menor que Listeria monocytogenes Listeria spp. es usado normalmente para monitoreo ambiental Agriculture R&D
  • 35. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats) PLAN DE MUESTREO: CONCEPTO DE ZONA Zona 1: Superficies de contacto área de producto final Zona 2: Superficies de no contacto áreas de producto final Zona 3: Superficies de contacto en áreas de manipulación de materia prima Zona 4: Superficies de no contacto en áreas de manipulación de materia prima “Se recomienda la toma de muestra por el método de esponja” Agriculture R&D
  • 36. Muestreo del entorno: Verificación de la L+D Control Listeria monocytogenes/Listeria spp RTE (Ready to Eats) Agriculture R&D
  • 37. Análisis de tendencias microbiológicas Gráficos Control Estadístico de Proceso (SPC) Y = Log ufc/cm2 Límite inferior (m)= 3,5 X=Días Límite superior (M)=5,0 Representación de media logarítmica diaria m: 3,5 M: 5,0 7,0 6,0 Area Inaceptable M 5,0 Log ufc/cm 2 4,0 Area Dudosa m 3,0 2,0 Area Aceptable 1,0 0,0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 Días Agriculture R&D
  • 38. Análisis de tendencias microbiológicas Gráficos Control Estadístico de Proceso (SPC) Indicadores Microbiológicos Agriculture R&D
  • 39. Análisis de tendencias microbiológicas Gráficos Control Estadístico de Proceso (SPC) Patógenos Agriculture R&D
  • 40. Análisis de tendencias microbiológicas Gráficos Control Estadístico de Proceso (SPC) Agriculture R&D
  • 41. Estudios complementarios ESTUDIOS DE VIDA ÚTIL DE PRODUCTO Elaboración de modelos matemáticos de pronóstico establecidos para el alimento de que se trate, utilizando factores críticos de crecimiento o supervivencia aplicables a los microorganismos en cuestión presentes en el producto. ALAS AEROBIO •Indicadores alteración 10.00 9.00 •Mínimo 4 réplicas/día 8.00 y = 0.6337x + 4.1194 7.00 R2 = 0.9267 •Análisis hasta caducidad Log (ufc/g) 6.00 5.00 4.00 •Gráfico dispersión (excel) y = 0.61x + 2.559 3.00 2.00 R2 = 0.9193 •Predicción (µmax) 1.00 0.00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 DIAS AM ETB Agriculture R&D
  • 42. Estudios complementarios CHALLENGE TEST (TEST DE DESAFIO) Pruebas para investigar la capacidad que tiene el microorganismo en cuestión, adecuadamente inoculado, para crecer o sobrevivir en el producto en diferentes condiciones de almacenamiento razonablemente previsibles. Agriculture R&D
  • 43. Estudios complementarios CRECIMIENTO DE PATÓGENOS DURANTE LA VIDA ÚTIL Estudios para evaluar el crecimiento o supervivencia de los microorganismos en cuestión que puedan estar presentes en el producto durante su vida útil en condiciones razonablemente previsibles de distribución, almacenamiento y utilización. Growth of Escherichia coli O157:H7 in a Dynamic Temperature Environment Agriculture R&D
  • 44. CONCLUSION LA PRIORIDAD: LA SEGURIDAD La actitud de dada eslabón dela cadena es determinante. Una incidencia relacionada con la seguridad alimentaria en una empresa puede arrastrar a un sector. Es imposible controlar todo. La prevención es fundamental. La seguridad se mide en la responsabilidad de todos los individuos. Agriculture R&D
  • 45. MUCHAS GRACIAS Agriculture R&D