Curso de Producción de hongos entomopatogenos dictado en el IEST Huando

1. PRODUCCION DE HONGOS
ENTOMOPATOGENOS
Ing. Yuri Calle
CIP 54390
yurihcalle@hotmail.com 1

2. HONGOS ENTOMOPATÓGENOS
QUE SON?
Entomo = Insecto
Pathos = enfermedad
Micosis : Infección
Obtienen su nutrición a partir de insectos.
Se conocen aproximadamente 100
géneros de 700 especies.
2

3. ENTOMOPATOGENO:
Son microorganismos que enferman
a los insectos plagas.
Pueden ser: Hongos, bacterias,
virus, nematodos, etc.
3

4. Aplicación del control biológico:
Existen 3 métodos de aplicación de
los insectos benéficos para lograr
las reducciones de las plagas:
• Inundativo
• Inoculativo
• Conservación
4

5. HONGOS BENEFICOS
IMPORTANTES EN EL PERU
 ENTOMOPATOGENOS
 Beuveria bassiana
 Beauveria brogniartii
 Paecilomyces fumosoroseus
 Lecanicillium lecanii
 Metarhizium anispliae
 Entomophthora virulenta
 Entomophtora muscae
5
5

6. HONGOS BENEFICOS
IMPORTANTES EN EL PERU
 ANTAGONISTAS.
 Trichoderma harziamun
 Trichoderma viride
 T. virens
 T. stromaticum
 T. lignorum
 Gliocladium sp.
 NEMATOPATOGENOS
 Paecilomyces lilacinus
 Hirsutella sp
 Pochonia clamidosporium
6

7. Crecimiento de algunas
especies patógenos de
insectos .
(a) Beauveria bassiana,
(b) Metarhizium anisopliae,
(c) Lecanicillium lecanii,
(d) Entomophthora spp.
(Zygomycota), este ultimo
produce únicamente
esporangios.

8. VENTAJAS DE ESTOS HONGOS
1. Presentan grados variables de
especificidad, específicos a nivel de familia
o especies muy relacionadas
2. Se reproduce y renueva en forma continua,
es decir, se vuelve persistente.
3. Se pueden aplicar mezclas de hongos
entomopatógenos con dosis sub letales de
insecticidas para lograr efectos sinérgicos.
4. No contaminan el medio ambiente ni
afectan al hombre 8

9. DESVENTAJAS DE ESTOS HONGOS
1. Sensibilidad a la variación de las
condiciones climáticas
2. Requieren de condiciones de
almacenamiento más exigentes que las
moléculas inorgánicas.
3. En general, los insecticidas biológicos no
matan instantáneamente.
9

10. CLASIFICACION DE LOS
ENTOMOPATOGENOS

11. CLASIFICACION DE LOS
ENTOMOPATOGENOS

12. CARACTERIZACION DE LOS HONGOS
La descripción y la caracterización de estos hongos
se realiza a través de la morfología de sus distintas
estructuras.
ESTRUCTURAS DE
REPRODUCCION
ASEXUAL:
-Conidias (Deuteromycetes)
-Esporangios (Zygomycetes)
Conidias
Conidióforo Penicillium sp.
Botrytis cinerea 12

13. Beauveria bassiana
Hongo con micelio blanco, a la
madurez se torna ligeramente
crema a amarilla.
Produce abundante esporulación, y
también los conidios, fialides y
conidióforos son blancos.
El conidióforo puede ser simple o
ramificado, de alli nace las celulas
conidiogenas, las conidias se
originan en forma simpodial, es
decir en zig-zag.
13

14. Beauveria bassiana: origen de las células esporogenas, que se originan
en sucesión acropetala.
14

15. Beauveria bassiana
Su máxima capacidad de penetración e infección se ve
favorecida a Tº de 20°C y HR mayor del 92%.

16. Parasitismo de Beauveria bassiana

17. Prueba en campo
Beauveria bassiana

18. Prueba de patogenicidad por el entomopatógeno
sobre Dagbertus sp. - 2009
Fuente: Soluciones agrosostenibles SAC.

19. Patogenicidad de Beauveria
bassiana en Dagbertus sp.

20. Paecilomyces fumosoroseus
Colonias de color lila claro a marrón, desarrollo
rápido, con aspecto polvoriento y granular.
Paeciliomyces sp. es un hongo moniliaceo, que se
propaga a través de estructuras de reproducción
asexual como son los conidios.
Es un hongo común
del ambiente que se
encuentra
parasitando e
infectando a ciertos
insectos .
20

21. Paecilomyces fumosoroseus:
Parasita eficientemente
mosca blanca en cultivos de
tomate en invernadero.
Controla eficazmente huevos,
larvas y adultos de
Trialeurodes vaporariorum,
Bemisia tabaci y Aleroidicus
dispersus

22. A: Paecilomyces elegans, B: P. fumosoroseus, C: P.
bacilispora, D: P. terricola. 22

23. Paecilomyces fumosoroseus
El micelio tiene una coloración blanca liláceo,
el conidióforo bien desarrollado, simple o
ramificado. En algunos especies la célula
conidiogena nace directamente de la hifa, y da
lugar a las conidias.
La producción de conidias es en cadena, con
crecimiento basipetalo.
23

24. Paecilomyces fumosoroseus
P. fumosoroseus ,es un hongo con alta capacidad
de parasitar mosca blanca, especialmente Bemisia
tabaci , Bemisia argentifolii y Aleurotrixus flocosus.
Mosca blanca (Bemisia tabaci), infectado y
muerto por el hongo entomopatogeno
Paecilomyces 24

25. Mosca blanca (Bemisia tabaci), infectado y muerto
por el hongo entomopatógeno Paecilomyces
fumosoroseus
hongo
Alas de
Bemisia
tabaci
25

26. Mosca díptera, infectado y muerto por el hongo
entomopatogeno Entomophthora sp.
Entomophthora sp.
26

27. Metarhizium anisopliae
27

28. Metarhizium anisopliae
Puede infectar estadios como huevos, ninfas,
pupas y adultos).
Las condiciones que favorecen para la
penetración e infección es entre 22 a 30° C y
humedad relativa de 75 al 100%
Colonias de color verde olivo a oscuro, que varían
desde el oliváceo hasta verde amarillo o verde
oscuro.
28

29. Metarhizium anisopliae
Conidioforo ramificado en forma alternada , conidias
cilíndricas a ovales que se forman en cadenas
originadas en fialides.
Las conidias se originan a partir de las fialides con
sucesión basipétala, estando la conidia más joven en
la base de la cadena.
Las conidias son blancos cuando son jóvenes, pero
conforme maduran toman el color verde oscuro
característico de esta especie.
29

30. Metarhizium anisopliae
Los insectos infectados por este hongo
presentan un moho, color verde oscura.
30

31. Metarhizium anisopliae
Adultos de Metamasius hemipterus sericeus, infectados por el hongo
Metarhizium anisopliae
31

32. Lecanicillium lecani afectando Pulgón
32

33. Pochonia chlamydosporia
Es un hongo con colonias color blanco, micelio sumergido
en cultivo in vitro. Al estado de madurez en placa con
medio PDA tiene aspecto de polvo.
33

34. MECANISMO DE INFECCION DE
ENTOMOPATOGENOS
1. Adhesión y germinación de la espora en la
cutícula del insecto.
2. Penetración dentro del hemocele.
3. Desarrollo del hongo que resulta en la muerte
del insecto-
34

35. CICLO BIOLOGICO DEL
ENTOMOPATOGENO
35

36. MECANISMO DE INFECCION DE
ENTOMOPATOGENOS
36

37. NEMATOPATOGENO
37

38. Trichoderma spp.
 Trichoderma es un hongo que pertenece a los
ascomicetes su fase perfecta y los Deuteromycetes su
fase asexual.
 En La mayoría de las especies, fase asexual se caracteriza
por tener un color verde brillante o blanco amarillento por
el conglomerado de conidios.
 Las colonias son al principio blancas y algodonosas.
 La estructura de multiplicación asexual son las conidia,
cuyo color le da la tonalidad de colonia verde. La
conidiogenesis en algunas especies son favorecidas con
la luz azul .
 Bajo condiciones desfavorables de crecimiento, este
hongo tiene la capacidad de formar clamidosporas a partir
de su hifa.

39. HONGO TRICHODERMA VIRIDE
39

40. HONGO TRICHODERMA VIRIDE
40

41. MECANISMOS DE ACCIÓN
•Competencia
•Antibiosis
•Micoparasitismo y lisis enzimática.
•Inducción de resistencia
Según Harman et al. el micoparasitismo
es el principal mecanismo de acción de
Trichoderma, sobre su hospedante.
41

42. Antibiosis
Trichoderma actúa sobre su antagonista
produciendo ciertos metabolitos como parte
de su metabolismo normal.
Estos pueden ser como viridinas, gliotoxinas,
etc, las cuales actúan directamente sobre
otros organismos, para inhibir el crecimiento
y desarrollo.
42

43. Micoparasitismo
Luego de entrar en contacto la hifa de
Trichoderma, esta ejerce una presión mecánica
sobre la hifa del hospedante (patógeno).
Luego hay una explosión metabólica al
reconocimiento de su hospedante y da lugar a la
producción de enzimas quitinoliticas para
degradar las quitinas del hongo patógeno.
Seguidamente hay mecanismos de absorción de
contenido citoplasmático del patógeno por
Trichoderma.
43

44. Micoparasitismo
T= hifas de Trichoderma, R=
hifas de R. solani
44

45. T
R
T= hifas de Trichoderma, R= hifas de R. solani

46. PRODUCCION DE
ENTOMOPATOGENOS
Aspectos a tener en cuenta: (Soberanis, W. - SENASA)
1. Selección cepa adecuada.
2. Selección del medio de cultivo que permita
obtener el máximo potencial patogénico del
microorganismo.
3. Producción tecnológica con bajo costo.
4. Formulación que permita almacenar por
períodos prolongados, facilidad de aplicación y
estabilidad en condiciones de campo.

47. ETAPAS DE LA PRODUCCION DE
ENTOMOPATOGENOS
1. Primera etapa: OBTENCION DE LA CEPA DE HONGO
-Aislamiento del hongo en campo
-Pruebas de patogenicidad
2. Segunda etapa: MULTIPLICACION IN VITRO DE P. fumosoroseus.
-Multiplicación en medio PDA
-Multiplicación en frascos.
3. Tercera etapa: PRODUCCION MASIVA DEL ENTOMOPATOGENO
-Multiplicación en medio sustrato sólido
4. Control de calidad del hongo formulado.
-Concentración de conidias o esporas
-Viabilidad de conidias o esporas
-Pureza
Aplicación en campo del entomopatógeno

48. ESQUEMA DE LA PRODUCCION DE
ENTOMOPATOGENOS

49. Proceso de producción de Trichoderma
spp. en sustrato sólido. Tesis para M Sc Yuri Calle.

50. 50

51. 51

52. PRUEBA DE PATOGENICIDAD
DE ANTAGONISTAS
Se puede realizar mediante cultivo o confrontacion
dual, sin embargo es mas efectiva el método de las
placas precolonizadas

53. METODO DE LAS PLACAS
PRECOLONIZADAS
Fuente: Tesis MSc. Yuri Calle-
UNALM
53

54. PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE
Trichoderma spp. IN VITRO
Crecimiento de Trichoderma viride A y Trichoderma sp. de Chincha B,
sobre un aislamiento de R. solani procedente de Chincha. Tesis para
M Sc Yuri Calle- UNALM
54

55. PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE
Trichoderma spp. IN VITRO
Crecimiento de Trichoderma spp. : T. viride A, aislamiento Ca1 de Cañete B, Ch1 de
Chincha C, y T. harzianum D, sobre un aislamiento de R. solani procedente de Chincha
Tesis para M Sc Yuri Calle- UNALM 55

56. PRUEBA DE PATOGENICIDAD DE
Trichoderma spp. EN CAMPO
Daños en cuello y raíces en
plántulas de algodón causado
por R. solani. Testigo (control)
A, Control químico B,
Inmersión con Trichoderma
sp. Ch1 C, Trichoderma viride
+ estiércol ovino D,
Trichoderma sp. Ch1 +
estiércol ovino E, Trichoderma
sp. Ca1 + estiércol ovino F.
Tesis para M Sc Yuri Calle-
UNALM

57. CONCENTRACION DE CONIDIAS
Cámara de Neubauer vista al microscopio (40X).
57

58. Buenas Prácticas de Producción
Las Buenas Prácticas de Producción (BPP) son una
herramienta básica para la obtención de productos
seguros que se centralizan en la asepsia y forma de
manipulación.
Microorganismos modificados genéticamente: alto
riesgo
- Microorganismos autóctonos: Menor riesgo
- Microorganismos exóticos: riesgo variable
58

59. SEGURIDAD Y CUIDADOS
La bioseguridad es un conjunto de medidas y
procedimientos destinadas a proteger al operador , a la
comunidad y al ambiente, de los riesgos que entraña el
trabajo con estos agentes.
El riesgo biológico : Es la probabilidad de que ocurra
un daño sobre el personal del laboratorio, los animales
o el ambiente asociado a la producción, uso y
manipulación general de los agentes biológicos.
59

60. THANK YOUR….
60