Standardisation du test DMFA

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Standardisation du test DMFA - Parole de Junior de la 7e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - Gaye Abdoulaye - Sénégal - ablayeg@yahoo.fr

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Standardisation du test DMFA

  1. 1. Standardisation du test DMFA Gaye A; Gadiaga L; Diop A; Konaté L; Boudin C, Sokhna, C
  2. 2. Définition du DMFAC’est le test de gorgement direct desmoustiques d’élevage à travers unemembrane ou de l’anglo-saxon: DirectMembrane Feeding Assay
  3. 3. Objectifs du test DMFA• Obtenir un taux de gorgement optimal• Obtenir un taux d’infection optimal
  4. 4. Technique d’élevage des moustiques Facteurs essentiels liés aux larves Facteurs essentiels liés aux adultes
  5. 5. Facteurs liés aux larves (1) Nature et quantités d’eau • Eau pure ou naturelle (à défaut: eau robinet décontaminé pendant 48 heures) • Quantité d’eau: ne doit pas dépasser un centimétre, c’est important pour le réchauffement de l’eau des larves
  6. 6. Facteurs liés aux larves (2) Alimentation: farine nutritives riche en protéine; commercialisé sous le nom de Tetra Micro Min® (pour alevins) Température: condition constante de température (28 – 30°C)
  7. 7. Facteurs liés aux adultes (1) Température / humidité: condition constante de température (25°C) et d’humidité (70 - 80%) Alimentation: jus sucré, saccharose (10%): important, lors de l’émergence des adultes
  8. 8. Facteurs liés aux adultes (2) Sélection des femelles agréssives • Gorgement des moustiques de 3 jours affamés par 12 heures de diète sur lapin • Aspirer les moustiques gorgés et les mettre dans une cage (femelles agressives) • Sélection , faite tous les jours pour augmenter l’effectif des femelles agréssives
  9. 9. Facteurs liés aux adultes (3) Lemême principe est adopté pour la sélection des femelles agréssives sur membrane de parafilm
  10. 10. Matériels et Méthodes
  11. 11. Dispositif expérimental du test 6 1 9 5 8 7 3 1210 4 2 11 Légendes 8: Voie d’aération de la : Thermoplongeur 1: chambre basale 2: Bain-Marie 9: Rampe de suspension 3: Conduit d’entrée d’eau à 37°C dans les cellules des cellules de 4: Conduit de recyclage d’eau gorgement 5: Voie pour introduire le sang 10: Cadre de support 6: Tuyau de connexion intercellulaire 11: Table 7: Cage à moustiques 12: Connexion au secteur éléctrique
  12. 12. Paramètres intervenant sur la standardisation du DMFA Gorgement Infection • Étirement de la •Température du membrane. sang • Densité des • Groupe sanguin moustiques • Mise à jeun des moustiques.
  13. 13. Résultats
  14. 14. Étirement de la membrane (gorgement) Taux deOrigine du Étirement gorgement Comparaison sang (%) moyen 51,1 Χ2 = 14,1 Sang A p < 10-3 maximum 87,2 moyen 74 Χ2 = 5 Sang B maximum 91,5 p < 0,02
  15. 15. Densité optimale de gorgement (gorgement)Densité de Sang A Sang Bmoustiques 50 88,2 (51) 85,4 (48) Χ2 = 38,9 Χ2 = 41,6 100 91,6 (108) 92,1 (102) p < 10-5 p < 10-4 150 59,0 (154) 58,9 (151)
  16. 16. Mise à jeun des moustiques (gorgement) Taux de gorgement % (effectif) 1ère manipulation 2 ème manipulationJus sucré 47 (123) 54,4 (112)Eau 53 (148) 50,7 (142)À jeun (15 h) 84 (139) 88,2 (136)Comparaison Χ2 = 45,1 p < 10-4 Χ2 = 50,4 p < 10-4
  17. 17. Température du sang (infection) 1ere Manipulation 2eme ManipulationThermostat 37 38 39 40 37 38 39 40 Cellules 35,6 36,3 37 37,9 36 36,8 36,9 37,6
  18. 18. Groupes sanguins (infection) Variation du taux d’infection des moustiques gorgés sur un mélange de globules rouges parasités de groupe sanguin O+ et de sérums de même groupe (OWN homologue) ou de groupe sanguin différent (AB, B+ et A-). 0,8 0,7 0,6 % de moustiques + 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 OW (homologue) AB (compatible) B+ (hétérologue) A- (hétérologue) type de sérum s testés
  19. 19. Conclusion Facteursimportants pour la standardisation du DMFA sont: - Étirement de la membrane - Densité des moustiques - Diète des moustique -Température du sang - Groupe sanguin
  20. 20. Merci de votre aimable attention MISOTRA

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