El documento describe la tinción de Gram, una técnica utilizada para clasificar bacterias en Gram positivas u Gram negativas. Explica que las bacterias Gram positivas retienen los colorantes debido a su capa gruesa de peptidoglicano, mientras que las Gram negativas los pierden debido a su membrana externa delgada. Además, destaca la importancia clínica de la tinción de Gram para diagnosticar infecciones y guiar el tratamiento antibiótico.

1. Microbiología cultivo-bacterias
 Tinción de GRAM
 Gram positivo
 Gram negativos
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2. Microbiología cultivo-bacterias
 La microscopia, la construcción y el
manejo de los microscopios, comenzó en
el siglo XVII con Antonie van
Leeuwenhoek y su pequeño microscopio
de mano.
 La experimentación con microorganismos
casi siempre requiere su cultivo en el
laboratorio.
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3. Microbiología cultivo-bacterias
Anton Van Leeuwenhoek.
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4. Microbiología cultivo-bacterias
Microscopio de
Anton van
Leeuwenhoek.
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5. Microbiología cultivo-bacterias
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6. Microbiología cultivo-bacterias
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7. Microbiología cultivo-bacterias
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8. Microbiología cultivo-bacterias
El microscopio de campo claro es más útil para la
observación de especimenes teñidos. Los
colorantes son compuestos químicos utilizados
para aumentar el contraste. Existen algunos,
llamados colorantes vitales, que pueden añadirse
directamente a una preparación en fresco; por
tanto, colorean células vivas. No obstante, la
mayoría de los colorantes son solamente efectivos
después de que los microorganismos hayan sido
fijados, es decir, se encuentren muertos y
adheridos al portaobjetos.
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9. Microbiología cultivo-bacterias
 La tinción de Gram La técnica de la tinción de Gram fue
desarrollada por el bacteriólogo danés Christian Gram
en 1884. Esta tinción clasifica las bacterias en dos
grupos: Gram positivas y Gram negativas (Figura 3.9).
La técnica incluye tinción primaria, decoloración y tinción
de contraste:
 1. Se tiñe el espécimen con el primer colorante, cristal violeta,
que tiñe de violeta.

2. Se añade el mordiente, iodo.

3. Se aplica el agente decolorante, normalmente una solución
de acetona o etanol. En este momento, las bacterias Gram
negativas pierden su tinción violeta, pero las Gram positivas
retienen el colorante.

4. Como colorante de contraste se añade safranina, que tiñe de
rosa las bacterias Gram negativas, previamente decoloradas;
mientras que a las bacterias Gram positivas les proporciona un
color violeta más intenso.
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10. Microbiología cultivo-bacterias
 El distinto comportamiento frente a los
colorantes de las bacterias Gram positivas
y Gram negativas se debe a las
diferencias existentes en sus superficies
externas. Las células Gram negativas
poseen una capa de peptidoglicano
delgada y una membrana externa. Las
bacterias Gram positivas poseen una
capa gruesa de peptidoglicano v carecen
de membrana externa.
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11. Microbiología cultivo-bacterias
 La tinción de Gram es extraordinariamente útil en clínica.
Esta técnica es, casi siempre, la primera prueba que se lleva
a cabo en la identificación de un microorganismo causante de
una enfermedad, aislado de un paciente. Con sólo un
microscopio y unos cuantos botes de colorante podemos
averiguar si un organismo es Gram positivo o Gram negativo,
su morfología celular y su agrupación típica. Esto, a veces, es
suficiente para determinar con qué tipo de bacteria estamos
trabajando. Es más, el tratamiento de una infección depende
de que el agente sea Gram positivo o Gram negativo, ya que
algunos antibióticos actúan Sólo sobre los primeros, y otros
sobre los segundos. La penicilina, por ejemplo, es más
efectiva contra bacterias Gram positivas; mientras que la
estreptomicina y la tetraciclina actúan sobre ambas.
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12. Microbiología cultivo-bacterias
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13. Microbiología cultivo-bacterias
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14. Microbiología cultivo-bacterias
 NOTAS CLINICAS
 En primer lugar haga una tinción de Gram
 Un muchacho de diecinueve años que estaba perfectamente
por la mañana, comenzó a sentirse mal por la tarde. Sus
padres lo encontraron paseándose por la casa en ropa interior,
jurando murmurando entre dientes. Cada vez se encontraba
más agitado y hostil. Finalmente, con la ayuda de un vecino, lo
metieron a la fuerza en un coche y lo llevaron a urgencias.
Aunque su extraño comportamiento podía ser debido a las
drogas, tenía una fiebre de 40C, lo cual sugería una infección.
Se le tomaron muestras de sangre, orina y líquido
cerebroespinal (obtenido mediante punción lumbar). En unos
minutos el médico de urgencias tuvo el diagnóstico. Una tinción
de Gram del líquido cefalorraquídeo reveló la presencia de
numerosos diplococos Gram negativos (bacterias esféricas en
parejas). Se trataba de Neisseria meningitidis, causa común de
la meningitis bacteriana en adultos jóvenes. El diagnóstico
precoz mediante la tinción de Gram, permitió un tratamiento
rápido y la completa recuperación de la infección que
amenazaba su vida. ToMaV Gram

15. Microbiología cultivo-bacterias
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