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Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60

Artículo original
                           Etiología de diarrea aguda en niños menores de 5 años
                                         Ciudad Bolívar, Venezuela
              Julman R Cermeñoa,*, Isabel Hernández de Cuestaa, Maryericks Camaripanoa, Nelly Medinaa,
                                    Armando Guevaraa, Carlos Hernández Riverob
          a
           Departamento de Parasitología y Microbiología. Escuela de Ciencias de la Salud “Dr. Francisco Battistini Casalta”
                                               Universidad de Oriente. Núcleo Bolívar
                           b
                             Centro de Pediatría Integral “Dr. Carlos Hernández Acosta”. Ciudad Bolívar
                                                      Estado Bolívar. Venezuela

                                        Recibido 20 de agosto de 2007; aceptado 20 de febrero de 2008
______________________________________________________________________________________________________________

Resumen: Se determinó la etiología infecciosa de la diarrea aguda en niños menores de 5 años en Ciudad Bolívar, Estado Bolívar. Para
ello, se procesaron 110 muestras de heces. Se realizó un examen directo de heces, métodos de concentración Kato-Katz, formol-éter y
Kinyoun para identificación de parásitos; detección de antígenos virales de Adenovirus y Rotavirus mediante Látex Diarlex®, coproculti-
vo y Tricrómica modificada de Ryan-Blue para Microsporidium spp. La prevalencia de parasitosis intestinal fue 27,3%, siendo Blastocys-
tis hominis y Giardia lamblia las más frecuentes (11,8% y 9,2% respectivamente). Once muestras resultaron positivas para Rotavirus
(10,0%) y 3 para Adenovirus (2,7%). Las enterobacterias diagnosticadas fueron Escherichia coli enteropatógena (2,7%; 3/110), Salmone-
lla spp (1,8%; 2/110) y Shigella spp (0,9%; 1/110). Los síntomas más frecuentes fueron: fiebre (40,1%) y dolor abdominal (27,3%). No se
observó Microsporidium spp. No hubo asociación significativa entre la presencia de enteropatógenos y los síntomas (p>0,05). Se conclu-
ye que la etiología de las diarreas agudas en niños menores de 5 años en Ciudad Bolívar, durante el período de estudio, fue principalmente
de origen parasitario y viral.

Palabras clave: Adenovirus, Blastocystis hominis, Diarrea aguda, Giardia lamblia, Rotavirus, Salmonella spp.


                    Etiology of acute diarrhea in children under five years of age in
                                      Ciudad Bolivar, Venezuela
Abstract: The infectious etiology of acute diarrhea in children under five years of age in Ciudad Bolivar, Bolivar State was determined.
One hundred and ten stool samples were processed. The tests included direct examination, the Kato-Katz concentration method, the for-
mol-ether method and the Kinyoun method for parasite identification, detection of viral Adenovirus and Rotavirus antigens through Latex
Diarlex ®, stool culture, and modified Ryan-Blue trichromic stain for Microsporidium spp. Prevalence of intestinal parasitosis was 27.3%
and Blastocytis hominis and Giardia lamblia were the most frequent parasites (11.8% and 9.2% respectively). Eleven samples were posi-
tive for Rotavirus (10.0%) and 3 for Adenovirus (2.7%). The enterobacteria diagnosed were enteropathogenic Escherichia coli (2.7%;
3/110), Salmonella spp (1.8%; 2/110) and Shigella spp (0.9%; 1/110). The most frequent symptoms were: fever (40.1%) and abdominal
pain (27.3%). Microsporidium spp was not observed. There was no significant association between presence of enteropathogens and
symptoms (p>0.05). It is concluded that the etiology of acute diarrhea in children under five years of age in Ciudad Bolivar during the
study period was mainly of parasite and viral origin.

Key words: Adenovirus, Blastocytis hominis, acute diarrhea, Giardia lamblia, Rotavirus, Salmonella spp.
______________________________________________________________________________________________________________
* Correspondencia:
E mail: jcerme@cantv.net

Introducción                                                              rables a diversas enfermedades, siendo ésta una de las más
                                                                          frecuentes. En algunos países ocupa el primer lugar como
 Las enfermedades diarreicas son la principal causa de                    causa de defunción en niños de 1 a 4 años. Las enfermeda-
mortalidad en niños menores de un año en América Latina.                  des diarreicas están asociadas a retardo del crecimiento
Durante los primeros seis años de vida los niños son vulne-               [1].
56                          Cermeño y col. / Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60


   La diarrea se ha definido como la presencia de 3 o más               Materiales y Métodos
evacuaciones líquidas o sueltas en 24 horas o una evacua-
ción líquida con sangre en el mismo período de tiempo [2].                El presente trabajo es un estudio de corte transversal y
Se trata de una patología de relevante importancia sanita-              prospectivo. Fue realizado en el Servicio de Emergencia
ria, cuyo manejo es relativamente fácil por parte de perso-             Pediátrica del Hospital Universitario Ruiz y Páez y el
nal capacitado, pero requiere para su control de provisión              Centro de Vacunación “Dr. Carlos Hernández Acosta” de
de agua potable, condiciones higiénicas, alimentarias y                 Ciudad Bolívar, Estado Bolívar, Venezuela, entre los me-
adecuado control de las excretas, ya que su propagación se              ses Agosto del 2004 a Febrero del 2005; se incluyeron 110
realiza por vía fecal-oral [3].                                         niños de ambos sexos menores de 5 años que presentaban
Según la Organización Panamericana de la Salud (OPS)                    diarrea aguda (3 o más evacuaciones líquidas o sueltas en
[4] las enfermedades diarreicas constituyen un problema                 24 horas o una evacuación con sangre, durante un período
de salud pública en el mundo, especialmente en los países               menor de 14 días) [8], cuyos padres dieron su consenti-
en desarrollo, donde representan una importante causa de                miento informado. Se llenó una ficha epidemiológica para
morbilidad y mortalidad en niños menores de 5 años. Se ha               la recolección de datos personales (edad, sexo, proceden-
estimado que en África, Asia y América Latina cada año                  cia, características de las evacuaciones: consistencia, pre-
mueren alrededor de 3,3 millones de niños por este sín-                 sencia de sangre y moco; inicio de síntomas y manifesta-
drome y ocurren más de mil millones de episodios [1].                   ciones clínicas).
Actualmente, apenas el 60% de los episodios diarreicos                  Durante la admisión del paciente se recolectó una muestra
son diagnosticados etiológicamente, permaneciendo gran                  de heces en envases adecuados y un hisopado de ésta fue
número de los casos con etiología desconocida [4].                      inoculado en medio de Cary-Blair, conservándose a 4ºC y
   Datos epidemiológicos demuestran que el aumento de                   procesándose en un tiempo que no excedió a las 8 horas.
casos por diarrea en menores de cinco años se mantuvo                   Las muestras obtenidas fueron examinadas de inmediato
hasta 1996, disminuyó en el 1997 y repuntó en 1998 y                    para la investigación de virus, parásitos y hongos. La pre-
1999. En Venezuela la enteritis y otras enfermedades dia-               sencia de antígenos virales de Adenovirus y Rotavirus se
rreicas constituyen un problema de salud pública, mante-                determinó por el método de partículas útiles sensibilizadas
niéndose entre las principales causas para el período 1998              con anticuerpos específicos (DIARLEX ROTA® y DIAR-
y 1999, y se encuentra en la actualidad como la segunda                 LEX ADENO®).
causa de muerte en niñas y niños menores de cinco años                    Las muestras fueron sembradas en agar MacConkey,
[2,4].                                                                  agar Salmonella-Shigella, agar Xilosa-Lisina-Desoxicolato
   La OPS ha estimado la ocurrencia de 1,32 millones de                 (XLD), caldo de Selenito, agar sin sangre suplementándo-
episodios de diarrea anuales, con una mediana de 2,2 epi-               se con cefoperazona. El coprocultivo fue realizado si-
sodios por niño y año, cifra muy similar a la registrada en             guiendo los métodos estándares y las recomendaciones del
todo el mundo. En los últimos años, éstas han representado              Comité Internacional de Laboratorios Clínicos [9,10]. La
en Venezuela la novena causa de muerte en la población                  identificación de Escherichia coli enteropatógena y ente-
general y la segunda causa de mortalidad en menores de 4                roinvasiva se realizó mediante serotipificación (Fuvesin®)
años; según el boletín publicado por la OPS [3]. De los                 siguiendo las indicaciones del fabricante.
casos registrados desde 1998 hasta el año 2004, aproxima-                 Para la búsqueda de parásitos intestinales se realizó un
damente el 30% ocurrieron en menores de 1 año [5].                      examen directo de heces macroscópico y microscópico,
   El Departamento de Epidemiología Regional del Institu-               métodos de concentración: Kato-Katz y formol-Éter y
to de Salud Pública en el estado Bolívar, registró para el              técnicas especiales de coloración (Kinyoun) [11].
año 1999 un total de 14.541 casos de diarrea en niños                     Para la búsqueda de hongos, específicamente Microspo-
menores de 5 años, tal cifra ha aumentado progresivamen-                ridium spp, se practicó la tinción Tricrómica modificada
te, registrándose un total de 15.205 casos para el año 2000;            Ryan Blue [11].
19.039 casos para el año 2001 y 21.280 casos para el año                  Las muestras de heces, para la identificación de virus
2002, observándose un leve descenso para el año 2003 con                entéricos (Rotavirus y Adenovirus), parásitos intestinales y
un total de 18.708 casos registrados en niños menores de 5              hongos, fueron procesadas en el Departamento de Parasito-
años [6].                                                               logía y Microbiología de la Escuela de Ciencias de la Sa-
   Dada la importancia de esta patología frecuente en ni-               lud “Dr. Francisco Battistini Casalta”.
ños, y que en nuestro medio no existen estudios previos                   Los coprocultivos para detectar bacterias enteropatóge-
que contemplen la búsqueda de los diferentes agentes                    nas se realizaron en el Laboratorio de Microbiología del
infecciosos etiológicos: virales, bacterianos, parasitarios y           Hospital Universitario “Ruiz y Páez”.
fúngicos en una misma muestra de heces, desconociéndose
la frecuencia de los mismos, se realizó esta investigación,             Análisis Estadístico
con el objetivo de determinar la prevalencia de virus, pará-
sitos intestinales, bacterias y hongos (Microsporidium spp)               Se realizó estadística descriptiva. Se empleó la Prueba
[7] como agentes etiológicos del Síndrome diarreico en                  de Ji al cuadrado y el Test Exacto de Fisher para comparar
niños menores de 5 años en Ciudad Bolívar, Estado Bolí-                 las variables cualitativas. Se utilizó el Paquete Estadístico
var.                                                                    SPSS versión 10.0 para Ordenador IBM.
Cermeño y col. / Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60                          57


Resultados                                                                     arrea en 24 horas, fue de 4 evacuaciones al día (n=85;
                                                                               77,3%), seguido de 5–8 evacuaciones al día (n=21;
  Se procesó un total de 110 muestras de heces obtenidas                       19,1%). La mayoría de los niños tenía entre 1-4 días con
de 110 niños con síndrome diarreico agudo. La edad me-                         diarrea (n=81; 73,6%), seguido por el rango de 5–8 días
dia de la población estudiada fue de 9 ± 15 meses siendo el                    (n=19; 17,4%). Los síntomas clínicos prevalentes fueron:
sexo masculino prevalente (n= 60; 54,5%). El 57,2% eran                        fiebre (n=54; 49,1%), dolor abdominal (n=30; 27,3%) y
menores de 1 año de edad (n=63), seguido por el grupo de                       vómitos (n= 21; 19,1%), en ningún caso se observó des-
1 – 2 años (n= 24; 21,8%).                                                     hidratación durante la admisión (Tabla 1).
  Con relación a las características macroscópicas de las
heces analizadas se observó un predominio de moco
(n=48; 43,6%). La mayor frecuencia de episodios de di-

          Tabla 1. Manifestaciones clínicas en niños menores de 5 años con diarrea aguda, según la etiología. Ciudad Bolívar, Edo. Bolívar.
          agosto 2004- febrero 2005.

           Sígnos y síntomas                                              Agentes etiológicos infecciosos

                                           Rotavirus         Adenovirus            Parásitos               Bacterias        Total
                                           n (%)             n (%)                 n (%)                   n (%)            n (%)
           Fiebre                          6 (54,5)          2 (66,6)              18 (60,0)               3 (50,0)         54 (49,1)
           Dolor abdominal                 2 (18,2)          0 (0,0)               7 (23,3)                3 (50,0)         30 (27,3)

           Vómitos                         3 (27,3)          0 (0,0)               6 (20,0)                1 (16,6)         21 (19,1)
           Náuseas                         1 (9,1)           1 (33,3)              4 (13,3)                1 (16,6)          12 (10,9)
           Heces con moco                  3 (27,3)          1 (33,3)              16 (53,3)               2 (33,3)         46 (41,8)
           Heces con sangre                1 (9,1)           0 (0,0)               2 (6,7)                 1 (16,7)         4 (3,7)
           Heces con sangre y moco         1 (9,1)           1 (33,3)              6 (20,0)                0 (0,0)          12 (10,9)


  Se encontró una prevalencia del 10% para Rotavirus                             En cuanto a las parasitosis intestinales, se demostró una
(11/110), con predominio en el grupo de 1-2 años de edad                       prevalencia de 27,2% (30/110); siendo los protozoarios los
(n=5). El 2,7% (3/110) resultó positivo para Adenovirus                        de mayor frecuencia. Blastocystis hominis tuvo una preva-
(Tabla 2). No se encontró asociación estadísticamente                          lencia de 11,8%, seguido de Giardia lamblia (9,2%) y
significativa entre la presencia de antígenos virales de                       Entamoeba histolytica y/o E. dispar (2,7%). En cuanto a
Rotavirus y Adenovirus con los síntomas clínicos de los                        los helmintos, el único agente etiológico observado fue
pacientes (p>0,05).                                                            Ascaris lumbricoides en un 1,8% (2/110).

                    Tabla 2. Agentes etiológicos de diarrea aguda en niños menores de 5 años según grupo etario. Ciudad Bolívar,
                    Edo. Bolívar. Agosto 2004- Febrero 2005.

                                                                                 Agentes infecciosos
                         EDAD
                         (años)              Rotavirus            Adenovirus                   Parásitos               Bacterias
                                               n (%)                   n (%)                     n (%)                  n (%)
                          0–1                 4 (3,6)               0 (0,0)                   13 (11,8)                 4 (3,6)
                         >1 – 2               5 (4,5)               1 (0,9)                     6 (5,5)                 0 (0,0)
                         >2 – 3               2 (1,8)               1 (0,9)                    3 (2,7)                  0 (0,0)
                         >3 – 4               0 (0,0)              0 (0,0)                     4 (0,0)                  1 (0,9)
                         >4 – 5               0 (0,0)               1 (0,9)                     4 (3,6)                 1 (0,9)
                         Total                11 (10)               3 (2,7)                    30 (27,3)                6 (5,4)


  Se demostró asociación parasitaria entre Entamoeba                           Shigella spp con una prevalencia del 0,9% (1/110), respec-
histolytica – Blastocystis hominis en un 0,9% (1/110) (Ta-                     tivamente (Tabla 3); el sexo masculino fue el más afectado
bla 3). El sexo masculino fue el más afectado (60%; 12/30)                     con un 66,6% (4/6) y el grupo etario entre los 0-1 año.
y los menores de un año. No se demostró la presencia de                           No se observó Microsporidium spp en ninguna muestra.
Cryptosporidium spp ni de Cyclospora cayetanensis en las                          No se evidenció Rotavirus, Adenovirus, bacterias, pará-
muestras fecales.                                                              sitos ni hongos en 27 muestras de heces de los niños con
  Las enterobacterias encontradas fueron a Escherichia                         diarrea aguda evaluados.
coli enteropatógena con una prevalencia de 2,7%; seguida
de Salmonella spp con una prevalencia de 1,8% (2/110) y
58                          Cermeño y col. / Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60

                        Tabla 3. Agentes etiológicos causantes de diarreas en niños menores de 5 años en Ciudad Bolívar,
                        Edo. Bolívar. Agosto 2004- Febrero 2005.

                       Agentes etiológicos                               Número de casos                %

                       Virus
                       Rotavirus                                         11                            10,0
                       Adenovirus                                        3                             2,7
                       TOTAL                                             14                            12,7

                       Parásitos
                       Blastocystis hominis                              13                            11,8
                       Giardia lamblia                                   10                            9,2
                       Entamoeba histolytica                             3                             2,7
                       Ascaris lumbricoides                              2                             1,8
                       Endolimax nana                                    1                             0,9
                       E. histolytica y/o dispar- B. hominis             1                             0,9
                       TOTAL                                             30                            27,3

                       Bacterias
                       Escherichia coli enteropatógena                   3                             2,7
                       Salmonella spp                                    2                             1,8
                       Shigella spp                                      1                             0,9
                       TOTAL                                             6                             5,4



Discusión                                                                       La frecuencia de infección por Adenovirus encontrados
                                                                             en este estudio (2,7%), es similar a los datos obtenidos en
  Este estudio demuestra una mayor prevalencia de parási-                    Bangladesh, donde se encontraron 80 casos positivos
tos y virus como agentes etiológicos de diarrea aguda en                     (1,8%) de 4.409 muestras procesadas [23]. Aunque difiere
niños menores de 5 años, siendo Blastocystis hominis y                       con otros investigadores quienes han señalado una preva-
Rotavirus los agentes más frecuentes, a diferencia de otros                  lencia del 12% (Yucatán, México) y el 13,5% en Estocol-
estudios [12,13]. El principal patógeno viral aislado fue                    mo, Suecia [23,24]. Es importante destacar que a nivel
Rotavirus con un total de 10,0% (11/110), esta cifra es                      regional no hay estudios que demuestren la presencia de
inferior a lo señalado por otros autores en diferentes esta-                 este agente en niños con diarrea aguda menores de 5 años.
dos de Venezuela, en donde se describe una prevalencia                          Los Adenovirus afectan principalmente a niños de 12
del 14% en Maracaibo (1994), 26,5% en Mérida (1999),                         meses de edad. En este trabajo, los casos de infección con
hasta un 30% en otras ciudades venezolanas [14-16].                          este virus se demostraron en el primer año de edad y la
Posiblemente, esta diferencia esté relacionada con la técni-                 manifestación clínica más importante fue la presencia de
ca empleada.                                                                 fiebre [20,23]. Otros estudios describen una diversidad de
  Se ha demostrado en diferentes poblaciones, que el prin-                   manifestaciones clínicas en pacientes con gastroenteritis
cipal agente etiológico viral, causante de diarrea en niños                  por este agente, predominando fiebre, vómitos y dolor
menores de 5 años es Rotavirus, seguido por Adenovirus                       abdominal [23,25].
entérico [17-20]. El presente estudio demostró el predomi-                      Se ha demostrado que la parasitosis intestinal es uno de
nio de Rotavirus como causa viral; resultados similares se                   los principales agentes etiológicos causantes de diarrea en
han observado en otras partes del mundo [16] y en Vene-                      niños menores de 5 años en países en vías de desarrollo,
zuela [15,16,20-22]; en el caso de los Adenovirus no se                      observándose una elevada prevalencia de Blastocystis
encontraron estudios previos a nivel local; es interesante                   hominis y Giardia lamblia en el estado Bolívar. La pato-
señalar que la frecuencia de infección por este agente fue                   genicidad por B. hominis no está bien definida. Sin embar-
similar a la de algunas infecciones parasitarias (Entamoeba                  go, algunos autores señalan la presencia de éste agente
histolytica) y bacterianas (Escherichia coli).                               como causante de síndrome diarreico agudo en niños,
  Un trabajo realizado en Caracas demostró a Rotavirus                       describiéndose una prevalencia hasta de un 38,6% [26], de
como principal agente etiológico de diarrea en niños me-                     igual forma Giadia lamblia, de amplia distribución en
nores de un año de edad, estos hallazgos son similares a                     nuestro medio, según datos obtenidos del Instituto de Sa-
los encontrados en el presente estudio, donde el 63,6% de                    lud Pública Regional. El presente estudio demostró resul-
los niños con diarrea aguda por Rotavirus se encontraban                     tados similares a los encontrados tanto a nivel regional,
entre los 7 - 24 meses. La frecuencia de enfermedad cau-                     como a nivel mundial [3,6,26].
sada por Rotavirus es baja entre los 0 - 2 meses de vida, en                    Cryptosporidium spp., Cyclospora spp. y Mycrospori-
esta investigación no se evidenciaron casos dentro de este                   dium spp. pueden causar diarrea aguda, observándose con
rango, lo que puede deberse a la protección por los anti-                    mayor frecuencia en pacientes inmunocomprometidos
cuerpos transplacentarios [21].                                              [27]; la prevalencia de estas infecciones en pacientes in-
Cermeño y col. / Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60                         59


munocompetentes es baja [6,15]. Es importante la realiza-                 7.    Keeling PJ, Fast NM. Microsporidia: Biology and evolution
ción de técnicas de coloración que permitan evaluar la                          of highly reduced intracellular parasites. Annu Rev Micro-
presencia de estos patógenos, tanto en pacientes inmuno-                        biol 2002; 56:93-116.
competentes como inmunocomprometidos. En el presente                      8.    World Health Organization (WHO). The treatment of diar-
                                                                                rhoea: a manual for physicians and other senior health
estudio no se evidenció la presencia de coccidios intestina-                    workers. WHO/CAH/037; 2003; 10/03.
les ni de Microsporidium spp.                                             9.    Lennette EH, Balows A, Hausler WJ Jr, Shadomy HJ, eds.
   Se aisló con mayor frecuencia Escherichia coli enteropa-                     Manual of clinical microbiology, 4th ed. New York: El-
tógena (3 casos); en el grupo etario de 0-1 año, seguido de                     sevier, 1996.
Salmonella spp (2 casos) y Shigella spp (1 caso) con una                  10.    Clinical and Laboratory Standards Institute. CLSI/NCCLS.
mayor incidencia en menores de 1 año, coincidiendo con                          Document M100-S15. Performance Standards for Antim-
otros estudios realizados en el ámbito mundial [1,3,28-29]                      icrobial Susceptibility testing. Fifteenth Information Sup-
y nacional [5].                                                                 plement. CLSI, Wayne, Pa, 2005.
   Un estudio realizado por Vizcaya y cols., demostró que                 11.   Garcia, LS. Diagnostic Medical Parasitology. 4ª ed. Wash-
                                                                                ington, DC: American Society for Microbiology; 2001.
en niños menores de 5 años con enfermedad diarreica                       12.   De Castro L, Rodriguez D, Flauzino R, Moura M. An Out-
aguda el agente infeccioso más frecuente aislado era de                         break of diarrhoea associated with Rotavirus serotype 1 in
origen bacteriano en el estado Mérida, seguido de las para-                     day care nursery in Rio de Janeiro. Mem Inst Oswaldo Cruz
sitosis [16], a diferencia de este estudio donde los parásitos                  1994; 89: 5-9.
intestinales y virus fueron los más frecuentes.                           13.   Gouvea V, de Castro L, Timenetsky MC, Greenberg H,
   Cabe destacar que en este estudio hubo niños con diarrea                     Santos N. Rotavirus serotype 65 associated with diarrhea in
aguda en quienes no se demostraron Rotavirus, Adenovi-                          Brazilian children. J Clin Microbiol 1994; 32: 1408-9.
rus, parásitos, bacterias ni hongos (Microsporidium spp),                 14.   Callejas D, Estevez J, Bliyz-Dorfman L, Garcia D. Molecu-
quizás ello sea debido a la presencia de otros virus entero-                    lar epidemiology of subgroups and serotypes of rotavirus in
                                                                                children less than 4 years of age in the city of Maracaibo
patógenos no investigados, transgresiones dietéticas, into-                     with a diarrhea1l syndrome. Invest Clin 1994; 35: 3-17.
lerancia a la lactosa, entre otras.                                       15.   Urrestarazu MI, Liprandi F, Pérez E, González R, Pérez–
                                                                                Schael I. Etiological, Clinical, and Sociodemographic Char-
Conclusión                                                                      acteristics of Acute Diarrhea in Venezuela. Rev Panam Sa-
                                                                                lud Pública 1999; 6:149-156.
  La etiología de la diarrea aguda en niños menores de 5                  16.   Vizcaya LE, Carrero AF, Hernández JG, Blanco BN, Pérez-
años en Ciudad Bolívar, en el período Agosto 2004- Febre-                       Schael I. Origen bacteriano de la enfermedad diarreica agu-
ro 2005; fue principalmente de origen parasitario (Blasto-                      da en Mérida, Venezuela. Rev Cubana Med Trop 1999;
cystis hominis) y viral (Rotavirus entérico), siendo menos                      51:14-19.
                                                                          17.   Puerto FI, Polanco GG, González MR, Zavala JE, Ortega G.
frecuente el origen bacteriano (Escherichia coli enteropa-                      Role of rotavirus and enteric adenovirus in acute paediatric
tógena).                                                                        diarrhoea at an urban hospital in México. Trans R Soc Trop
                                                                                Med Hyg 1989; 83:396-98.
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                                                                                Tanaka H. Rotavírus, Adenovírus, Astrovírus, Calicivírus e
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Caso 9

  • 1. Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60 Artículo original Etiología de diarrea aguda en niños menores de 5 años Ciudad Bolívar, Venezuela Julman R Cermeñoa,*, Isabel Hernández de Cuestaa, Maryericks Camaripanoa, Nelly Medinaa, Armando Guevaraa, Carlos Hernández Riverob a Departamento de Parasitología y Microbiología. Escuela de Ciencias de la Salud “Dr. Francisco Battistini Casalta” Universidad de Oriente. Núcleo Bolívar b Centro de Pediatría Integral “Dr. Carlos Hernández Acosta”. Ciudad Bolívar Estado Bolívar. Venezuela Recibido 20 de agosto de 2007; aceptado 20 de febrero de 2008 ______________________________________________________________________________________________________________ Resumen: Se determinó la etiología infecciosa de la diarrea aguda en niños menores de 5 años en Ciudad Bolívar, Estado Bolívar. Para ello, se procesaron 110 muestras de heces. Se realizó un examen directo de heces, métodos de concentración Kato-Katz, formol-éter y Kinyoun para identificación de parásitos; detección de antígenos virales de Adenovirus y Rotavirus mediante Látex Diarlex®, coproculti- vo y Tricrómica modificada de Ryan-Blue para Microsporidium spp. La prevalencia de parasitosis intestinal fue 27,3%, siendo Blastocys- tis hominis y Giardia lamblia las más frecuentes (11,8% y 9,2% respectivamente). Once muestras resultaron positivas para Rotavirus (10,0%) y 3 para Adenovirus (2,7%). Las enterobacterias diagnosticadas fueron Escherichia coli enteropatógena (2,7%; 3/110), Salmone- lla spp (1,8%; 2/110) y Shigella spp (0,9%; 1/110). Los síntomas más frecuentes fueron: fiebre (40,1%) y dolor abdominal (27,3%). No se observó Microsporidium spp. No hubo asociación significativa entre la presencia de enteropatógenos y los síntomas (p>0,05). Se conclu- ye que la etiología de las diarreas agudas en niños menores de 5 años en Ciudad Bolívar, durante el período de estudio, fue principalmente de origen parasitario y viral. Palabras clave: Adenovirus, Blastocystis hominis, Diarrea aguda, Giardia lamblia, Rotavirus, Salmonella spp. Etiology of acute diarrhea in children under five years of age in Ciudad Bolivar, Venezuela Abstract: The infectious etiology of acute diarrhea in children under five years of age in Ciudad Bolivar, Bolivar State was determined. One hundred and ten stool samples were processed. The tests included direct examination, the Kato-Katz concentration method, the for- mol-ether method and the Kinyoun method for parasite identification, detection of viral Adenovirus and Rotavirus antigens through Latex Diarlex ®, stool culture, and modified Ryan-Blue trichromic stain for Microsporidium spp. Prevalence of intestinal parasitosis was 27.3% and Blastocytis hominis and Giardia lamblia were the most frequent parasites (11.8% and 9.2% respectively). Eleven samples were posi- tive for Rotavirus (10.0%) and 3 for Adenovirus (2.7%). The enterobacteria diagnosed were enteropathogenic Escherichia coli (2.7%; 3/110), Salmonella spp (1.8%; 2/110) and Shigella spp (0.9%; 1/110). The most frequent symptoms were: fever (40.1%) and abdominal pain (27.3%). Microsporidium spp was not observed. There was no significant association between presence of enteropathogens and symptoms (p>0.05). It is concluded that the etiology of acute diarrhea in children under five years of age in Ciudad Bolivar during the study period was mainly of parasite and viral origin. Key words: Adenovirus, Blastocytis hominis, acute diarrhea, Giardia lamblia, Rotavirus, Salmonella spp. ______________________________________________________________________________________________________________ * Correspondencia: E mail: jcerme@cantv.net Introducción rables a diversas enfermedades, siendo ésta una de las más frecuentes. En algunos países ocupa el primer lugar como Las enfermedades diarreicas son la principal causa de causa de defunción en niños de 1 a 4 años. Las enfermeda- mortalidad en niños menores de un año en América Latina. des diarreicas están asociadas a retardo del crecimiento Durante los primeros seis años de vida los niños son vulne- [1].
  • 2. 56 Cermeño y col. / Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60 La diarrea se ha definido como la presencia de 3 o más Materiales y Métodos evacuaciones líquidas o sueltas en 24 horas o una evacua- ción líquida con sangre en el mismo período de tiempo [2]. El presente trabajo es un estudio de corte transversal y Se trata de una patología de relevante importancia sanita- prospectivo. Fue realizado en el Servicio de Emergencia ria, cuyo manejo es relativamente fácil por parte de perso- Pediátrica del Hospital Universitario Ruiz y Páez y el nal capacitado, pero requiere para su control de provisión Centro de Vacunación “Dr. Carlos Hernández Acosta” de de agua potable, condiciones higiénicas, alimentarias y Ciudad Bolívar, Estado Bolívar, Venezuela, entre los me- adecuado control de las excretas, ya que su propagación se ses Agosto del 2004 a Febrero del 2005; se incluyeron 110 realiza por vía fecal-oral [3]. niños de ambos sexos menores de 5 años que presentaban Según la Organización Panamericana de la Salud (OPS) diarrea aguda (3 o más evacuaciones líquidas o sueltas en [4] las enfermedades diarreicas constituyen un problema 24 horas o una evacuación con sangre, durante un período de salud pública en el mundo, especialmente en los países menor de 14 días) [8], cuyos padres dieron su consenti- en desarrollo, donde representan una importante causa de miento informado. Se llenó una ficha epidemiológica para morbilidad y mortalidad en niños menores de 5 años. Se ha la recolección de datos personales (edad, sexo, proceden- estimado que en África, Asia y América Latina cada año cia, características de las evacuaciones: consistencia, pre- mueren alrededor de 3,3 millones de niños por este sín- sencia de sangre y moco; inicio de síntomas y manifesta- drome y ocurren más de mil millones de episodios [1]. ciones clínicas). Actualmente, apenas el 60% de los episodios diarreicos Durante la admisión del paciente se recolectó una muestra son diagnosticados etiológicamente, permaneciendo gran de heces en envases adecuados y un hisopado de ésta fue número de los casos con etiología desconocida [4]. inoculado en medio de Cary-Blair, conservándose a 4ºC y Datos epidemiológicos demuestran que el aumento de procesándose en un tiempo que no excedió a las 8 horas. casos por diarrea en menores de cinco años se mantuvo Las muestras obtenidas fueron examinadas de inmediato hasta 1996, disminuyó en el 1997 y repuntó en 1998 y para la investigación de virus, parásitos y hongos. La pre- 1999. En Venezuela la enteritis y otras enfermedades dia- sencia de antígenos virales de Adenovirus y Rotavirus se rreicas constituyen un problema de salud pública, mante- determinó por el método de partículas útiles sensibilizadas niéndose entre las principales causas para el período 1998 con anticuerpos específicos (DIARLEX ROTA® y DIAR- y 1999, y se encuentra en la actualidad como la segunda LEX ADENO®). causa de muerte en niñas y niños menores de cinco años Las muestras fueron sembradas en agar MacConkey, [2,4]. agar Salmonella-Shigella, agar Xilosa-Lisina-Desoxicolato La OPS ha estimado la ocurrencia de 1,32 millones de (XLD), caldo de Selenito, agar sin sangre suplementándo- episodios de diarrea anuales, con una mediana de 2,2 epi- se con cefoperazona. El coprocultivo fue realizado si- sodios por niño y año, cifra muy similar a la registrada en guiendo los métodos estándares y las recomendaciones del todo el mundo. En los últimos años, éstas han representado Comité Internacional de Laboratorios Clínicos [9,10]. La en Venezuela la novena causa de muerte en la población identificación de Escherichia coli enteropatógena y ente- general y la segunda causa de mortalidad en menores de 4 roinvasiva se realizó mediante serotipificación (Fuvesin®) años; según el boletín publicado por la OPS [3]. De los siguiendo las indicaciones del fabricante. casos registrados desde 1998 hasta el año 2004, aproxima- Para la búsqueda de parásitos intestinales se realizó un damente el 30% ocurrieron en menores de 1 año [5]. examen directo de heces macroscópico y microscópico, El Departamento de Epidemiología Regional del Institu- métodos de concentración: Kato-Katz y formol-Éter y to de Salud Pública en el estado Bolívar, registró para el técnicas especiales de coloración (Kinyoun) [11]. año 1999 un total de 14.541 casos de diarrea en niños Para la búsqueda de hongos, específicamente Microspo- menores de 5 años, tal cifra ha aumentado progresivamen- ridium spp, se practicó la tinción Tricrómica modificada te, registrándose un total de 15.205 casos para el año 2000; Ryan Blue [11]. 19.039 casos para el año 2001 y 21.280 casos para el año Las muestras de heces, para la identificación de virus 2002, observándose un leve descenso para el año 2003 con entéricos (Rotavirus y Adenovirus), parásitos intestinales y un total de 18.708 casos registrados en niños menores de 5 hongos, fueron procesadas en el Departamento de Parasito- años [6]. logía y Microbiología de la Escuela de Ciencias de la Sa- Dada la importancia de esta patología frecuente en ni- lud “Dr. Francisco Battistini Casalta”. ños, y que en nuestro medio no existen estudios previos Los coprocultivos para detectar bacterias enteropatóge- que contemplen la búsqueda de los diferentes agentes nas se realizaron en el Laboratorio de Microbiología del infecciosos etiológicos: virales, bacterianos, parasitarios y Hospital Universitario “Ruiz y Páez”. fúngicos en una misma muestra de heces, desconociéndose la frecuencia de los mismos, se realizó esta investigación, Análisis Estadístico con el objetivo de determinar la prevalencia de virus, pará- sitos intestinales, bacterias y hongos (Microsporidium spp) Se realizó estadística descriptiva. Se empleó la Prueba [7] como agentes etiológicos del Síndrome diarreico en de Ji al cuadrado y el Test Exacto de Fisher para comparar niños menores de 5 años en Ciudad Bolívar, Estado Bolí- las variables cualitativas. Se utilizó el Paquete Estadístico var. SPSS versión 10.0 para Ordenador IBM.
  • 3. Cermeño y col. / Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60 57 Resultados arrea en 24 horas, fue de 4 evacuaciones al día (n=85; 77,3%), seguido de 5–8 evacuaciones al día (n=21; Se procesó un total de 110 muestras de heces obtenidas 19,1%). La mayoría de los niños tenía entre 1-4 días con de 110 niños con síndrome diarreico agudo. La edad me- diarrea (n=81; 73,6%), seguido por el rango de 5–8 días dia de la población estudiada fue de 9 ± 15 meses siendo el (n=19; 17,4%). Los síntomas clínicos prevalentes fueron: sexo masculino prevalente (n= 60; 54,5%). El 57,2% eran fiebre (n=54; 49,1%), dolor abdominal (n=30; 27,3%) y menores de 1 año de edad (n=63), seguido por el grupo de vómitos (n= 21; 19,1%), en ningún caso se observó des- 1 – 2 años (n= 24; 21,8%). hidratación durante la admisión (Tabla 1). Con relación a las características macroscópicas de las heces analizadas se observó un predominio de moco (n=48; 43,6%). La mayor frecuencia de episodios de di- Tabla 1. Manifestaciones clínicas en niños menores de 5 años con diarrea aguda, según la etiología. Ciudad Bolívar, Edo. Bolívar. agosto 2004- febrero 2005. Sígnos y síntomas Agentes etiológicos infecciosos Rotavirus Adenovirus Parásitos Bacterias Total n (%) n (%) n (%) n (%) n (%) Fiebre 6 (54,5) 2 (66,6) 18 (60,0) 3 (50,0) 54 (49,1) Dolor abdominal 2 (18,2) 0 (0,0) 7 (23,3) 3 (50,0) 30 (27,3) Vómitos 3 (27,3) 0 (0,0) 6 (20,0) 1 (16,6) 21 (19,1) Náuseas 1 (9,1) 1 (33,3) 4 (13,3) 1 (16,6) 12 (10,9) Heces con moco 3 (27,3) 1 (33,3) 16 (53,3) 2 (33,3) 46 (41,8) Heces con sangre 1 (9,1) 0 (0,0) 2 (6,7) 1 (16,7) 4 (3,7) Heces con sangre y moco 1 (9,1) 1 (33,3) 6 (20,0) 0 (0,0) 12 (10,9) Se encontró una prevalencia del 10% para Rotavirus En cuanto a las parasitosis intestinales, se demostró una (11/110), con predominio en el grupo de 1-2 años de edad prevalencia de 27,2% (30/110); siendo los protozoarios los (n=5). El 2,7% (3/110) resultó positivo para Adenovirus de mayor frecuencia. Blastocystis hominis tuvo una preva- (Tabla 2). No se encontró asociación estadísticamente lencia de 11,8%, seguido de Giardia lamblia (9,2%) y significativa entre la presencia de antígenos virales de Entamoeba histolytica y/o E. dispar (2,7%). En cuanto a Rotavirus y Adenovirus con los síntomas clínicos de los los helmintos, el único agente etiológico observado fue pacientes (p>0,05). Ascaris lumbricoides en un 1,8% (2/110). Tabla 2. Agentes etiológicos de diarrea aguda en niños menores de 5 años según grupo etario. Ciudad Bolívar, Edo. Bolívar. Agosto 2004- Febrero 2005. Agentes infecciosos EDAD (años) Rotavirus Adenovirus Parásitos Bacterias n (%) n (%) n (%) n (%) 0–1 4 (3,6) 0 (0,0) 13 (11,8) 4 (3,6) >1 – 2 5 (4,5) 1 (0,9) 6 (5,5) 0 (0,0) >2 – 3 2 (1,8) 1 (0,9) 3 (2,7) 0 (0,0) >3 – 4 0 (0,0) 0 (0,0) 4 (0,0) 1 (0,9) >4 – 5 0 (0,0) 1 (0,9) 4 (3,6) 1 (0,9) Total 11 (10) 3 (2,7) 30 (27,3) 6 (5,4) Se demostró asociación parasitaria entre Entamoeba Shigella spp con una prevalencia del 0,9% (1/110), respec- histolytica – Blastocystis hominis en un 0,9% (1/110) (Ta- tivamente (Tabla 3); el sexo masculino fue el más afectado bla 3). El sexo masculino fue el más afectado (60%; 12/30) con un 66,6% (4/6) y el grupo etario entre los 0-1 año. y los menores de un año. No se demostró la presencia de No se observó Microsporidium spp en ninguna muestra. Cryptosporidium spp ni de Cyclospora cayetanensis en las No se evidenció Rotavirus, Adenovirus, bacterias, pará- muestras fecales. sitos ni hongos en 27 muestras de heces de los niños con Las enterobacterias encontradas fueron a Escherichia diarrea aguda evaluados. coli enteropatógena con una prevalencia de 2,7%; seguida de Salmonella spp con una prevalencia de 1,8% (2/110) y
  • 4. 58 Cermeño y col. / Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60 Tabla 3. Agentes etiológicos causantes de diarreas en niños menores de 5 años en Ciudad Bolívar, Edo. Bolívar. Agosto 2004- Febrero 2005. Agentes etiológicos Número de casos % Virus Rotavirus 11 10,0 Adenovirus 3 2,7 TOTAL 14 12,7 Parásitos Blastocystis hominis 13 11,8 Giardia lamblia 10 9,2 Entamoeba histolytica 3 2,7 Ascaris lumbricoides 2 1,8 Endolimax nana 1 0,9 E. histolytica y/o dispar- B. hominis 1 0,9 TOTAL 30 27,3 Bacterias Escherichia coli enteropatógena 3 2,7 Salmonella spp 2 1,8 Shigella spp 1 0,9 TOTAL 6 5,4 Discusión La frecuencia de infección por Adenovirus encontrados en este estudio (2,7%), es similar a los datos obtenidos en Este estudio demuestra una mayor prevalencia de parási- Bangladesh, donde se encontraron 80 casos positivos tos y virus como agentes etiológicos de diarrea aguda en (1,8%) de 4.409 muestras procesadas [23]. Aunque difiere niños menores de 5 años, siendo Blastocystis hominis y con otros investigadores quienes han señalado una preva- Rotavirus los agentes más frecuentes, a diferencia de otros lencia del 12% (Yucatán, México) y el 13,5% en Estocol- estudios [12,13]. El principal patógeno viral aislado fue mo, Suecia [23,24]. Es importante destacar que a nivel Rotavirus con un total de 10,0% (11/110), esta cifra es regional no hay estudios que demuestren la presencia de inferior a lo señalado por otros autores en diferentes esta- este agente en niños con diarrea aguda menores de 5 años. dos de Venezuela, en donde se describe una prevalencia Los Adenovirus afectan principalmente a niños de 12 del 14% en Maracaibo (1994), 26,5% en Mérida (1999), meses de edad. En este trabajo, los casos de infección con hasta un 30% en otras ciudades venezolanas [14-16]. este virus se demostraron en el primer año de edad y la Posiblemente, esta diferencia esté relacionada con la técni- manifestación clínica más importante fue la presencia de ca empleada. fiebre [20,23]. Otros estudios describen una diversidad de Se ha demostrado en diferentes poblaciones, que el prin- manifestaciones clínicas en pacientes con gastroenteritis cipal agente etiológico viral, causante de diarrea en niños por este agente, predominando fiebre, vómitos y dolor menores de 5 años es Rotavirus, seguido por Adenovirus abdominal [23,25]. entérico [17-20]. El presente estudio demostró el predomi- Se ha demostrado que la parasitosis intestinal es uno de nio de Rotavirus como causa viral; resultados similares se los principales agentes etiológicos causantes de diarrea en han observado en otras partes del mundo [16] y en Vene- niños menores de 5 años en países en vías de desarrollo, zuela [15,16,20-22]; en el caso de los Adenovirus no se observándose una elevada prevalencia de Blastocystis encontraron estudios previos a nivel local; es interesante hominis y Giardia lamblia en el estado Bolívar. La pato- señalar que la frecuencia de infección por este agente fue genicidad por B. hominis no está bien definida. Sin embar- similar a la de algunas infecciones parasitarias (Entamoeba go, algunos autores señalan la presencia de éste agente histolytica) y bacterianas (Escherichia coli). como causante de síndrome diarreico agudo en niños, Un trabajo realizado en Caracas demostró a Rotavirus describiéndose una prevalencia hasta de un 38,6% [26], de como principal agente etiológico de diarrea en niños me- igual forma Giadia lamblia, de amplia distribución en nores de un año de edad, estos hallazgos son similares a nuestro medio, según datos obtenidos del Instituto de Sa- los encontrados en el presente estudio, donde el 63,6% de lud Pública Regional. El presente estudio demostró resul- los niños con diarrea aguda por Rotavirus se encontraban tados similares a los encontrados tanto a nivel regional, entre los 7 - 24 meses. La frecuencia de enfermedad cau- como a nivel mundial [3,6,26]. sada por Rotavirus es baja entre los 0 - 2 meses de vida, en Cryptosporidium spp., Cyclospora spp. y Mycrospori- esta investigación no se evidenciaron casos dentro de este dium spp. pueden causar diarrea aguda, observándose con rango, lo que puede deberse a la protección por los anti- mayor frecuencia en pacientes inmunocomprometidos cuerpos transplacentarios [21]. [27]; la prevalencia de estas infecciones en pacientes in-
  • 5. Cermeño y col. / Revista de la Sociedad Venezolana de Microbiología 2008; 28:55-60 59 munocompetentes es baja [6,15]. Es importante la realiza- 7. Keeling PJ, Fast NM. Microsporidia: Biology and evolution ción de técnicas de coloración que permitan evaluar la of highly reduced intracellular parasites. Annu Rev Micro- presencia de estos patógenos, tanto en pacientes inmuno- biol 2002; 56:93-116. competentes como inmunocomprometidos. En el presente 8. World Health Organization (WHO). The treatment of diar- rhoea: a manual for physicians and other senior health estudio no se evidenció la presencia de coccidios intestina- workers. WHO/CAH/037; 2003; 10/03. les ni de Microsporidium spp. 9. Lennette EH, Balows A, Hausler WJ Jr, Shadomy HJ, eds. Se aisló con mayor frecuencia Escherichia coli enteropa- Manual of clinical microbiology, 4th ed. New York: El- tógena (3 casos); en el grupo etario de 0-1 año, seguido de sevier, 1996. Salmonella spp (2 casos) y Shigella spp (1 caso) con una 10. Clinical and Laboratory Standards Institute. CLSI/NCCLS. mayor incidencia en menores de 1 año, coincidiendo con Document M100-S15. Performance Standards for Antim- otros estudios realizados en el ámbito mundial [1,3,28-29] icrobial Susceptibility testing. Fifteenth Information Sup- y nacional [5]. plement. CLSI, Wayne, Pa, 2005. Un estudio realizado por Vizcaya y cols., demostró que 11. Garcia, LS. Diagnostic Medical Parasitology. 4ª ed. Wash- ington, DC: American Society for Microbiology; 2001. en niños menores de 5 años con enfermedad diarreica 12. De Castro L, Rodriguez D, Flauzino R, Moura M. An Out- aguda el agente infeccioso más frecuente aislado era de break of diarrhoea associated with Rotavirus serotype 1 in origen bacteriano en el estado Mérida, seguido de las para- day care nursery in Rio de Janeiro. Mem Inst Oswaldo Cruz sitosis [16], a diferencia de este estudio donde los parásitos 1994; 89: 5-9. intestinales y virus fueron los más frecuentes. 13. Gouvea V, de Castro L, Timenetsky MC, Greenberg H, Cabe destacar que en este estudio hubo niños con diarrea Santos N. Rotavirus serotype 65 associated with diarrhea in aguda en quienes no se demostraron Rotavirus, Adenovi- Brazilian children. J Clin Microbiol 1994; 32: 1408-9. rus, parásitos, bacterias ni hongos (Microsporidium spp), 14. Callejas D, Estevez J, Bliyz-Dorfman L, Garcia D. Molecu- quizás ello sea debido a la presencia de otros virus entero- lar epidemiology of subgroups and serotypes of rotavirus in children less than 4 years of age in the city of Maracaibo patógenos no investigados, transgresiones dietéticas, into- with a diarrhea1l syndrome. Invest Clin 1994; 35: 3-17. lerancia a la lactosa, entre otras. 15. Urrestarazu MI, Liprandi F, Pérez E, González R, Pérez– Schael I. 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