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USO DE HIDROLIZADOS ENZIMÁTICOS DE PROTEÍNAS EN ALIMENTACIÓN Dra. Emilia María Guadix Escobar   Departamento de Ingeniería Química Universidad de Granada
PROCESOS ENZIMÁTICOS  Fuente: TIBTECH 2000 (Vol 18)
PROTEASAS aspartatoproteasas  -COOH  (pepsina, quimosina) metaloproteasas  Zn  cisteínoproteasas  -SH  (papaína, bromelaína)   serinoproteasas  -OH ( tripsina, quimotripsina, subtilisina )  más utilizadas en I.A. Subtilisina Tripsina Quimotripsina origen animal vegetal bacteriana fúngica acción catalítica endopeptidasas exopeptidasas carboxipeptidasas aminopeptidasas dipeptidasas
REACCIÓN DE HIDRÓLISIS 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 pH +NH3-P-COOH +NH3-P-COO- NH2-P-COO- cambios en pH cambios en  osmolaridad
HIDRÓLISIS DE PROTEÍNAS EFECTO SOBRE LAS  PROPIEDADES TECNOLÓGICAS EFECTO SOBRE LAS  PROPIEDADES NUTRICIONALES ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
SOLUBILIDAD Sistema proteína de soja – Alcalasa   J. Adler-Nissen et al. 1986 Sistema caseina – protease V-8   J. Adler-Nissen et al. 1986 J. Adler-Nissen et al. 1986 grado de hidrólisis proteína-enzima pH
ADSORCIÓN DE HUMEDAD Sistema proteína de soja–Alcalasa+Flavourzyme. T=22ºC  W.D. Chiang et al. 1999 Sistema proteínas del lactosuero – Protex 6 L . T=20ºC  P. González-Tello et al. 2000 mejora en textura
Actividad emulsificante Poder espumante Sistema proteína de soja. pH=7  J. Adler-Nissen et al. 1986 Sistema proteínas séricas  A. Perea et al. 1993
Sistema proteína de carne  P. Rasmussen et al. 1990 Sistema proteínas séricas–proteasa bacteriana  P. Budtz 1992 Condiciones experimentales de reacciones plasteínicas Viscosidad T. Flytkjaer-Hansen et al. 1993
M.I. Mahmoud et al. 1992 Propiedades nutricionales grado de hidrólisis alimentos predigeridos favorece la absorción intestinal mejora la digestibilidad sabor amargo disminución de la antigenicidad
Productos comerciales propiedades tecnológicas propiedades nutricionales salsas, helados, repostería proteina soluble nutrición infantil y clínica
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],PEPTIDOS BIOACTIVOS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
Péptidos bioactivos R. Hartmann & H. Meisel Current Opinion in Biotechnology 2007, 18:163–169
H. Meisel.  Int. Dairy J. 1998 8: 363-373 Péptidos bioactivos
Péptidos Antihipertensivos
Péptidos Antihipertensivos L. Vercruysse, J. Van Camp,  G.  Smagghe J. Agric. Food Chem.2005,  53  No. 21
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PEPTIDOS BIOACTIVOS R. Hartmann & H. Meisel Current Opinion in Biotechnology 2007, 18:163–169 Food-derived peptides with biological activity: from research to food applications
Productos comerciales propiedades antihipertensivas
Productos comerciales propiedades  anti-stress
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object]
SUSTRATOS BV :  valor biológico , proporción de proteína absorbida para mantenimiento y/o crecimiento D :  digestibilidad , porcentaje de proteína retenida NPU :  utilización neta de proteína , proporción de proteína ingerida que es retenida PER :  eficiencia proteica , relación entre ganancia en peso corporal y peso de proteína consumida   BV D NPU PER Leche 84.5 96.9 81.6 3.09 Caseína 79.7 96.3 72.1 2.86 Lactoalbúmina 82.0 97.0 79.5 3.43 Proteína de soja     61.0   Gluten de trigo     35.0  
Proteasas comerciales origen fuente pH T º C enzima
PROCESO concentraciónpurificación reactor discontinuo reactor enzimas inmovilizadas reactor de membrana mezclador evaporador equipo de filtración Secadero por atomización hidrólisis secado envasado
[object Object],[object Object],[object Object]
CONTROL DE LA HIDRÓLISIS   Grado de hidrólisis Métodos    Determinación de nitrógeno soluble método Kjeldahl  reacción de Biuret    Determinación de los grupos   -amino libres ninhidrina TNBS OPA    Valoración del protón  método del pH-stato      Medida del descenso del punto de congelación
GRADO DE HIDRÓLISIS Y  CONSUMO  DE BASE
GRADO DE HIDRÓLISIS Y DESCENSO CRIOSCÓPICO Ley límite de Debye-Hückel molalidad de la base molalidad de los péptidos
CINÉTICA DE LA HIDRÓLISIS Sistema WPC – Protex 6L  s 0 =50 g/L  T= 50 ºC  pH=  8.5   Sistema WPC – Protex 6L  e 0 =0.5 g/L  T= 50 ºC  pH=  8.5
CINÉTICA DE LA HIDRÓLISIS modelo cinético nº parámetros 3 4 5 4 2
[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],PRODUCCIÓN DE HIDROLIZADOS ,[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],REACTORES DISCONTINUOS REACTORES DE ENZIMAS INMOVILIZADAS REACTORES DE MEMBRANA
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USO DE HIDROLIZADOS ENZIMÁTICOS DE PROTEÍNAS EN ALIMENTACIÓN Dra. Emilia María Guadix Escobar   Departamento de Ingeniería Química Universidad de Granada

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  • 2. PROCESOS ENZIMÁTICOS Fuente: TIBTECH 2000 (Vol 18)
  • 3. PROTEASAS aspartatoproteasas -COOH (pepsina, quimosina) metaloproteasas Zn cisteínoproteasas -SH (papaína, bromelaína) serinoproteasas -OH ( tripsina, quimotripsina, subtilisina ) más utilizadas en I.A. Subtilisina Tripsina Quimotripsina origen animal vegetal bacteriana fúngica acción catalítica endopeptidasas exopeptidasas carboxipeptidasas aminopeptidasas dipeptidasas
  • 4. REACCIÓN DE HIDRÓLISIS 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 pH +NH3-P-COOH +NH3-P-COO- NH2-P-COO- cambios en pH cambios en osmolaridad
  • 5.
  • 6. SOLUBILIDAD Sistema proteína de soja – Alcalasa J. Adler-Nissen et al. 1986 Sistema caseina – protease V-8 J. Adler-Nissen et al. 1986 J. Adler-Nissen et al. 1986 grado de hidrólisis proteína-enzima pH
  • 7. ADSORCIÓN DE HUMEDAD Sistema proteína de soja–Alcalasa+Flavourzyme. T=22ºC W.D. Chiang et al. 1999 Sistema proteínas del lactosuero – Protex 6 L . T=20ºC P. González-Tello et al. 2000 mejora en textura
  • 8. Actividad emulsificante Poder espumante Sistema proteína de soja. pH=7 J. Adler-Nissen et al. 1986 Sistema proteínas séricas A. Perea et al. 1993
  • 9. Sistema proteína de carne P. Rasmussen et al. 1990 Sistema proteínas séricas–proteasa bacteriana P. Budtz 1992 Condiciones experimentales de reacciones plasteínicas Viscosidad T. Flytkjaer-Hansen et al. 1993
  • 10. M.I. Mahmoud et al. 1992 Propiedades nutricionales grado de hidrólisis alimentos predigeridos favorece la absorción intestinal mejora la digestibilidad sabor amargo disminución de la antigenicidad
  • 11. Productos comerciales propiedades tecnológicas propiedades nutricionales salsas, helados, repostería proteina soluble nutrición infantil y clínica
  • 12.
  • 13. Péptidos bioactivos R. Hartmann & H. Meisel Current Opinion in Biotechnology 2007, 18:163–169
  • 14. H. Meisel. Int. Dairy J. 1998 8: 363-373 Péptidos bioactivos
  • 16. Péptidos Antihipertensivos L. Vercruysse, J. Van Camp, G. Smagghe J. Agric. Food Chem.2005, 53 No. 21
  • 17. Péptidos Antihipertensivos L. Vercruysse, J. Van Camp, G. Smagghe J. Agric. Food Chem.2005, 53 No. 21
  • 18. Péptidos Antihipertensivos J. Agric. Food Chem.2005, 53 No. 21 L. Vercruysse, J. Van Camp, G. Smagghe
  • 19. PEPTIDOS BIOACTIVOS R. Hartmann & H. Meisel Current Opinion in Biotechnology 2007, 18:163–169 Food-derived peptides with biological activity: from research to food applications
  • 22.
  • 23. SUSTRATOS BV : valor biológico , proporción de proteína absorbida para mantenimiento y/o crecimiento D : digestibilidad , porcentaje de proteína retenida NPU : utilización neta de proteína , proporción de proteína ingerida que es retenida PER : eficiencia proteica , relación entre ganancia en peso corporal y peso de proteína consumida   BV D NPU PER Leche 84.5 96.9 81.6 3.09 Caseína 79.7 96.3 72.1 2.86 Lactoalbúmina 82.0 97.0 79.5 3.43 Proteína de soja     61.0   Gluten de trigo     35.0  
  • 24. Proteasas comerciales origen fuente pH T º C enzima
  • 25. PROCESO concentraciónpurificación reactor discontinuo reactor enzimas inmovilizadas reactor de membrana mezclador evaporador equipo de filtración Secadero por atomización hidrólisis secado envasado
  • 26.
  • 27. CONTROL DE LA HIDRÓLISIS Grado de hidrólisis Métodos  Determinación de nitrógeno soluble método Kjeldahl reacción de Biuret  Determinación de los grupos  -amino libres ninhidrina TNBS OPA  Valoración del protón método del pH-stato  Medida del descenso del punto de congelación
  • 28. GRADO DE HIDRÓLISIS Y CONSUMO DE BASE
  • 29. GRADO DE HIDRÓLISIS Y DESCENSO CRIOSCÓPICO Ley límite de Debye-Hückel molalidad de la base molalidad de los péptidos
  • 30. CINÉTICA DE LA HIDRÓLISIS Sistema WPC – Protex 6L s 0 =50 g/L T= 50 ºC pH= 8.5 Sistema WPC – Protex 6L e 0 =0.5 g/L T= 50 ºC pH= 8.5
  • 31. CINÉTICA DE LA HIDRÓLISIS modelo cinético nº parámetros 3 4 5 4 2
  • 32.
  • 33. REACTOR DE MEMBRANA Filtrado M Alimentación Retenido FI FI P f C P f I P s I P s C P e I P e C pHI pHC REACTOR MEMBRANA BOMBA TC
  • 34. actividad enzimática módulo de fibra hueca membrana plana orgánica
  • 35. Capacidad comparada REACTOR CONTINUO DE MEMBRANA
  • 36. USO DE HIDROLIZADOS ENZIMÁTICOS DE PROTEÍNAS EN ALIMENTACIÓN Dra. Emilia María Guadix Escobar Departamento de Ingeniería Química Universidad de Granada