2. OBJETIVOS
Definir biopsia
Señalar los aspectos
generales, características primordiales e
importancia de una biopsia
Describir las principales característicasde los
diferentes tipos de biopsias
Manejar el tejido bajo las normas adecuadas
para su fijación, rotulación y envío.
Interpretar el informe anatomo patológico y
su significado clínico terapéutico.
3. MÉTODOS DE LA
ANATOMÍA PATOLÓGICA
Patología Postmortem. Autopsias
Patología Quirúrgica. Biopsias
Citopatología
Experimental
Otros
4. BIOPSIA
“Método de la anatomía
patológica que estudia los
tejidos obtenidos de pacientes
vivos con fines diagnosticos,
pronósticos y de seguimiento”
5. TIPOS DE BIOPSIA
Incisional Dirigidas
Excisional No dirigidas
De órgano
Total
Parcial
Intraoperatoria
Punción Biopsia
6. TIPOS DE BIOPSIA
Dirigida
Endoscopica
Colposcópica
Dermatoscópica
Estereotaxica
No Dirigida
A ciegas
7. BIOPSIA INCISIONAL
Cuando toma parte de la lesión.
Ej: punch de en lesion extensa de piel
biopsia endoscópica en tumor >2cm
10. BIOPSIA DE ÓRGANO
Consiste en el estudio de materiales obtenidos
durante un acto quirúrgico, generalmente el
material está representado por todo o parte
de un órgano. El procesamiento se realiza en
base a un protocolo pre establecido que indica
pautas que van desde la apertura de la pieza
hasta obtención de muestras representativas.
14. BIOPSIAS DIRIGIDAS
Biopsias endoscópicas: es un tipo de
biopsia dirigida que permite la obtención del
material de órganos huecos ( tubo digestivo,
árbol respiratorio, vias urinarias) o cavidades
(pleural, pericardica, abdominal)
16. BIOPSIAS DIRIGIDAS
Biopsias estereotáxicas: con la ayuda
de métodos imagenológicos se localiza
tridimensionalmente la lesión y se obtiene
tejido. Ej mama y SNC
18. BIOPSIA INTRAOPERATORIA
Es el estudio del material obtenido
durante el acto operatorio para
determinar la naturaleza de la lesión y
emitir un diagnóstico que permita al
cirujano adoptar una conducta quirúrgica
adecuada.
25. BIOPSIA POR PUNCIÓN
Consiste en la obtención de un cilindro de
tejido del órgano afectado, utilizando
agujas especiales de grueso calibre 0.2cm
de diametro.
Se aplica para el diagnóstico de patologías
que afectan a órganos parenquimatosos
en forma difusa (cirrosis hepatica,
glomerulopatias) o localizada solida
(tumor)
El material obtenido se incluye totalmente
y se procesa en forma seriada.
26. BIOPSIA POR PUNCIÓN
Puede realizarse :
A ciegas: sobre el sitio donde se
sospecha que se encuentra la lesión.
Dirigida: mediante aparatos que
permiten visualizar el sitio de punción
(ecografía, TAC) Ej: punción biopsia de
mama con mammotome.
31. PASOS A SEGUIR
Recepción del material: todo el material
ingresado deberá ir acompañado de los datos
personales del paciente, breve resumen de la
Historia clínica, tipo y características, motivo del
estudio solicitado y diagnóstico presuntivo.
Fijación: permite preservar la estructura y
funcion de los tejidos e impedir la autolisis.
Consiste en sumergir el material en una solución
de formol al 10 % en recipiente de boca ancha.
32. PASOS A SEGUIR
Macroscopía: consiste en la inspección del
material y su descripción, lo más semejante a la
realidad, indicando los siguientes aspectos:
ÓRGANOS PARENQUIMATOSOS
Tamaño, color, forma, superficie externa
Peso
Consistencia
Hallazgos
Superficie de corte
34. PASOS A SEGUIR
Existen protocolos de descripción
macroscópica tipo.
Se complementa con la selección de
muestras representativas, lo cual también
está pre-establecido en los protocolos
35. PASOS A SEGUIR
Procesamiento histológico: Los pasos a
seguir son:
– Deshidratación: pases sucesivos en alcohol
96º, acetato (2) y Xilol (2). Permite extraer el
agua de los tejidos.
– Baño e inclusión en parafina
– Corte
– Coloración
36. PASOS A SEGUIR
Diagnóstico: en algunos casos se utilizan
protocolos microscópicos o breves descripciones
microscópicas seguidas por uno o más diagnósticos
que incluirán datos de valor pronóstico y de
orientación terapéutica.
37. INFORME ANATOMOPATOLÓGICO
Debe reunir las siguientes condiciones:
Datos del paciente
Descripción macro y microscópica detallada pero
concreta
Protocolo
Diagnóstico jerarquizado
Debe concretarse a los aspectos relacionados con el
pronóstico y la terapéutica.
38. BIBLIOGRAFÍA
Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El
Ateneo. Bs As .1992
Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía
Patológica. Ed. Doyma.1989.
Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S..
Patología estructural y funcional. 4º Ed.
1990
“Guía de Métodos”. Sánchez Segura, M.;
Nieman Y.;Cátedra de Anatomía
Patológica, Facultad de
Medicina, Universidad Nacional de
Tucumán, 2001.
41. INFORME ANATOMOPATOLÓGICO
Debe reunir las siguientes condiciones:
Datos del paciente
Descripción macro y microscópica detallada pero
concreta
Protocolo
Diagnóstico jerarquizado
Debe concretarse a los aspectos relacionados con el
pronóstico y la terapéutica.
42. BIOPSIA
Técnica de rutina:
Hematoxilina- eosina
Coloraciones especiales:
Giemsa (Helicobacter Pylori)
Azul Alcian (Esófago de Barret)
Ziehl Nielsen (BAAR)
Rojo Congo (Amiloide)
PAS (Hongos)
44. MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
-Alcanza una magnificación de 500.000
aumentos.
-Utiliza un haz de electrones.
-Se enfoca por campos magnéticos sobre
pantalla fluorescente o placas fotográficas.
-Se usa por ej. en patología glomerular
para detectar cambios mínimos en
podocitos,membranas
basales,mesangio, etc.
45. INMUNOFLUORESCENCIA
En tejidos sin fijación.
Usa coloración fluorescente que debe
registrarse microfotograficamente por que
se degrada.
Forma un trípode diagnóstico para las
enfermedades glomerulares con la ME y los
cortes de rutina con H-E, PAS y Tricrómico
47. POLARIZACIÓN
Identifica el carácter birrefringente de
ciertos tipos de depósito fibrilar
colágeno.
Por ejemplo: amiloide
48. INMUNOMARCACIÓN
Consiste en la detección de antígenos
existentes en células o tejidos
Utiliza anticuerpos monoclonales o policlonales
copulados con una enzima (peroxidasa) que
se unen con dicho antígeno.
Se visualiza con microscopía óptica mediante
coloración marrón del núcleo o citoplasma.
51. PATOLOGÍA MOLECULAR
Permite conocer el mecanismo por el
cual se origina una neoplasia.
Aporta información de valor
pronóstico.
Predice en algunos casos la respuesta
a la terapia.
52. VALOR PRONÓSTICO
Cambio cromosómico primario: asociado a los
mecanismos moleculares responsables de la
neoplasia.
Cambio cromosómico secundario: la
enfermedad sigue un curso más agresivo,
haciéndose más resistente a la terapia y difícil de
obtener una remisión completa.
Presencia o ausencia de células normales: La
ausencia indica peor pronóstico.
Presencia de dobles diminutos: confiere mayor
resistencia a la terapia.
53. TÉCNICA DE HIBRIDIZACIÓN IN SITU
(HIS)
Permite detectar y localizar secuencias específicas
de ADN o ARN.
Requiere de una desnaturalización (rotura de los
enlaces) de ADN de la muestra y de la sonda
utilizada.
Hibridación de los ADN de la muestra y la sonda
por complementariedad de bases.
Interpretación microscópica de acuerdo a la sonda
utilizada.
54. TIPOS DE SONDA
Centroméricas: marcan la región centromérica.
Puede valorar la presencia o ausencia de
alteraciones numéricas.
De pintado cromosómico: abarcan todo el
cromosoma. Para alteraciones numéricas y
estructurales en metafase y translocaciones
complejas.
De secuencia única: marcan regiones
cromosómicas muy concretas. Para alteraciones
numéricas y estructurales en metafase e interfase.
55. NUEVAS TÉCNICAS DE
HIS
Multicolor FISH: 24 sondas de marcado
cromosómico marcados con fluorescencia sobre
metafase.
Mulibanding FISH: alteración estructural dentro
de un mismo cromosoma, utiliza células en división.
Hibridación Genómica comparada (HGC):
detecta cambios numéricos de secuencias de ADN
en tumores de índice proliferativo bajo.
59. MICROARRAYS
Son soportes sólidos en los que moléculas de ADN de cadena simple
se fijan y permiten identificar por hibridación la expresión de una
multitud de genes de una muestra biológica.
Aislamiento de ARN de tejido normal y de una muestra de referencia.
Síntesis de ADN y marcaje con dos colorantes fluorescentes (Cy3 y
Cy5).
Hibridación sobre el array.
La diferencia de expresión del ARN entre ambos tejidos se puede
evaluar a partir de la relación Cy3/Cy5 para cada gen.
El análisis nos permite definir el patrón de expresión génica para cada
muestra concreta.
60. MICROARRAYS
Principales aplicaciones:
Clasificación de neoplasias morfológicamente
similares pero con comportamiento biológico
heterogéneo.
Evaluación del pronóstico.
Respuesta al tratamiento.
61. PCR
Preparación y dosaje de ácidos
nucleicos (ADN-ARN) por reacción en
cadena de polimerasa (PCR), técnica
de amplificación in vitro de secuencias
conocidas del genoma, que permite la
detección de deleciones, mutaciones o
rearreglos cromosómicos
63. NO OLVIDAR
Conocer datos clínicos y exámenes complementarios del
paciente.
Seleccionar el tipo de biopsia a realizar según la patología y
órgano afectado.
Envío del material en óptimas condiciones y con los datos
pertinentes.
Fijación y procesamiento adecuados.
Descripción macroscópica.
Diagnósticos microscópicos.
Aspectos relacionados con el pronóstico y terapéutica.
64. BIBLIOGRAFÍA
Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo.
Bs As .1992
Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía
Patológica. Ed. Doyma.1989.
Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología
estructural y funcional. 4º Ed. 1990
XXII Congreso de la SEAP. Curso largo de Patología
Molecular. 2005
XXII Congreso de la SEAP. Aplicaciones
diagnósticas del FISH en Patología. 2005
XXII Congreso de la SEAP. Seminario del club de
Inmunohistoquímica y Patología Molecular. 2005