2. Ensemencement Composition Caractères Résultats
(Technique) recherchés
Isolement par la • extrait de viande 1,0g Ces milieux Certaines colonies
méthode des cadrans. • extrait de levure 2,0g permettent la peuvent avoir des
• peptone 5,0g culture des bactéries couleurs caractéristique.
• chlorure de sodium 5,0g peu exigeantes
• Agar 15,0g
• pH 7.4
Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
3. Ensemencement Composition Caractères Résultats
(Technique) recherchés
• Milieu présenté en Gélose nutritive additionnée Mise en évidence L’hydrolyse de la caséine se
boîte. à 45 °C d’un volume de lait stérile. de l’hydrolyse de traduit par l’apparition
• Faire une strie centrale la caséine, d’une zone claire autour de
à la surface du milieu. protéine du lait. la culture.
• Incuber 24H à 7jours à
la température désirée.
Aspect du milieu Aspect du milieu
Caséinase -
Caséinase +
4. Principe Composition Technique
• Gélose de base : • Ajouter 5 % de sang dans une gélose
• Ce milieu contient des facteurs de croissance Gélose Mueller-Hinton fondue dont la température a été
variés par la présence d’un mélange de ou Gélose Columbia. ramenée aux environs de 45°C.
peptone. C’est un milieu riche. • Ajouter au moment de Bien mélanger.
L’amidon de maïs neutralise les substances l’emploi à la gélose • Porter le tube ou le flacon dans un
toxiques libérées par les cultures. fondue 5 à 10 % de bain-marie dont la température est
• C’est un milieu d’isolement enrichi préconisé sang frais défibriné. voisine de 80°C et l’y maintenir pendant
pour l’étude des Neisseria notamment le 15 minutes.
méningocoque. Il est aussi utilisé pour la • Laisser refroidir aux environs de 45°C.
culture de Haemophilus influenza. Bien homogénéiser et couler en boîtes
de Pétri.
Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
5. Principe Composition Lecture
• Ce milieu contient une base nutritive • Bio-Trypcase 10 S. aureus donne des colonies :
riche. • Extrait de levure 5 - noires
• Il contient des accélérateurs de la • Chlorure de lithium
2 - brillantes, convexes
croissance : le pyruvate de sodium et le • Pyruvate de sodium
glycocolle • Glycocolle 5 - de 1 à 2 mm de diamètre
• Il contient 2 inhibiteurs : le chlorure de • Tellurite de potassium 10 - entourées d'un halo clair.
lithium et le tellurite de potassium. • Emulsion de jaune d'oeuf à 10 % 12
• Il contient 3 critères de différenciation: • Agar 1mL La plupart des autres espèces de
- réduction du tellurite en tellure noir 1mL staphylocoques sont inhibées ou ne
- protéolyse des protéines du jaune pH = 7,2
15 produisent pas de colonies
d'oeuf ⇒ halo clair autour de la colonie
- hydrolyse par une lécithinase des caractéristiques en 24 heures.
lécithines du jaune d'oeuf ⇒ liseré blanc Les microcoques, Bacillus et quelques
opaque autour de la colonie levures peuvent pousser sur ce
lécithine + H20 diglycérides + choline milieu.
Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
6. Intérêt Principe Composition Lecture
Ce milieu facilite la C’est un milieu non sélectif qui est utilisé • Peptone 5g La fermentation du lactose
différenciation des pour l’isolement de nombreuses espèces • Extrait de viande 3g se traduit par le virage du
colonies par le appartenant aux entérobactéries.
• Lactose 10g bromocrésol pourpre à sa
caractère lactose. • C’est un milieu contenant une base
Il inhibe nutritive ordinaire permettant la pousse • Agar 15g teinte acide jaune.
l’envahissement des bactéries non exigeantes. • BCP 0,025g
de la surface de la • Il contient un critère de différenciation : • Eau qsp 1 L Colonies jaunes → bactéries
boite par des la fermentation du lactose révélée par le lactose +
nappes de Proteus virage en milieu acide de l’indicateur Colonies bleues → bactéries
car il ne contient coloré de pH, le bromocrésol pourpre.
pH = 7
pas d'électrolytes. • Il est déficient en électrolytes : absence lactose –
d'ions minéraux.
Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
7. Intérêt Principe Composition Lecture
(en g/L)
Milieu • Ce milieu contient une base nutritive • Bio-Trypcase 17 •Pousse de petites colonies
d'isolement riche grâce aux 2 peptones et à l’extrait •Bio-Thionz 3
sur le milieu →
de levure. •Extrait de levure 5
sélectif des 10 Streptocoques D
• Il contient 2 inhibiteurs : la bile de boeuf •Bile de boeuf
Streptocoques et l’azide de sodium. Ces 2 inhibiteurs •Chlorure de sodium 5
D permettent de sélectionner la culture des •Citrate de sodiu
1 •Colonies entourées d'un
1
(entérocoques streptocoques du groupe D •Esculine 0,5 halo noir → esculine +
et non • Il contient un critère de différenciation : •Citrate de fer 0,25
entérocoques). l’hydrolyse de l’esculine révélée par le •Ammoniacal 13,5
citrate de fer ammoniacal :
Esculine + H2O → Glucose + Esculétine
↓
citrate de fer ammoniacal
Coloration noire
•Les bactéries esculines + présentent des
colonies noires.
• C’est un milieu sélectif des
streptocoques peu exigeants.
Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation
8. Intérêt Principe Composition Lecture
(en g/L)
La gélose au • Ce milieu gélosé est relativement • Peptone 20 • Sur ce milieu de très
cétrimide est pauvre, et contient un antiseptique: le • Sulfate de potassium 10 nombreuses bactéries sont
cétrimide (bromure de N-cétyl-N, N, N- • Chlorure de 3 inhibées de par la présence de
un milieu
triméthylammonium). magnésium l'antiseptique cétrimide, ainsi
sélectif, qui • Ce milieu, proche du milieu King A, • Hydrogénophospate 0,3 que par la présence de
permet favorise aussi la production de pigments de potassium l'antibiotique acide nalidixique
l'isolement des par P.aeruginosa. • Cétrimide 0,2 (inhibiteur de nombreuses
Pseudomonas • Acide nalidixique 0,015 bactéries à Gram négatif).
et notamment • Agar 13 •A 37°C se développent
• Eau distillée (qsp) 1L P.aeruginosa, et éventuellement,
de
P.putida, P.stutzeri et
P.aeruginosa. P.maltophilia.
•A 42°C il y a développement
presque exclusif de P.aeruginosa.
Milieu bleu : pyocyanine
Milieu jaune- vert : pyoverdine
Aspect du milieu avant utilisation Aspect du milieu après utilisation