SlideShare une entreprise Scribd logo
1  sur  14
Télécharger pour lire hors ligne
PCR-SSP
Acadêmicos:
Bruna Campos, Hortência Gomes, Rebeca Furtado, Yuri Guedes
Professora orientadora:
Cláudia Penaforte
Centro Universitário de Belo Horizonte – UNIBH
Faculdade de Medicina
Disciplina: Biologia Molecular
O que é?
• O PCR-SSP é uma abordagem de genotipagem de DNA com base na
utilização de sequências específicas (SSP);
• Consiste de múltiplos iniciadores de PCR específicos para diferentes
polimorfismos genéticos. Exemplo: HLA;
• Várias PCRs são preparadas para cada amostra e os produtos de
amplificação específicos serão produzidos se os iniciadores são
complementares ao DNA da amostra.
Disponível em: <https://www.abbottmolecular.com/technologies/ssp.html>
Material Utilizado
• DNA
• Tampão
• dNTP
• MgCl2
• Primer "específico"
• Taq polimerase
• Termociclador
• Gel de agarose (para correr a eletroforese)
Disponível em: <http://www.jbn.org.br/audiencia_pdf.asp?aid2=777&nomeArquivo=19-04-06.pdf>
Aplicação
• Análise de polimorfismos únicos de nucleotídeos (SNPs);
• Principalmente para determinar antígenos HLA (que são altamente
polimórficos);
• Teste de compatibilidade entre doadores e receptores em transplantes;
• Farmacogenética;
• Diagnóstico de doenças.
Disponível em: <http://www.jbn.org.br/audiencia_pdf.asp?aid2=777&nomeArquivo=19-04-06.pdf>
HLA
• Sistema do HLA  Antígenos HLA;
• Importância no estudo da rejeição de órgãos;
• Defesa imunológica;
• Existem várias proteínas do sistema imune que estão associadas ao HLA:
MHC-I, MHC-II, Citocinas, Interleucinas, Interferons.
Disponível em: <http://www.jbn.org.br/audiencia_pdf.asp?aid2=777&nomeArquivo=19-04-06.pdf>
Processo PCR-SSP
• Colocar o DNA em diferentes tubos contendo dois primers PCR;
• Um dos primers hibridiza uma região conservada do locus HLA, sendo adicionado a
todos os tubos;
• O segundo primer hibridiza com uma região polimórfica do locus HLA;
*cada tubo contem um primer de especificidade diferente.
• A amplificação do DNA só será observada no tubo contendo o segundo primer
específico que corresponde ao alelo (alta resolução) ou ao grupo de alelos (baixa
resolução) do HLA na amostra do DNA;
• Eletroforese em gel de agarose.
Disponível em: <http://www.grupouninter.com.br/revistasaude/index.php/saudeDesenvolvimento/article/view/220>
Disponível em: <http://www.slideshare.net/jmgrigg/organ-transplantation-and-the-hla-system-lecture-28091691>
Disponível em: <http://www.slideshare.net/jmgrigg/organ-transplantation-and-the-hla-system-lecture-28091691>
Disponível em: <http://www.slideshare.net/jmgrigg/organ-transplantation-and-the-hla-system-lecture-28091691>
Disponível em: <http://www.slideshare.net/jmgrigg/organ-transplantation-and-the-hla-system-lecture-28091691>
Vantagens
• Diagnóstico precoce de doenças;
• Em um único teste, mais de um polimorfismo pode ser identificado;
• Mais eficiente que o teste de sorologia;
• Fácil e rápida execução.
Disponível em: <www.scielo.br/pdf/rbhh/v31n4/aop5509.pdf>
Desvantagens
• Baixa resolução (grupos de alelos);
• Contaminação;
• Uso do gel de agarose limita o tamanho do fragmento;
• Requer habilidade técnica;
• Alto custo do equipamento.
Disponível em: <http://www.moreirajr.com.br/revistas.asp?fase=r003&id_materia=4499>
Referências
• https://www.abbottmolecular.com/technologies/ssp.html, acesso em junho, 2015.
• http://www.grupouninter.com.br/revistasaude/index.php/saudeDesenvolvimento/article/view/2
20, acesso em junho, 2015.
• http://www.jbn.org.br/audiencia_pdf.asp?aid2=777&nomeArquivo=19-04-06.pdf, acesso em
junho, 2015.
• http://www.moreirajr.com.br/revistas.asp?fase=r003&id_materia=4499, acesso em junho, 2015.
• http://www.scielo.br/pdf/rbhh/v31n4/aop5509.pdf, acesso em junho, 2015.
• http://www.slideshare.net/jmgrigg/organ-transplantation-and-the-hla-system-lecture-28091691,
acesso em junho, 2015.
Agradecemos a atenção!

Contenu connexe

Tendances

Tecnologia do DNA recombinante
Tecnologia do DNA recombinanteTecnologia do DNA recombinante
Tecnologia do DNA recombinanteShaline Araújo
 
Marcadores moleculares em plantas
Marcadores moleculares em plantasMarcadores moleculares em plantas
Marcadores moleculares em plantasUERGS
 
Plasmídeos- Genética Bacteriana
Plasmídeos- Genética BacterianaPlasmídeos- Genética Bacteriana
Plasmídeos- Genética BacterianaHemilly Rayanne
 
Aula de Engenharia Genética sobre PCR
Aula de Engenharia Genética sobre PCRAula de Engenharia Genética sobre PCR
Aula de Engenharia Genética sobre PCRJaqueline Almeida
 
Membrana e transporte
Membrana e transporteMembrana e transporte
Membrana e transporteDaiane Costa
 
Biomol mt bom
Biomol mt bomBiomol mt bom
Biomol mt bomJac Costa
 
Microbiologia: meios de cultura e provas de identificação
Microbiologia: meios de cultura e provas de identificaçãoMicrobiologia: meios de cultura e provas de identificação
Microbiologia: meios de cultura e provas de identificaçãoJoão Marcos
 
Imunodiagnóstico de doenças infecciosas
Imunodiagnóstico de doenças infecciosasImunodiagnóstico de doenças infecciosas
Imunodiagnóstico de doenças infecciosasSandra Lago Moraes
 
Sistema imune
Sistema imuneSistema imune
Sistema imuneemanuel
 
Apresentacao eritroblastose fetal
Apresentacao eritroblastose fetalApresentacao eritroblastose fetal
Apresentacao eritroblastose fetalFernanda Marinho
 
Recombinação genetica
Recombinação geneticaRecombinação genetica
Recombinação geneticaUERGS
 
Introdução de tecnicas de diagnostico molecular
Introdução de tecnicas de diagnostico molecular Introdução de tecnicas de diagnostico molecular
Introdução de tecnicas de diagnostico molecular Safia Naser
 
Como é feito o Exame de DNA?
Como é feito o Exame de DNA?Como é feito o Exame de DNA?
Como é feito o Exame de DNA?Gabriel Negreira
 

Tendances (20)

Tecnologia do DNA recombinante
Tecnologia do DNA recombinanteTecnologia do DNA recombinante
Tecnologia do DNA recombinante
 
MARCADORES_MOLECULARES.pptx
MARCADORES_MOLECULARES.pptxMARCADORES_MOLECULARES.pptx
MARCADORES_MOLECULARES.pptx
 
Aula 7 mi..(1)
Aula 7 mi..(1)Aula 7 mi..(1)
Aula 7 mi..(1)
 
Marcadores moleculares em plantas
Marcadores moleculares em plantasMarcadores moleculares em plantas
Marcadores moleculares em plantas
 
Imunodiagnóstico
ImunodiagnósticoImunodiagnóstico
Imunodiagnóstico
 
Imunidade humoral
Imunidade humoralImunidade humoral
Imunidade humoral
 
Plasmídeos- Genética Bacteriana
Plasmídeos- Genética BacterianaPlasmídeos- Genética Bacteriana
Plasmídeos- Genética Bacteriana
 
Aula de Engenharia Genética sobre PCR
Aula de Engenharia Genética sobre PCRAula de Engenharia Genética sobre PCR
Aula de Engenharia Genética sobre PCR
 
Membrana e transporte
Membrana e transporteMembrana e transporte
Membrana e transporte
 
Biomol mt bom
Biomol mt bomBiomol mt bom
Biomol mt bom
 
Microbiologia: meios de cultura e provas de identificação
Microbiologia: meios de cultura e provas de identificaçãoMicrobiologia: meios de cultura e provas de identificação
Microbiologia: meios de cultura e provas de identificação
 
Imunodiagnóstico de doenças infecciosas
Imunodiagnóstico de doenças infecciosasImunodiagnóstico de doenças infecciosas
Imunodiagnóstico de doenças infecciosas
 
Sistema imune
Sistema imuneSistema imune
Sistema imune
 
Apresentação tipagem sanguinea
Apresentação tipagem sanguineaApresentação tipagem sanguinea
Apresentação tipagem sanguinea
 
Livro vapor
Livro vaporLivro vapor
Livro vapor
 
Apresentacao eritroblastose fetal
Apresentacao eritroblastose fetalApresentacao eritroblastose fetal
Apresentacao eritroblastose fetal
 
Sistema ABO
Sistema ABOSistema ABO
Sistema ABO
 
Recombinação genetica
Recombinação geneticaRecombinação genetica
Recombinação genetica
 
Introdução de tecnicas de diagnostico molecular
Introdução de tecnicas de diagnostico molecular Introdução de tecnicas de diagnostico molecular
Introdução de tecnicas de diagnostico molecular
 
Como é feito o Exame de DNA?
Como é feito o Exame de DNA?Como é feito o Exame de DNA?
Como é feito o Exame de DNA?
 

En vedette (20)

Tecnicas moleculares en el estudio de hla
Tecnicas moleculares en el estudio de hlaTecnicas moleculares en el estudio de hla
Tecnicas moleculares en el estudio de hla
 
HLA Tipificación_Marcelo Pando
HLA Tipificación_Marcelo PandoHLA Tipificación_Marcelo Pando
HLA Tipificación_Marcelo Pando
 
Imunologia do transplante
Imunologia do transplanteImunologia do transplante
Imunologia do transplante
 
Imunologia dos Transplantes
Imunologia dos TransplantesImunologia dos Transplantes
Imunologia dos Transplantes
 
Apresentação seminário transplantes
Apresentação seminário transplantesApresentação seminário transplantes
Apresentação seminário transplantes
 
Transplantes
TransplantesTransplantes
Transplantes
 
Pcr
PcrPcr
Pcr
 
transposon mediated mutagenesis
transposon mediated mutagenesistransposon mediated mutagenesis
transposon mediated mutagenesis
 
PCR 1
PCR 1PCR 1
PCR 1
 
Pcr
Pcr Pcr
Pcr
 
Apresentação doação de órgãos
Apresentação doação de órgãosApresentação doação de órgãos
Apresentação doação de órgãos
 
Organ transplantation and the hla system lecture
Organ transplantation and the hla system lectureOrgan transplantation and the hla system lecture
Organ transplantation and the hla system lecture
 
transplante de orgãos
transplante de orgãostransplante de orgãos
transplante de orgãos
 
Doação de Orgãos e Transplante
Doação de Orgãos e TransplanteDoação de Orgãos e Transplante
Doação de Orgãos e Transplante
 
Pcr
PcrPcr
Pcr
 
Principle of PCR
Principle of PCR Principle of PCR
Principle of PCR
 
PCR
PCRPCR
PCR
 
doação de órgãos
doação de órgãosdoação de órgãos
doação de órgãos
 
Aula Sobre Tx Abto
Aula Sobre Tx AbtoAula Sobre Tx Abto
Aula Sobre Tx Abto
 
Transplantes Renais parte 2
Transplantes Renais parte 2Transplantes Renais parte 2
Transplantes Renais parte 2
 

Similaire à PCR SSP

Polimorfismos de nucleotídeos únicos em espécies poliplóides.ppt
Polimorfismos de nucleotídeos únicos em espécies poliplóides.pptPolimorfismos de nucleotídeos únicos em espécies poliplóides.ppt
Polimorfismos de nucleotídeos únicos em espécies poliplóides.pptCarlosWeslley1
 
Dna invest criminal-pcr-electroforese(dn-afingerprint)
Dna invest criminal-pcr-electroforese(dn-afingerprint)Dna invest criminal-pcr-electroforese(dn-afingerprint)
Dna invest criminal-pcr-electroforese(dn-afingerprint)Madalena_Bio12
 
Técnicas de análise de proteinas
Técnicas de análise de proteinasTécnicas de análise de proteinas
Técnicas de análise de proteinasPatrícia Kellen
 
Exames realizados na área de Genética Médica
Exames realizados na área de Genética MédicaExames realizados na área de Genética Médica
Exames realizados na área de Genética MédicaUniversidade de Brasília
 
Biologia forense e suas áreas auxiliares.
Biologia forense e suas áreas auxiliares.Biologia forense e suas áreas auxiliares.
Biologia forense e suas áreas auxiliares.Danieli Simões
 
Minicurso 2 - "Metodologias Inovadoras para ensaios diagnósticos"
Minicurso 2 - "Metodologias Inovadoras para ensaios diagnósticos"Minicurso 2 - "Metodologias Inovadoras para ensaios diagnósticos"
Minicurso 2 - "Metodologias Inovadoras para ensaios diagnósticos"JOFARUFPR
 
2004 hepatite colestática associada ao vírus da hepatite c pós transplante he...
2004 hepatite colestática associada ao vírus da hepatite c pós transplante he...2004 hepatite colestática associada ao vírus da hepatite c pós transplante he...
2004 hepatite colestática associada ao vírus da hepatite c pós transplante he...Nádia Elizabeth Barbosa Villas Bôas
 
2 metodos moleculares_em_farmacogenetica
2 metodos moleculares_em_farmacogenetica2 metodos moleculares_em_farmacogenetica
2 metodos moleculares_em_farmacogeneticaJ. Lima
 
Aula introducaoatecnicasdediagnosticomolecular3-120325153120-phpapp02
Aula introducaoatecnicasdediagnosticomolecular3-120325153120-phpapp02Aula introducaoatecnicasdediagnosticomolecular3-120325153120-phpapp02
Aula introducaoatecnicasdediagnosticomolecular3-120325153120-phpapp02Leriaagro
 
Expressão heteróloga
Expressão heterólogaExpressão heteróloga
Expressão heterólogaIvson Cassiano
 
D na invest-criminal-pcr-electroforese(dnafinferprint)
D na invest-criminal-pcr-electroforese(dnafinferprint)D na invest-criminal-pcr-electroforese(dnafinferprint)
D na invest-criminal-pcr-electroforese(dnafinferprint)Madalena_Bio12
 
Principios basicos-de-biologia-molecular
Principios basicos-de-biologia-molecularPrincipios basicos-de-biologia-molecular
Principios basicos-de-biologia-molecularFacebook
 
Marcadores moleculares
Marcadores molecularesMarcadores moleculares
Marcadores moleculareswagnerjudice
 
Engenharia Genética - Prof. Ana Paula Christ
Engenharia Genética - Prof. Ana Paula ChristEngenharia Genética - Prof. Ana Paula Christ
Engenharia Genética - Prof. Ana Paula ChristAna Paula Christ
 

Similaire à PCR SSP (20)

Biologia molecular
Biologia molecularBiologia molecular
Biologia molecular
 
Polimorfismos de nucleotídeos únicos em espécies poliplóides.ppt
Polimorfismos de nucleotídeos únicos em espécies poliplóides.pptPolimorfismos de nucleotídeos únicos em espécies poliplóides.ppt
Polimorfismos de nucleotídeos únicos em espécies poliplóides.ppt
 
Dna invest criminal-pcr-electroforese(dn-afingerprint)
Dna invest criminal-pcr-electroforese(dn-afingerprint)Dna invest criminal-pcr-electroforese(dn-afingerprint)
Dna invest criminal-pcr-electroforese(dn-afingerprint)
 
Técnicas de análise de proteinas
Técnicas de análise de proteinasTécnicas de análise de proteinas
Técnicas de análise de proteinas
 
Exames realizados na área de Genética Médica
Exames realizados na área de Genética MédicaExames realizados na área de Genética Médica
Exames realizados na área de Genética Médica
 
Técnicas1
Técnicas1Técnicas1
Técnicas1
 
Biologia forense e suas áreas auxiliares.
Biologia forense e suas áreas auxiliares.Biologia forense e suas áreas auxiliares.
Biologia forense e suas áreas auxiliares.
 
Manipulação do dna & clonagem
Manipulação do dna & clonagemManipulação do dna & clonagem
Manipulação do dna & clonagem
 
Minicurso 2 - "Metodologias Inovadoras para ensaios diagnósticos"
Minicurso 2 - "Metodologias Inovadoras para ensaios diagnósticos"Minicurso 2 - "Metodologias Inovadoras para ensaios diagnósticos"
Minicurso 2 - "Metodologias Inovadoras para ensaios diagnósticos"
 
Aula1 controle qualidade
Aula1 controle qualidadeAula1 controle qualidade
Aula1 controle qualidade
 
2004 hepatite colestática associada ao vírus da hepatite c pós transplante he...
2004 hepatite colestática associada ao vírus da hepatite c pós transplante he...2004 hepatite colestática associada ao vírus da hepatite c pós transplante he...
2004 hepatite colestática associada ao vírus da hepatite c pós transplante he...
 
2 metodos moleculares_em_farmacogenetica
2 metodos moleculares_em_farmacogenetica2 metodos moleculares_em_farmacogenetica
2 metodos moleculares_em_farmacogenetica
 
Aula introducaoatecnicasdediagnosticomolecular3-120325153120-phpapp02
Aula introducaoatecnicasdediagnosticomolecular3-120325153120-phpapp02Aula introducaoatecnicasdediagnosticomolecular3-120325153120-phpapp02
Aula introducaoatecnicasdediagnosticomolecular3-120325153120-phpapp02
 
Expressão heteróloga
Expressão heterólogaExpressão heteróloga
Expressão heteróloga
 
D na invest-criminal-pcr-electroforese(dnafinferprint)
D na invest-criminal-pcr-electroforese(dnafinferprint)D na invest-criminal-pcr-electroforese(dnafinferprint)
D na invest-criminal-pcr-electroforese(dnafinferprint)
 
Artigo p53 2
Artigo p53 2Artigo p53 2
Artigo p53 2
 
Principios basicos-de-biologia-molecular
Principios basicos-de-biologia-molecularPrincipios basicos-de-biologia-molecular
Principios basicos-de-biologia-molecular
 
Marcadores moleculares
Marcadores molecularesMarcadores moleculares
Marcadores moleculares
 
Engenharia Genética - Prof. Ana Paula Christ
Engenharia Genética - Prof. Ana Paula ChristEngenharia Genética - Prof. Ana Paula Christ
Engenharia Genética - Prof. Ana Paula Christ
 
Monografia
MonografiaMonografia
Monografia
 

Plus de Hortencia Gomes da Silveira

Plus de Hortencia Gomes da Silveira (8)

Difilobotríase
DifilobotríaseDifilobotríase
Difilobotríase
 
Malária e Febre Amarela
Malária e Febre AmarelaMalária e Febre Amarela
Malária e Febre Amarela
 
Memória e Aprendizado
Memória e AprendizadoMemória e Aprendizado
Memória e Aprendizado
 
Clostridium botulinum
Clostridium botulinumClostridium botulinum
Clostridium botulinum
 
INFLUÊNCIA DA MUSCULATURA ABDOMINAL E DA PRESSÃO INTRA-ABDOMINAL NA ESTABILIZ...
INFLUÊNCIA DA MUSCULATURA ABDOMINAL E DA PRESSÃO INTRA-ABDOMINAL NA ESTABILIZ...INFLUÊNCIA DA MUSCULATURA ABDOMINAL E DA PRESSÃO INTRA-ABDOMINAL NA ESTABILIZ...
INFLUÊNCIA DA MUSCULATURA ABDOMINAL E DA PRESSÃO INTRA-ABDOMINAL NA ESTABILIZ...
 
Epidermodisplasia Verruciforme, Pênfigo e Epidermólise Bolhosa
Epidermodisplasia Verruciforme, Pênfigo e Epidermólise BolhosaEpidermodisplasia Verruciforme, Pênfigo e Epidermólise Bolhosa
Epidermodisplasia Verruciforme, Pênfigo e Epidermólise Bolhosa
 
É o médico brasileiro o responsável pela falência do sistema de saúde público?
É o médico brasileiro o responsável pela falência do sistema de saúde público?É o médico brasileiro o responsável pela falência do sistema de saúde público?
É o médico brasileiro o responsável pela falência do sistema de saúde público?
 
Aspectos históricos da execução da pena de morte
Aspectos históricos da execução da pena de morteAspectos históricos da execução da pena de morte
Aspectos históricos da execução da pena de morte
 

PCR SSP

  • 1. PCR-SSP Acadêmicos: Bruna Campos, Hortência Gomes, Rebeca Furtado, Yuri Guedes Professora orientadora: Cláudia Penaforte Centro Universitário de Belo Horizonte – UNIBH Faculdade de Medicina Disciplina: Biologia Molecular
  • 2. O que é? • O PCR-SSP é uma abordagem de genotipagem de DNA com base na utilização de sequências específicas (SSP); • Consiste de múltiplos iniciadores de PCR específicos para diferentes polimorfismos genéticos. Exemplo: HLA; • Várias PCRs são preparadas para cada amostra e os produtos de amplificação específicos serão produzidos se os iniciadores são complementares ao DNA da amostra. Disponível em: <https://www.abbottmolecular.com/technologies/ssp.html>
  • 3. Material Utilizado • DNA • Tampão • dNTP • MgCl2 • Primer "específico" • Taq polimerase • Termociclador • Gel de agarose (para correr a eletroforese) Disponível em: <http://www.jbn.org.br/audiencia_pdf.asp?aid2=777&nomeArquivo=19-04-06.pdf>
  • 4. Aplicação • Análise de polimorfismos únicos de nucleotídeos (SNPs); • Principalmente para determinar antígenos HLA (que são altamente polimórficos); • Teste de compatibilidade entre doadores e receptores em transplantes; • Farmacogenética; • Diagnóstico de doenças. Disponível em: <http://www.jbn.org.br/audiencia_pdf.asp?aid2=777&nomeArquivo=19-04-06.pdf>
  • 5. HLA • Sistema do HLA  Antígenos HLA; • Importância no estudo da rejeição de órgãos; • Defesa imunológica; • Existem várias proteínas do sistema imune que estão associadas ao HLA: MHC-I, MHC-II, Citocinas, Interleucinas, Interferons. Disponível em: <http://www.jbn.org.br/audiencia_pdf.asp?aid2=777&nomeArquivo=19-04-06.pdf>
  • 6. Processo PCR-SSP • Colocar o DNA em diferentes tubos contendo dois primers PCR; • Um dos primers hibridiza uma região conservada do locus HLA, sendo adicionado a todos os tubos; • O segundo primer hibridiza com uma região polimórfica do locus HLA; *cada tubo contem um primer de especificidade diferente. • A amplificação do DNA só será observada no tubo contendo o segundo primer específico que corresponde ao alelo (alta resolução) ou ao grupo de alelos (baixa resolução) do HLA na amostra do DNA; • Eletroforese em gel de agarose. Disponível em: <http://www.grupouninter.com.br/revistasaude/index.php/saudeDesenvolvimento/article/view/220>
  • 11. Vantagens • Diagnóstico precoce de doenças; • Em um único teste, mais de um polimorfismo pode ser identificado; • Mais eficiente que o teste de sorologia; • Fácil e rápida execução. Disponível em: <www.scielo.br/pdf/rbhh/v31n4/aop5509.pdf>
  • 12. Desvantagens • Baixa resolução (grupos de alelos); • Contaminação; • Uso do gel de agarose limita o tamanho do fragmento; • Requer habilidade técnica; • Alto custo do equipamento. Disponível em: <http://www.moreirajr.com.br/revistas.asp?fase=r003&id_materia=4499>
  • 13. Referências • https://www.abbottmolecular.com/technologies/ssp.html, acesso em junho, 2015. • http://www.grupouninter.com.br/revistasaude/index.php/saudeDesenvolvimento/article/view/2 20, acesso em junho, 2015. • http://www.jbn.org.br/audiencia_pdf.asp?aid2=777&nomeArquivo=19-04-06.pdf, acesso em junho, 2015. • http://www.moreirajr.com.br/revistas.asp?fase=r003&id_materia=4499, acesso em junho, 2015. • http://www.scielo.br/pdf/rbhh/v31n4/aop5509.pdf, acesso em junho, 2015. • http://www.slideshare.net/jmgrigg/organ-transplantation-and-the-hla-system-lecture-28091691, acesso em junho, 2015.