Presentación realizada por Pilar Giraldo en el Seminario Biomédico impartido el día 20 de octubre de 2011 en Zaragoza. El Seminario lleva por título Patologías de depósito lisosomal: la enfermedad de Gaucher como sistema modelo.
Patologías de depósito lisosomal: la enfermedad de Gaucher como sistema modelo. Pilar Giraldo
1. Patologías de depósito lisosomal:
la enfermedad de Gaucher
como sistema modelo.
Pilar Giraldo
2. Pilar Giraldo
Sº de Hematología.
Hospital Universitario Miguel Servet
Unidad de Investigación Traslacional
Hospital Universitario Miguel Servet
Centro de Investigación Biomédica en
Red de Enfermedades Raras
CIBERER
FEETEG
11. 1997. Diputación General de Aragón: REF: PCM 1094
1997. Fondo de Investigación Sanitaria. FIS 97/0527
REGISTRO ESPAÑOL DE ENFERMEDAD DE GAUCHER
2011
Está sometido a la normativa legal y registrado con el nº 1971180032.
Acreditación de calidad según las Normas ISO2000-9001 Num. EC2751/07.
Pilar Giraldo
12. MAPA DE LAS CARACTERISTICAS CLINICAS, GENETICAS
DE LA EG EN PENINSULA IBERICA
Periodo de estudio: 1993-2010
92
Total 442
Registro Español de EG
Edad media al diagnóstico 26.3±19.8 a
Género: mujer 47.74 %, varón: 47.98%
Vivos: 90.4 % (tipo 1); 31.0% (tipo 3); 0% (tipo 2) FEETEG
Giraldo P et al, 2011.
13. De la información recogida en el Registro Español
de la Enfermedad, conocemos que
de los 357 casos registrados desde 1993
Tipos
Registro Español de EG
1
2 25: 7,6%
3
313: 87,6% 19: 5,1%
%
FEETEG
14. Enfermedad de Gaucher tipo 1
Edad al diagnóstico 3ªdécada
Portadores de N370S 87,6 %
Visceromegalias 95,6 %
Enfermedad ósea 70,4 %
Enfermedad de Parkinson 8,1 %
Neuropatía periférica 10,9 %
Déficit de vitamina B12 13,2 %
Gammapatías mono/policlon 42,3 %
Depósitos férricos aumentados 28,8 %
Sin tratamiento 20,1 %
Esplenectomía 28,1 %
Cirugía ortopédica 27,5 %
FEETEG
15. J Hum Genet. 2007;52:391-6.
Mutation analysis and genotype/phenotype relationships of
Gaucher disease patients in Spain.
Alfonso P, Aznarez S, Giralt M, Pocovi M, Giraldo P; Spanish
Gaucher's Disease Registry.
Splicing
Missense IVS4-2A>G
V15M S364R
G113E N370S Rec alleles
Rec ex5-...10
76 mutaciones
M123T G377S
R120W P391L Rec complete gen
RecNciI + c.1263-1317del55
diferentes en
R131C R395C
T134P N396T RecNciI
Delection/insertions
España
P182L V398I
D409H c.42-65 del 24
N188S
L444P c.84insG
G195W
R463C c.225-227delTAC
G202R
R496H c.500insT
R257Q
c.953delT
P266L
Nonsense c.1214-1215delGC
W312R
W(-4)X c.1263-1317del55
Y313H
R47X c.1439-1445del7
E326K*
R163X c.1451delAC
G325W
R257X c.1510-1513delTCT (465delS)
L336P
S364N R359X Others
c.(-203)A>G
Pilar Giraldo
17. Clin Genet 2011 In Press
Gaucher disease: Frequency analysis of the N370S and L444P mutations
in the Spanish population using pyrosequencing
Beatriz García-Rodríguez, Pilar Alfonso, Miguel Mallén, Miguel Pocoví,
Pilar Giraldo
Pilar Giraldo
20. Qual Life Res. 2005 Mar;14(2):453-62.
Quality of life related to type 1 Gaucher disease:
Spanish experience.
Giraldo P, Solano V, Pérez-Calvo JI, Giralt M, Rubio-
Félix D; Spanish Group on Gaucher disease.
100
90
80
70
60
50
40 Spanish Population
30 Before ERT
20 After 24 m ERT
10
0
PF RF Pain GH Vit SP ER MH
Pilar Giraldo
21. Enfermedad de Gaucher
Durante dos décadas de tratamiento enzimático hemos
comprobado el beneficio que proporciona a muchos
pacientes.
Sin embargo, persisten necesidades no satisfechas
195 pacientes
Weinreb N. Am J Hematol 2008
22. Enfermedad de Gaucher
La enfermedad de Gaucher tipo 1, (90-95%) se ha
considerado como enfermedad sin síntomas neurológicos.
Sin embargo se ha demostrado insistentemente que existe
una asociación con la enfermedad de Parkinson.
También hay mayor frecuencia de neuropatía periférica.
Pilar Giraldo
23. Med Clin (Barc). 2008;131:175-9.
[Neurological manifestations in patients with
Gaucher disease and in their relatives]
Giraldo P, Capablo JL, Alfonso P, Latre P, García
Pacientes EG tipo 1 B, Pocoví M; Grupo Español sobre Enfermedad
de Gaucher.
30 (32,6%)
Portadores de EG
36 (13,5%)
Pilar Giraldo
24. GLUCOCEREBROSIDASE GENE MUTATIONS AND RISK OF PARKINSON´S DISEASE IN
THE SPANISH POPULATION
García-Rodríguez B, Alfonso P, Capablo JL, Mallén M, Latre P, Pérez I, Giraldo P, Pocoví M.
García-Rodríguez B. Tesis Doctoral 2010
Pilar Giraldo
26. Otros genes
Variante c.(-203)A>G en el promotor
Genotipo Edad E ósea E neurológica E visceral
dx
[N370S]+[ IVS4-2a>g;c.(-203)A>G]
45 Avanzada E Parkinson SI
55 No E Parkinson NO
3 No NO SI
6 Avanzada NO SI
3 NO NO SI
5m NO Tipo 2 SI
Alfonso P et al Clin Chim Acta. 2011
FEETEG
27. Enfermedad de Gaucher
La afectación ósea es
una manifestación
importante y contribuye a
intensificar el
dolor y disminuir la
calidad de vida.
Pilar Giraldo
28. M. Roca, J. Mota, P. Alfonso, M. Pocoví, P. Giraldo
S-MRI score: A simple method for assessing bone marrow involvement in Gaucher
disease. Eur J Radiol. 2007, 62:132-7
….Three MRI patterns and
punctuation in each location were
defined: normal, 0; non-
homogeneous infiltration subtypes
reticular, 1; mottled, 2; diffuse, 3; and
homogeneous infiltration, 4. This
score was called Spanish-MRI (S-
MRI). It is a simple method that
provides useful information to
evaluate bone infiltration and detect
silent complications.
Pilar Giraldo
29. Enfermedad de Gaucher
Ocasionalmente se produce
infiltración pulmonar y
raramente hipertensión
pulmonar.
Hipertensión portal. Se asocia,
en algunos casos, con el
síndrome hepatopulmonar e
invariablemente con
esplenectomía.
Pilar Giraldo
30. Enfermedad de Gaucher
Otras complicaciones de la enfermedad de Gaucher son las
proliferaciones neoplásicas de la línea linfoide B y el mieloma múltiple,
y ocasionalmente la amiloidosis.
Se especula que es esto sea consecuencia de la activación constante
del sistema inmune.
Pilar Giraldo
33. 2003 Gene-Activated® Human Glucocerebrosidase (GA-GCB)
Velaglucerasa (VPRIV®) TKT/Shire. 2011
La velaglucerasa alfa
contiene glicanos con alto
contenido en manosa de
cadenas más largas que la
imiglucerasa
La internalización de
proteínas por endocitosis
depende en gran medida
de su contenido en
carbohidratos
Brumshtein B, et al. Characterization of gene-activated human acid-β-glucosidase: Crystal structure,
glycan composition, y internalization into macrophages. Glycobiology 2010;20:24−32. Image reproduced
Brumshtein B, et al. Glycobiology 2010;20:24−32.
con permission from Oxford Journals.
34. Resumen de los ensayos clínicos con
velaglucerasa alfa
Ensayo Fase/ Duración Criterios de inclusión Dosis (cada dos Diseño del Esplenecto-
clínico tipo semanas) estudio mía basal
TKT0251 I/II 9 meses Naïve o no tratados 60 unidades/kg Abierto No
durante12 meses, adultos
(n = 12)
TKT0322 III 12 meses Naïve o no tratados 45 ó 60 unidades/kg Doble ciego, No
durante 30 meses, ≥2 aleatorizado 1:1
años (n = 25)
HGT-GCB- III 9 meses Naïve o no tratados 60 unidades/kg Doble ciego, Sí o no
0393 durante12 meses, ≥2 velaglucerasa alfa o aleatorizado 1:1
años (n = 35) imiglucerasa
TKT0344 III 12 meses Transición, ≥2 años 15−60 unidades/kg Abierto Sí o no
(n = 41)
TKT025EXT5 I/II EXT En marcha n = 10 (del TKT025) 30−60 unidades/kg Abierto No
≥18 años
HGT-GCB- III EXT En marcha n = 102 (delTKT032, 15−60 unidades/kg Abierto Sí o no
0446 TKT034 y HGT-GCB-039)
HGT-GCB- Acceso En marcha >2 años Hasta 60 unidades/kg Abierto Sí o no
0584,7 expandido
(PEI)
PEI: Producto en fase de investigación clínica
1. Zimran A, et al. Blood 2010;115:4651–6. 4. Grabowski G, et al. Poster presented at ACMG 2010. 5. Zimran A, et al. Poster presented at LDN 2010.
2. Zimran A, et al. Poster presented at LDN 2010. 6. ClinicalTrials.gov 2010: NCT00635427. 7. ClinicalTrials.gov 2010:NCT00954460.
3. Ben Turkia H, et al. Poster presented at ASHG 2010.
37. Evolución de los biomarcadores
Actividad Quitotriosidasa
5
Mean % change (±SE)
0
–5 Media del porcentaje de cambio: –28.1%
–10
–15
–20
–25
–30
–35
Baseline 13 25 37 53
n=26* n=25 n=25 n=25 n=25
Concentración CCL-18 Study Week
5
Mean % change (±SE)
0
Media del porcentaje de cambio: –16.4%
–5
–10
–15
–20
–25
–30
Baseline 13 25 37 53
n=40 n=39 n=39 n=38 n=37
Study Week
* Fourteen patients were deficient in chitotriosidase activity at baseline 37
38. 2006. taliglucerase alfa
Plant Cell Expressed Recombinant Human Glucocerebrosidase
enzyme for Gaucher disease*
Protalix desarrolla tecnología
dirigida a fabricar proteínas en el
compartimento celular vegetal
deseado, mediante control del
patrón de glicosilación
Consigue patrones de
glicosilación biologicamente
activos.
No precisa realizar
modificaciones posteriores en la
glicosilación.
Pilar Giraldo
39. Tecnología del Bioreactor
Bioreactor de cálulas de mamífero Bioreactor de cálulas vegetales
Vertical Scale-Up - Caro, requiere reactores más Escala horizontal-Up - Barato, bolsas desechables en
grandes.- Incoorporar un nuevo equipo, precisa salas limpias
cumplimentar toda la normativa reguladora. - No hay nuevos equipos, es más de lo mismo
Pilar Giraldo
44. Tratamiento por reducción de sustrato
Sphingomyelin Ceramide Galactosylceramide
Miglustat
( Zavesca ® ) Glucosylceramide sintasa
Glucosylceramide
Ganglio - series Lacto (neo) - series Globo - series
iminosugar obtained from
leaves of Morus alba
Pharmacological
Chaperones
44
Lisbon 29-30 January 2010
45. Efecto chaperona de Miglustat sobre
transfectantes estables en células COS 7
11,00
10,00
9,00
8,00
7,00
6,00
5,00
4,00
3,00
2,00
1,00
0,00
WT L444P M123T P266L L336P COS7-transfected cells
N370S V15M S364R 465delSer
45
Alfonso P et al. BCMD 2005