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17/10/2013

Laboratório de Microbiologia

• Especialidade

Configuração

• Material a ser manipulado
• Comercial ou acadêmico
• Pesquisa ou ensino

NB-1

Níveis de biossegurança

Agentes conhecidos e bem caracterizados
Não provocam doenças em humanos (ex.: E. coli não patogênica,
hepatite canina, bactérias não infecciosas em geral)

NB-2
Agentes de risco moderado
Treinamento
Cabines de segurança biológica

Risco mínimo ao pessoal de laboratório e meio ambiente

Necessário símbolo de risco biológico com informações

Laboratório não precisa estar separado do prédio

Barreiras primárias – além das CSB, máscaras e óculos de
proteção; Jaleco e touca – permanecem sempre no laboratório

Trabalhos na bancada – BPL
Barreiras primárias – jaleco, luvas, óculos
Barreiras secundárias – porta, pia, fácil limpeza, telas contra
insetos

Barreiras secundárias – Pias acionadas com os pés; distante de
áreas públicas, trancas para dependências que abrigam agentes
restritos; lava-olhos;
Hepatites, influenza A, dengue, Salmonella, OGMs

NB-3

Agentes causadores de doenças sérias ou potencialmente fatais como
resultado de exposição por inalação
Acesso ao laboratório deve ser limitado
Materiais devem ser descartados apenas após descontaminação
Imunização e exames periódicos para o pessoal do lab
Elaboração de manual de biossegurança específico
Barreiras primárias – além das CSB, máscaras e óculos de proteção; Jaleco
e touca – permanecem sempre no laboratório
Barreiras secundárias – NB2 + dupla porta; sala de troca de roupas; pia
perto da saída sem acionamento manual; janelas lacradas; CSB longe das
portas; sistema de ventilação próprio; ar da CSB deve ser filtrado pelo
HEPA, podendo recircular; filtração com HEPA (high efficiency particulate
arresting) do ar exaurido, dependendo da condição

Leishmania donovani, Mycobacterium tuberculosis, Bacillus anthracis

1
17/10/2013

NB-4

Agentes de alto risco de infecção letal onde vacinas e outros tratamentos
estão indisponíveis – ex. Ebola e febres hemorrágicas
Pessoal extremamente bem trinado
Acesso rigorosamente controlado
Edifício isolado ou sala totalmente isolada do restante
Manual específico de operações para as instalações
Manipulação em CBS classes II ou III e roupa de proteção com pressão
positiva
Características específicas projetadas para evitar disseminação no meio
ambiente
Saída do pessoal apenas depois da troca de roupa e uso de chuveiro
Uso de roupas descartáveis

EPI

EPI
• Luvas látex

• Luvas térmicas

• Óculos

• Jaleco

• Máscaras (filtro / UV)

2
17/10/2013

Chuveiro lava olhos

Equipamentos

Microscópios

Estereoscópio (lupa)

3
17/10/2013

• Proteção pessoal
• Proteção do ensaio/produto
• Proteção do meio-ambiente

Cabines de segurança biológica
Classe I – Exaustão total; sem proteção do protudo; similar à
capela

Classe II – Porcentagem do ar é re-circulado na cabine (tipos
A, B1, B2 e B3)

4
17/10/2013

Cabines de segurança biológica
Classe III - Isolamento

Estufa incubadora

Câmara ou sala de crescimento

Freezer e ultrafreezer

Chapa aquecedora
com rotor magnético

Agitador tipo “vortex”

Balanças

5
17/10/2013

Autoclaves

Estufas

• 121°C, 15psi, 20 a 30 minutos
Esterilização

Banhos

Secagem

Centrífugas

• Temperatura constante
• Incubações
• Água destilada

Agitador orbital

Contador de colônias

Termociclador

6
17/10/2013

Aparato para eletroforese

Transiluminador UV

Aparato para
fotodocumentação

Destiladores
• Água “pura”

Vidraria e outros materiais

Becker

Balão volumétrico
Proveta

Vidro borossilicato

Cadinho e pistilo

Erlenmeyer

7
17/10/2013

Placas de Petri

Tubos de cultura

Frascos de Roux

Estantes

Dessecador

Pipetas

8
17/10/2013

Pipetas automáticas

Pipetas Pasteur

• Uso de ponteiras descartáveis – rapidez
• Precisão – volumes menores
• P10 (1 a 10 µl) , P200 (10 a 200 µl), P1000 (200 a 1000 µl)

Pisseta

Placas tipo ELISA

Barrilete

9
17/10/2013

Bastão de vidro

Espátula ou alça deDrigalsky

Cabo de Kolle e alça de platina

Funil

Aparatos de filtragem

Lâmina e lamínula

Frascos
conta-gotas

Bico de bunsen

Links
http://www.bionewsonline.com/pub/pub5.htm
http://www.angelfire.com/mi/nccc/lnotes.html
http://www.microbeworld.org/index.php

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Níveis de biossegurança em laboratório de microbiologia

  • 1. 17/10/2013 Laboratório de Microbiologia • Especialidade Configuração • Material a ser manipulado • Comercial ou acadêmico • Pesquisa ou ensino NB-1 Níveis de biossegurança Agentes conhecidos e bem caracterizados Não provocam doenças em humanos (ex.: E. coli não patogênica, hepatite canina, bactérias não infecciosas em geral) NB-2 Agentes de risco moderado Treinamento Cabines de segurança biológica Risco mínimo ao pessoal de laboratório e meio ambiente Necessário símbolo de risco biológico com informações Laboratório não precisa estar separado do prédio Barreiras primárias – além das CSB, máscaras e óculos de proteção; Jaleco e touca – permanecem sempre no laboratório Trabalhos na bancada – BPL Barreiras primárias – jaleco, luvas, óculos Barreiras secundárias – porta, pia, fácil limpeza, telas contra insetos Barreiras secundárias – Pias acionadas com os pés; distante de áreas públicas, trancas para dependências que abrigam agentes restritos; lava-olhos; Hepatites, influenza A, dengue, Salmonella, OGMs NB-3 Agentes causadores de doenças sérias ou potencialmente fatais como resultado de exposição por inalação Acesso ao laboratório deve ser limitado Materiais devem ser descartados apenas após descontaminação Imunização e exames periódicos para o pessoal do lab Elaboração de manual de biossegurança específico Barreiras primárias – além das CSB, máscaras e óculos de proteção; Jaleco e touca – permanecem sempre no laboratório Barreiras secundárias – NB2 + dupla porta; sala de troca de roupas; pia perto da saída sem acionamento manual; janelas lacradas; CSB longe das portas; sistema de ventilação próprio; ar da CSB deve ser filtrado pelo HEPA, podendo recircular; filtração com HEPA (high efficiency particulate arresting) do ar exaurido, dependendo da condição Leishmania donovani, Mycobacterium tuberculosis, Bacillus anthracis 1
  • 2. 17/10/2013 NB-4 Agentes de alto risco de infecção letal onde vacinas e outros tratamentos estão indisponíveis – ex. Ebola e febres hemorrágicas Pessoal extremamente bem trinado Acesso rigorosamente controlado Edifício isolado ou sala totalmente isolada do restante Manual específico de operações para as instalações Manipulação em CBS classes II ou III e roupa de proteção com pressão positiva Características específicas projetadas para evitar disseminação no meio ambiente Saída do pessoal apenas depois da troca de roupa e uso de chuveiro Uso de roupas descartáveis EPI EPI • Luvas látex • Luvas térmicas • Óculos • Jaleco • Máscaras (filtro / UV) 2
  • 4. 17/10/2013 • Proteção pessoal • Proteção do ensaio/produto • Proteção do meio-ambiente Cabines de segurança biológica Classe I – Exaustão total; sem proteção do protudo; similar à capela Classe II – Porcentagem do ar é re-circulado na cabine (tipos A, B1, B2 e B3) 4
  • 5. 17/10/2013 Cabines de segurança biológica Classe III - Isolamento Estufa incubadora Câmara ou sala de crescimento Freezer e ultrafreezer Chapa aquecedora com rotor magnético Agitador tipo “vortex” Balanças 5
  • 6. 17/10/2013 Autoclaves Estufas • 121°C, 15psi, 20 a 30 minutos Esterilização Banhos Secagem Centrífugas • Temperatura constante • Incubações • Água destilada Agitador orbital Contador de colônias Termociclador 6
  • 7. 17/10/2013 Aparato para eletroforese Transiluminador UV Aparato para fotodocumentação Destiladores • Água “pura” Vidraria e outros materiais Becker Balão volumétrico Proveta Vidro borossilicato Cadinho e pistilo Erlenmeyer 7
  • 8. 17/10/2013 Placas de Petri Tubos de cultura Frascos de Roux Estantes Dessecador Pipetas 8
  • 9. 17/10/2013 Pipetas automáticas Pipetas Pasteur • Uso de ponteiras descartáveis – rapidez • Precisão – volumes menores • P10 (1 a 10 µl) , P200 (10 a 200 µl), P1000 (200 a 1000 µl) Pisseta Placas tipo ELISA Barrilete 9
  • 10. 17/10/2013 Bastão de vidro Espátula ou alça deDrigalsky Cabo de Kolle e alça de platina Funil Aparatos de filtragem Lâmina e lamínula Frascos conta-gotas Bico de bunsen Links http://www.bionewsonline.com/pub/pub5.htm http://www.angelfire.com/mi/nccc/lnotes.html http://www.microbeworld.org/index.php 10