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EDUCACIÓN CONTINUADA EN EL LABORATORIO CLÍNICO

                                                                          Ed Cont Lab Clín 2006;9:49-56




LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO
Santiago Rodríguez-Segade Villamarín
Laboratorio Central, Hospital Clínico Universitario, Santiago de Compostela


INTRODUCCIÓN

El líquido cefalorraquídeo es una solución             existen muy pocas células         en   el   líquido
compleja producida por las células que revisten        cefalorraquídeo normal.
los plexos coroideos y por las células
ependimales que revisten las superficies
ventriculares. En el adulto, el volumen total oscila   OBTENCIÓN DEL LÍQUIDO
entre 90 y 150 mL, la mitad intracraneal y la otra     CEFALORRAQUÍDEO
mitad intraespinal. En el recién nacido estas cifras
oscilan entre 10 y 60 mL. En el adulto cada día se     Frecuentemente el líquido cefalorraquídeo se
producen aproximadamente unos 500 mL de                obtiene por punción lumbar. El procedimiento, que
líquido cefalorraquídeo (20 mL/h), con un              ha de realizar un médico, implica un daño
recambio aproximado de unas tres veces por día.        potencial para el paciente. Las indicaciones para
En     condiciones      normales,     el    líquido    una punción lumbar son las siguientes:
cefalorraquídeo está bajo una presión de 7 a 15
mm Hg.                                                 -   el diagnóstico de la meningitis (bacteriana,
                                                           fúngica, micobacteriana y amébica),
El líquido cefalorraquídeo tiene cuatro funciones      -   el diagnóstico de hemorragia (subaracnoidea,
principales: (1) es un amortiguador mecánico que           intracerebral e infarto cerebral),
impide traumas, (2) regula el volumen de los           -   el diagnóstico de enfermedades neurológicas,
contenidos intracraneales, (3) es un medio                 tales cómo: esclerosis múltiple, enfermedades
nutriente del sistema nervioso central, y (4) es un        desmielinizantes y el síndrome de Guillain-
canal excretor para productos metabólicos del              Barré,
sistema nervioso central.                              -   el diagnóstico y evaluación de una sospecha
                                                           de malignidad, tal como leucemia, linfoma y
El líquido cefalorraquídeo, se diferencia de los           carcinoma metastásico
fluídos serosos y sinoviales, en la permeabilidad      -   la introducción de fármacos, medios de
selectiva de las membranas y tejidos adyacentes.           contraste radiográficos y anestésicos.
Esto se denomina barrera hematoencefálica.
Consecuentemente, el líquido cefalorraquídeo no        En pacientes con una presión intracraneal
es un ultrafiltrado del plasma. Existe por tanto, un   aumentada, el mayor riesgo de la punción lumbar
transporte activo entre la sangre, líquido             es la parálisis o muerte debido a una hernia
cefalorraquídeo y cerebro, en ambas direcciones,       tonsilar. También existe riesgo de infección por la
lo que da lugar a que existan concentraciones          realización del procedimiento.
diferentes de sustancias en cada lugar.
                                                       Una vez que se lleva a cabo una limpieza
Muchos fármacos no pasan al líquido                    adecuada de la piel, se anestesia tópicamente y
cefalorraquídeo desde la sangre. Electrolitos          se inserta un catéter en la zona lumbar en el
cómo el sodio, magnesio y cloruro están más            espacio L3-4 o L4-5. Al realizar la punción, se
concentrados en el líquido cefalorraquídeo que en      mide manométricamente la presión de apertura.
el plasma, mientras que el bicarbonato, glucosa y      El volumen de la muestra obtenida, va desde
urea están menos concentrados. Las proteínas           unos pocos mL en un niño a 10-20 mL en un
sólo pasan al líquido cefalorraquídeo en               adulto. En la Tabla 1, se presenta la lista de
cantidades muy pequeñas. Por otra parte, sólo          pruebas que se solicitan frecuentemente.
50                                                                S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo




 Bioquímica general (volumen: 0,5 a 1,0 mL)
 Glucosa
 Proteínas
 Albúmina

 Inmunoquímica (volumen: > 2 mL)
 Cuantificación de inmunoglobulinas totales
 Perfil electroforético de proteínas
 Bandas oligoclonales
 Inmunofijación

 Microbiología (volumen > 2 mL)
 Tinción rápida: Gram, tinta china, bacilos ácidorresistentes
 Aglutinación látex: análisis de bacterias corrientes
 Cultivo: bacterias (anaeróbico, aeróbico), virus, micobacterias, hongos
 Reacción en cadena de la polimersa (PCR): algunos organismos virales (virus del herpes simple), tuberculosis
 VDRL: neurosífilis

 Hematología (volumen: 0,5-1,0 mL)
 Recuentos celulares
 Evaluación leucemia / linfoma

 Citopatología (volumen: 2 a 4 mL)
 Evaluación de células malignas


                     Tabla 1. Recogida de líquido cefalorraquídeo para pruebas frecuentes.


La investigación del líquido cefalorraquídeo puede        compararse al lado de un tubo con agua frente a
realizarse para evaluar marcadores específicos            una hoja de papel limpia y blanca.
de una enfermedad, o bien para descartar
enfermedades neurológicas, en particular la               Turbidez. La turbidez, es el resultado de la
enfermedad infecciosa. Típicamente, el líquido se         presencia de leucocitos en cantidades elevadas
recoge en una serie de tres o cuatro tubos                (recuento de leucocitos superior a 200 /µL), o bien
estériles, numerados del 1 al 4. Puesto que antes         de la existencia de bacterias, o de un incremento
de alcanzar el espacio subaracnoideo se lesiona           en las proteínas o en los lípidos. Si se ha
algún vaso sanguíneo y estructuras de tejido              inyectado medio de contraste radiográfico, el
blando, es adecuado descartar una pequeña                 líquido aparece aceitoso y si se agita aparece
cantidad de líquido cefalorraquídeo antes de              turbio. Esta falsa turbidez no se informa.
iniciar la recogida del líquido cefalorraquídeo. En
cualquier caso, el primer tubo suele estar                Coágulos. Los coágulos pueden ser el resultado
contaminado con algo de sangre periférica y otros         de un aumento del fibrinógeno por una punción
elementos, y aunque suele utilizarse para las             traumática. Raramente, los coágulos pueden
determinaciones bioquímicas o serológicas, no se          deberse a un bloqueo subaracnoideo o a una
debe utilizar para una evaluación microbiológica.         meningitis.
Los recuentos hematológicos suelen hacerse en
el primer y cuarto tubo, para comparar los dos por        Color. Un líquido sanguinolento puede deberse a
si existe una punción traumática.                         una punción traumática o a una hemorragia
                                                          subaracnoidea. Si la sangre del espécimen se
                                                          debe a una punción traumática, los sucesivos
EXAMEN: EVALUACIÓN DE LOS                                 tubos de recogida son cada vez menos
COMPONENTES                                               hemorrágicos y los últimos casi claros. Si la
                                                          sangre del espécimen se debe a una hemorragia
Apariencia                                                subaracnoidea, el color del líquido será igual en
                                                          todos los tubos y presentará xantocromía.
El líquido cefalorraquídeo es claro e incoloro
como el cristal. Se asemeja al agua destilada. El         Xantocromía. Consiste en la presencia de un
color y la claridad del tubo de la muestra debe           color pálido (naranja o amarillo) en el
                                                          sobrenadante. Entre 1 y 4 horas después de la
S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo                                                            51



hemorragia subaracnoidea empieza a tener lugar           Normalmente no existen eritrocitos en el líquido
la liberación de hemoglobina desde los eritrocitos       cefalorraquídeo. El valor de referencia de
hemolizados. Una xantocromía rosa pálido o               leucocitos en líquido cefalorraquídeo es de 0 a
naranja pálido se debe a la liberación de                5/µL. Más de 10/µL se considera patológico. Si el
oxihemoglobina y alcanza el máximo entre 24 y            predominio de las células es polinuclear, indica
36 horas, desapareciendo de forma gradual en 4-          generalmente una infección bacteriana, mientras
8 días. Hay que tener en cuenta, que la hemólisis        que la presencia de células mononucleares indica
tiene lugar tanto in vivo cómo in vitro, por tanto la    una infección viral.
valoración de la xantocromía debe de hacerse en
la primera hora después de la obtención del
líquido cefalorraquídeo para evitar resultados           Examen morfológico
falso-positivos.
                                                         Cuando el recuento celular es superior a 30
Si la hemorragia es antigua, el líquido                  leucocitos/µL, debe hacerse un recuento
sobrenadante muestra una xantocromía amarilla.           diferencial de células. El mejor método es utilizar
El color amarillo se debe a la bilirrubina que se        una preparación citocentrifugada. Con éste
forma a partir de la hemoglobina de los eritrocitos      método, la fracción celular del líquido se
lisados. Aparece a las 12 horas de un episodio           concentra y posteriormente se tiñe con colorante
hemorrágico, alcanza el máximo en 2-4 días y             de Wright o con otros colorantes para estudios
desaparece luego de forma gradual en 2-4                 citológicos. Si no se dispone de citocentrifuga, se
semanas. Cuando la concentración de proteínas            centrífuga el líquido cefalorraquídeo a 3.000 rpm
es superior a 1,5 g/L, se puede observar un color        durante 5 minutos en una centrífuga normal y se
similar al color del suero o el plasma.                  hace un frotis con el sedimento. Se seca
                                                         rápidamente y se tiñe con colorante de Wright. La
Finalmente, la hemorragia subaracnoidea se               recuperación de células no es tan buena cómo en
asocia con la observación microscópica de                el caso de la citocentrifuga, además las células
eritrofagia, es decir, la ingestión de eritrocitos por   tienden a distorsionarse o dañarse.
macrófagos.
                                                         Independientemente del método de concentración,
                                                         se cuentan 100 células y se da el porcentaje de
Recuentos de eritrocitos y leucocitos                    cada tipo celular. En algunos casos, las células se
                                                         identifican    sólo    cómo     polinucleares     o
De forma general, para los líquidos corporales no        mononucleares. Con la citocentrifugación la
se utilizan los recuentos electrónicos, ya que           identificación es más específica. Cualquiera de
estos instrumentos no están estandarizados para          las células de la sangre pueden identificarse en el
recuentos tan bajos como los que se ven en el            líquido cefalorraquídeo. También pueden verse
líquido    cefalorraquídeo.    Además      existen       células originales del sistema nervioso central,
problemas      derivados    de    la   viscosidad        tales cómo células coroidales, ependimales y
(especialmente los líquidos articulares), de la          otras células mesoteliales. Si se encuentran
variación en el tamaño celular (especialmente            células tumorales o células poco usuales deben
cuando están presentes células tumorales) y de           de remitirse para un examen citológico.
residuos (que generalmente son más elevados
que las células).
                                                         Examen bioquímico
Ya que frecuentemente estos líquidos suelen
estar     contaminados  por   microorganismos            Glucosa
patógenos, hay que ser cuidadosos para evitar la
contaminación, especialmente con las pipetas de          La concentración de glucosa en el líquido
dilución y con las cámaras de recuento. Las              cefalorraquídeo es un reflejo de la concentración
cámaras deben de desinfectarse antes de su               en suero, ya que deriva del mismo por transporte
utilización.                                             a través de los plexos coroideos y también
                                                         depende de la utilización intracraneal. De forma
Si el líquido cefalorraquídeo es de apariencia           general, la concentración de glucosa es
clara, el recuento de células debe de hacerse sin        aproximadamente un 50-75 % de la concentración
utilizar líquido de dilución. El recuento ha de          en suero. Para una evaluación adecuada de la
hacerse lo más rápido posible, ya que las células        concentración de glucosa en el líquido
se lisan si se prolonga el tiempo de                     cefalorraquídeo, debe de valorarse paralelamente
procesamiento. Lo adecuado, es realizar los              la concentración de glucosa en suero, para evitar
recuentos en los 30 primeros minutos después de          errores de interpretación en casos de
la obtención del espécimen.                              hipoglucemia o de hiperglucemia.
52                                                            S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo



Aunque no es un indicador sensible, una               específicas: transferrina e inmunoglobulinas. Los
glucorraquia reducida puede verse en una              geles pueden explorarse por densitometría y
meningitis infecciosa (bacteriana, tuberculosa o      calcular la concentración de proteínas en las
fúngica), una meningitis neoplásica y una             bandas. Alternativamente, puede determinarse la
hemorragia subaracnoidea (Tabla 2). En general,       concentración de estas proteínas individuales.
se considera que la reducción se debe a la mayor
utilización por las células inflamatorias y por el    Evaluación de la barrera hematoencefálica.
parénquima cerebral adyacente, más que por los        Puede utilizarse clínicamente la concentración
organismos microbianos.                               diferencial  de    proteínas    en    el   líquido
                                                      cefalorraquídeo y en el suero. La integridad de la
                                                      barrera hematoencefálica puede valorarse
Proteínas                                             calculando el índice de la albúmina en líquido
                                                      cefalorraquídeo y suero.
Al igual que en el suero, existe en el líquido
cefalorraquídeo una variedad de proteínas en                              albúmina LCR x 1000
diversas concentraciones: prealbúmina, albúmina,      Índice albúmina = ------------------------------------
α2-macroglobulina,     fibrinógeno,   transferrina,                            albúmina suero
ceruloplasmina e inmunoglobulinas. La mayoría
de estas proteínas, derivan de la sangre y se         Un índice albúmina de 9 es consistente con una
transportan al líquido cefalorraquídeo. Otras         barrera hematoencefálica intacta, si oscila entre 9
proteínas son sintetizadas de novo por las células    y 14 indica un ligero compromiso de la barrera
epiteliales de los plexos coroideos. Típicamente,     hematoencefálica, de 14 a 30 un compromiso
la medida de las proteínas totales en líquido         moderado y de 30 a 100 un compromiso severo.
cefalorraquídeo se hace junto con una medida de       En niños, el índice está elevado hasta
proteínas totales en suero. Aunque algo               aproximadamente los 6 meses de edad.
inespecífico, la elevación de la proteinorraquia
puede indicar o bien una ruptura de la barrera        Síntesis intratecal de inmunoglobulinas. Para las
hematoencefálica o bien una síntesis intratecal       inmunoglobulinas en general, o bien para IgG o
elevada de inmunoglobulinas. Esto último es de        IgM específicas frente a un antígeno         (por
gran significado cuando se quiere hacer el            ejemplo, el virus herpes simplex), pueden
diagnóstico de una enfermedad infecciosa o            realizarse los siguientes cálculos:
inflamatoria que implica al sistema nervioso
central y diferenciarlo de una participación                            IgG líquido cefalorraquídeo
sistémica.                                            Índice IgG =     ---------------------------------------
                                                                                    IgG suero
En adultos, las proteínas totales en el líquido
cefalorraquídeo oscilan entre 0,15 y 0,45 g/L,        Un índice IgG mayor de 0,003 es consistente con
pueden llegar hasta 1,50 g/L en recién nacidos y      una síntesis intratecal elevada de inmuno-
hasta 4 g/L en niños prematuros.                      globulinas. Sin embargo, este cociente no tiene
                                                      en cuenta la filtración de la barrera hemato-
La electroforesis de proteínas permite la             encefálica. Para evitar esto, se calcula el índice
evaluación de las proteínas que se encuentran en      IgG/albúmina.
concentraciones elevadas. El líquido cefalo-
rraquídeo se distingue del suero en la presencia                             IgG LCR /IgG suero
de una banda de prealbúmina prominente y dos          IgG/albúmina= ---------------------------------------------
bandas de transferrina (una de las cuales es la                       Albúmina LCR /albúmina suero
forma desializada, conocida cómo proteína tau y
se debe a la presencia de neuraminidasa) (Figura      Con este cálculo, al incorporar la concentración
1). Esta técnica, también puede identificar la        de albúmina, se corrige la pérdida de proteínas
presencia     de    “bandas   oligoclonales”    de    por la barrera hematoencefálica. El intervalo de
inmunoglobulinas. Para descartar la posibilidad de    referencia habitual es de 0,3 a 0,7. Se considera
que las proteínas reflejen una producción             que un índice IgG mayor de 0,7 es consistente
sistémica, debe hacerse en paralelo una               con una síntesis intratecal aumentada de
electroforesis en suero.                              inmunoglobulinas.

Si se quiere caracterizar de forma más sensible
una población de proteínas, debe realizarse una
inmunofijación con identificación de proteínas
S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo                                                                    53




    Figura 1. Bandas oligoclonales en la esclerosis múltiple. A: suero del paciente, B: líquido cefalorraquídeo del
 paciente. C: control con una gammapatía monoclonal. El líquido cefalorraquídeo del paciente contiene dos bandas
distintas que no aparecen en el suero. Se observa una banda prominente de prealbúmina. La banda de transferrina,
representa la transferrina desializada, también llamada proteína tau y β2-transferrina, es de mayor densidad y migra
    hacia la región gamma, hecho característico del líquido cefalorraquídeo. La pequeña cantidad de transferrina
                                 dializada apenas se observa en este gel de agarosa.

En individuos normales, la velocidad diaria de              transferrina), mientras que prácticamente no se
síntesis de IgG puede calcularse utilizando la              detecta en las secreciones serosas: nasales,
fórmula de Tourtelotte, que tiene en cuenta los             saliva, lágrimas y sudor.
cocientes    del   suero     frente   al  líquido
cefalorraquídeo, de la IgG y la albúmina, el                Debe de analizarse paralelamente el suero, por si
volumen de líquido cefalorraquídeo formado en 24            el paciente presenta esta variante genética
horas que es de 0,5 L y que el cociente de masa             anómala en sangre o bien si consume grandes
molar albúmina/IgG es de 0,43:                              cantidades de alcohol, ya que en esta
                                                            circunstancia aumenta en sangre la fracción
Síntesis IgG = 0,5 L/día x [(IgGLCR – IgGs/369) –           desializada de la transferrina.
(AlbLCR – Albs/230)] x [(IgGs / Albs) x 0,43]

Un valor de síntesis de IgG superior a 8 mg/día             Examen microbiológico
(para algunos autores es de 3,5), se interpreta
cómo una tasa de síntesis intratecal aumentada.             Una evaluación rápida puede realizarse utilizando
                                                            pruebas de aglutinación en látex, para causas
                                                            bacterianas corrientes de meningitis y para
Detección de extravasación                                  infecciones por Cryptococcus. También pueden
                                                            realizarse cultivos bacterianos (aeróbicos y
Ocasionalmente, surge la cuestión de un escape              anaeróbicos), fúngicos y víricos. Otros exámenes,
de líquido cefalorraquídeo y se plantea el                  tales cómo cultivos de micobacterias, evaluación
diagnóstico diferencial con posibles secreciones            de la PCR para tuberculosis y entidades víricas
de los lagrimales y glándulas serosas. Para                 (por ejemplo, virus Epstein-Barr) y evaluación
distinguir estos dos líquidos, puede evaluarse el           serológica para anticuerpos frente a especies de
líquido recogido de la cavidad nasal o de otros             Borrelia.
lugares.

El líquido cefalorraquídeo es rico en la isoforma
desializada de la transferrina (proteína tau, β2-
54                                                            S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo



El ensayo VDRL es una prueba serológica bien           Esclerosis múltiple
conocida para la sífilis y que se realiza en el
líquido cefalorraquídeo. Sin embargo, puede ser        En la mayoría de los pacientes con esclerosis
negativa en el 40 – 50 % de los casos. La prueba       múltiple se observa un índice IgG / albúmina
fluorescente de absorción del anticuerpo               mayor de 0,27, un índice IgG mayor de 0,7 y una
treponémico es más sensible pero menos                 tasa de síntesis de IgG mayor de 8. La
específica.                                            sensibilidad es elevada en pacientes clasificados
                                                       clínicamente como esclerosis múltiple “definitiva”,
PATOLOGÍA                                              pero es más baja en pacientes con esclerosis
                                                       múltiple “posible”.
Meningitis
                                                       Para el diagnóstico de esclerosis múltiple se hace
Los neutrófilos son un indicador significativo de      un estudio de bandas oligoclonales por
meningitis bacteriana, sin embargo también             electroforesis. Para descartar la posibilidad de
aparecen precozmente en una infección fúngica.         que el paciente tenga una gammapatía
Por otra parte, los linfocitos pueden estar            monoclonal que aparecería en el líquido
elevados junto con los neutrófilos en el escenario     cefalorraquídeo, debe realizarse paralelamente un
de una meningitis bacteriana aguda.                    proteinograma en suero. En el 75 al 90 % de los
                                                       pacientes se identifican dos o más bandas
Las isoenzimas 4 y 5 de la lactato                     oligloconales. Al comienzo de la enfermedad
deshidrogenasa se encuentran elevadas en el            pueden no encontrarse bandas oligoclonales, y en
líquido cefalorraquídeo en el caso de una              algunos pacientes el número de bandas puede
meningitis bacteriana, debido a su producción por      aumentar con el tiempo.
los granulocitos; mientras que en la meningitis
vírica pueden observarse elevaciones de las
isoenzimas 1 y 2 debido a su producción en los         Tumor pineal o hipotalámico
linfocitos.
                                                       En el escenario de un tumor pineal con o sin un
La concentración de lactato en líquido                 tumor       hipotalámico      concomitante,      y
cefalorraquídeo aumenta en la meningitis               particularmente si es un niño, el diagnóstico
bacteriana, pero típicamente no lo hace en las         diferencial incluye un tumor germinal. Si la α-
meningitis víricas o asépticas.                        fetoproteína o la gonadotropina coriónica en suero
                                                       no están claramente elevadas, es de interés su
                                                       determinación en el líquido cefalorraquídeo para
Encefalitis viral                                      descartar claramente un tumor germinal.

A diferencia de la meningitis,      donde la mayor
parte del proceso infeccioso y       de la respuesta   Enfermedad de Creutzfeldt-Jacob
inflamatoria asociada se limita a   las meninges, en
la encefalitis hay además             afectación del   En el diagnóstico de la demencia, el uso de la
parénquima cerebral.                                   evaluación de la proteína 14-3-3 en el líquido
                                                       cefalorraquídeo se ha considerado útil para
La amplificación por PCR de los ácidos nucleicos       confirmar o rechazar el diagnóstico de enfermedad
virales se ha convertido en el procedimiento           de Creutzfeldt-Jacob. Concentraciones elevadas de
diagnóstico de elección para muchos tipos de           esta proteína neuronal se ha encontrado que
encefalitis viral. Así, un resultado negativo del      correlacionan razonablemente bien con el
virus del herpes simple mediante PCR excluye el        desarrollo de la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob.
diagnóstico de encefalitis por virus del herpes
simple, a menos que la prueba se haya realizado        Sin embargo, elevaciones de la proteína 14-3-3
en una fase muy avanzada de la enfermedad.             en líquido cefalorraquídeo también están
Con otros virus los resultados son menos claros.       presentes en casos de infarto y encefalitis y
Sin embargo, la PCR es hoy día la prueba               ocasionalmente en pacientes con enfermedad de
diagnóstica principal para las infecciones del         Alzheimer, demencia fronto-temporal, enfermedad
sistema nervioso central producidas por                de Lewy y meningitis carcinomatosa, de tal forma
citomegalovirus, virus Epstein-Barr, virus varicela    que la interpretación debe hacerse con cautela.
zoster y enterovirus.
Escenario                  Presión         Apariencia           RBC           PMN        Mononucleares        Glucosa      Proteínas (g/L)              Otros
                                                                      2             2                2
                           (cm H2O)                            (/mm )        (/mm )           (/mm )           (mmol/L)

Normal                       7-20        Claro, incoloro         0              0              0-5             2.7-4.4        0.15-0.45

 Meningitis bacteriana      Na↑          Nublado, turbio         N          ↑↑ (>100)           ↑               ↓ o ↓↓          ↑ a ↑↑        Aglutinaciones bacterias,
aguda                                                                                                                          (0.5-10)                cultivo

Meningitis vírica           Na↑         Usualmente claro       Na↑            Na↑              a ↑↑           Normal             ↑                  Cultivo, PCR
                                                                                            (10 -300)                          (0.4-2)

Meningitis fúngica          Na↑        Claro a opalescente       N            Na↑               a ↑↑             ↓            ↑ a ↑↑             Aglutinación para
                                                                                             (30-300)                          (0.5-7)             cryptococcus
                                                                                                                                                                              S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo




Meningitis tuberculosa      Na↑        Claro a opalescente       N            Na↑               a ↑↑             ↓            ↑ a ↑↑                Cultivo, PCR
                                           +/- coágluos                                      (50-500)                          (0.6-7)

Neurosífilis                  N               Claro              N            Na↑             N a ↑↑              N           ↑ al inicio      FTA, VDRL; +/- bandas
                                                                                             (0-500)                          N al final            oligoclonales

Esclerosis múltiple           N               Claro              N             N            ↑ (5-100)             N             Na↑           +/- bandas oligoclonales

Meningitis neoplásica       Na↑       Claro a xantocrómico       N             N              Na↑               No↓             Na↓          Citología, citometría de flujo

Punción traumática            N          Hemorrágica,                    ↑ eritrocitos/leucocitos                 N             Na↑            Eritrocitos reducidos en
                                       sobrenadante claro            (mismo cociente que en sangre)                                              tubo 4 frente tubo 1

 Hemorragia                   ↑           Hemorrágica,                   ↑ eritrocitos/leucocitos               No↓               ↑             Número de eritrocitos
subaracnoidea                             xantocrómico                (cociente reducido vs sangre)                           (0.5-1.0)         similar en los 4 tubos



 Tabla 2. Características del líquido cefalorraquídeo en diferentes procesos patológicos. RBC, red blood cell (eritrocitos); PMN, polimorfonucleares; PCR, reacción en
                                                                cadena de la polimerasa. (según Boyer).
                                                                                                                                                                              55
56                                                           S. Rodríguez-Segade. Lïquido cefalorraquídeo



Hemorragia subaracnoidea                              de referencia de glutamina en líquido
                                                      cefalorraquídeo es de 0,3 a 1,4 mmol/L,
En la evaluación del líquido cefalorraquídeo en       concentraciones superiores a 2,45 mmol/L casi
algunos pacientes con hemorragia subaracnoidea        siempre se asocian con síntomas de
es muy importante el diagnóstico diferencial con      encefalopatía metabólica. El coma hepático
una punción traumática. Aparte de lo ya indicado,     puede verse con concentraciones entre 1,75 y
se ha demostrado que la cuantificación                6,65 mmol//L.
espectrométrica de productos de la degradación
de la hemoglobina es una herramienta útil para el     Las concentraciones de glutamina también
diagnóstico diferencial. Algunos estudios sugieren    pueden encontrarse significativamente incremen-
que la determinación del dímero-D sería               tados en la sepsis y en la insuficiencia respiratoria
importante en el diagnóstico diferencial de la        hipercápnica, por tanto, las concentraciones
punción lumbar traumática (negativo) y de la          elevadas     de    glutamina      en    el    líquido
hemorragia      subaracnoidea       (positivo)   y    cefalorraquídeo no son patognomónicas de
posiblemente de otras hemorragias intracraneales.     enfermedad      hepática.    El    amonio y el
                                                      α-cetoglutarato en el líquido cefalorraquídeo
                                                      también se han utilizado para evaluar la
Encefalopatía hepática                                encefalopatía hepática, sin embargo, ya que no
                                                      son más sensibles ni específicos que la
En el sistema nervioso central una gran               glutamina, generalmente se prefiere la glutamina,
proporción del amonio es secuestrado por el           que por otra parte es más fácil de medir.
α-cetoglutarato para formar glutamina. El intervalo


BIBLIOGRAFÍA

Boyer PJ, Simmons Z y Nifong TP. En:                  automated      immunofixation     electrophoresis
Cerebrospinal Fluid, Lippincott Williams & Wilkins,   system. Clin Chem 2005;51:464-470.
2002: 877-891.                                        Reiber H, Peter JB. Cerebrospinal fluid analysis:
Johnson AM, Rohlfs EM, Silverman LM.                  disease-related data patterns and evaluation
Proteins. En: Burtis CS, Ashwood ER, eds. Tietz       programs. J Neurol Sci 2001; 184:101-122.
textbook of clinical chemistry, 3nd ed.               Smith GP, Kjeldsberg CR. Cerebrospinal,
Philadelphia: W.B. Saunders, 1999:477-540.            synovial, and serous body fluids. En: Henry JB,
Landy J, McBride D. Textbook of urinalyasis and       ed. Clinical diagnosis and management by
body fluids: a clinical approach. Lippincott          laboratory methods, 29 th ed. Philadelphia: W.B.
Williams & Wilkins, 1st edition, 1998.                Saunders, 2001:403-411.
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Papadea C, Schlosser RJ. Rapid method for β2-         evidence-based approach. Cambridge University
transferrin in cerebrospinal fluid leakage using an   Press, 2002.




EDUCACIÓN CONTINUADA EN EL LABORATORIO CLÍNICO
COMITÉ DE EDUCACIÓN
D. Balsells (presidenta), F. Canalias, M. Gassó, A. Moreno, P. Munujos, M. Rodríguez, MC. Villà

Depósito legal: B-4063912005
ISBN: 84-89975-20-5
Imprenta: Multitex SL
Mayo 2006

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LCR-Liquido Cefalorraquideo

  • 1. EDUCACIÓN CONTINUADA EN EL LABORATORIO CLÍNICO Ed Cont Lab Clín 2006;9:49-56 LÍQUIDO CEFALORRAQUÍDEO Santiago Rodríguez-Segade Villamarín Laboratorio Central, Hospital Clínico Universitario, Santiago de Compostela INTRODUCCIÓN El líquido cefalorraquídeo es una solución existen muy pocas células en el líquido compleja producida por las células que revisten cefalorraquídeo normal. los plexos coroideos y por las células ependimales que revisten las superficies ventriculares. En el adulto, el volumen total oscila OBTENCIÓN DEL LÍQUIDO entre 90 y 150 mL, la mitad intracraneal y la otra CEFALORRAQUÍDEO mitad intraespinal. En el recién nacido estas cifras oscilan entre 10 y 60 mL. En el adulto cada día se Frecuentemente el líquido cefalorraquídeo se producen aproximadamente unos 500 mL de obtiene por punción lumbar. El procedimiento, que líquido cefalorraquídeo (20 mL/h), con un ha de realizar un médico, implica un daño recambio aproximado de unas tres veces por día. potencial para el paciente. Las indicaciones para En condiciones normales, el líquido una punción lumbar son las siguientes: cefalorraquídeo está bajo una presión de 7 a 15 mm Hg. - el diagnóstico de la meningitis (bacteriana, fúngica, micobacteriana y amébica), El líquido cefalorraquídeo tiene cuatro funciones - el diagnóstico de hemorragia (subaracnoidea, principales: (1) es un amortiguador mecánico que intracerebral e infarto cerebral), impide traumas, (2) regula el volumen de los - el diagnóstico de enfermedades neurológicas, contenidos intracraneales, (3) es un medio tales cómo: esclerosis múltiple, enfermedades nutriente del sistema nervioso central, y (4) es un desmielinizantes y el síndrome de Guillain- canal excretor para productos metabólicos del Barré, sistema nervioso central. - el diagnóstico y evaluación de una sospecha de malignidad, tal como leucemia, linfoma y El líquido cefalorraquídeo, se diferencia de los carcinoma metastásico fluídos serosos y sinoviales, en la permeabilidad - la introducción de fármacos, medios de selectiva de las membranas y tejidos adyacentes. contraste radiográficos y anestésicos. Esto se denomina barrera hematoencefálica. Consecuentemente, el líquido cefalorraquídeo no En pacientes con una presión intracraneal es un ultrafiltrado del plasma. Existe por tanto, un aumentada, el mayor riesgo de la punción lumbar transporte activo entre la sangre, líquido es la parálisis o muerte debido a una hernia cefalorraquídeo y cerebro, en ambas direcciones, tonsilar. También existe riesgo de infección por la lo que da lugar a que existan concentraciones realización del procedimiento. diferentes de sustancias en cada lugar. Una vez que se lleva a cabo una limpieza Muchos fármacos no pasan al líquido adecuada de la piel, se anestesia tópicamente y cefalorraquídeo desde la sangre. Electrolitos se inserta un catéter en la zona lumbar en el cómo el sodio, magnesio y cloruro están más espacio L3-4 o L4-5. Al realizar la punción, se concentrados en el líquido cefalorraquídeo que en mide manométricamente la presión de apertura. el plasma, mientras que el bicarbonato, glucosa y El volumen de la muestra obtenida, va desde urea están menos concentrados. Las proteínas unos pocos mL en un niño a 10-20 mL en un sólo pasan al líquido cefalorraquídeo en adulto. En la Tabla 1, se presenta la lista de cantidades muy pequeñas. Por otra parte, sólo pruebas que se solicitan frecuentemente.
  • 2. 50 S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo Bioquímica general (volumen: 0,5 a 1,0 mL) Glucosa Proteínas Albúmina Inmunoquímica (volumen: > 2 mL) Cuantificación de inmunoglobulinas totales Perfil electroforético de proteínas Bandas oligoclonales Inmunofijación Microbiología (volumen > 2 mL) Tinción rápida: Gram, tinta china, bacilos ácidorresistentes Aglutinación látex: análisis de bacterias corrientes Cultivo: bacterias (anaeróbico, aeróbico), virus, micobacterias, hongos Reacción en cadena de la polimersa (PCR): algunos organismos virales (virus del herpes simple), tuberculosis VDRL: neurosífilis Hematología (volumen: 0,5-1,0 mL) Recuentos celulares Evaluación leucemia / linfoma Citopatología (volumen: 2 a 4 mL) Evaluación de células malignas Tabla 1. Recogida de líquido cefalorraquídeo para pruebas frecuentes. La investigación del líquido cefalorraquídeo puede compararse al lado de un tubo con agua frente a realizarse para evaluar marcadores específicos una hoja de papel limpia y blanca. de una enfermedad, o bien para descartar enfermedades neurológicas, en particular la Turbidez. La turbidez, es el resultado de la enfermedad infecciosa. Típicamente, el líquido se presencia de leucocitos en cantidades elevadas recoge en una serie de tres o cuatro tubos (recuento de leucocitos superior a 200 /µL), o bien estériles, numerados del 1 al 4. Puesto que antes de la existencia de bacterias, o de un incremento de alcanzar el espacio subaracnoideo se lesiona en las proteínas o en los lípidos. Si se ha algún vaso sanguíneo y estructuras de tejido inyectado medio de contraste radiográfico, el blando, es adecuado descartar una pequeña líquido aparece aceitoso y si se agita aparece cantidad de líquido cefalorraquídeo antes de turbio. Esta falsa turbidez no se informa. iniciar la recogida del líquido cefalorraquídeo. En cualquier caso, el primer tubo suele estar Coágulos. Los coágulos pueden ser el resultado contaminado con algo de sangre periférica y otros de un aumento del fibrinógeno por una punción elementos, y aunque suele utilizarse para las traumática. Raramente, los coágulos pueden determinaciones bioquímicas o serológicas, no se deberse a un bloqueo subaracnoideo o a una debe utilizar para una evaluación microbiológica. meningitis. Los recuentos hematológicos suelen hacerse en el primer y cuarto tubo, para comparar los dos por Color. Un líquido sanguinolento puede deberse a si existe una punción traumática. una punción traumática o a una hemorragia subaracnoidea. Si la sangre del espécimen se debe a una punción traumática, los sucesivos EXAMEN: EVALUACIÓN DE LOS tubos de recogida son cada vez menos COMPONENTES hemorrágicos y los últimos casi claros. Si la sangre del espécimen se debe a una hemorragia Apariencia subaracnoidea, el color del líquido será igual en todos los tubos y presentará xantocromía. El líquido cefalorraquídeo es claro e incoloro como el cristal. Se asemeja al agua destilada. El Xantocromía. Consiste en la presencia de un color y la claridad del tubo de la muestra debe color pálido (naranja o amarillo) en el sobrenadante. Entre 1 y 4 horas después de la
  • 3. S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo 51 hemorragia subaracnoidea empieza a tener lugar Normalmente no existen eritrocitos en el líquido la liberación de hemoglobina desde los eritrocitos cefalorraquídeo. El valor de referencia de hemolizados. Una xantocromía rosa pálido o leucocitos en líquido cefalorraquídeo es de 0 a naranja pálido se debe a la liberación de 5/µL. Más de 10/µL se considera patológico. Si el oxihemoglobina y alcanza el máximo entre 24 y predominio de las células es polinuclear, indica 36 horas, desapareciendo de forma gradual en 4- generalmente una infección bacteriana, mientras 8 días. Hay que tener en cuenta, que la hemólisis que la presencia de células mononucleares indica tiene lugar tanto in vivo cómo in vitro, por tanto la una infección viral. valoración de la xantocromía debe de hacerse en la primera hora después de la obtención del líquido cefalorraquídeo para evitar resultados Examen morfológico falso-positivos. Cuando el recuento celular es superior a 30 Si la hemorragia es antigua, el líquido leucocitos/µL, debe hacerse un recuento sobrenadante muestra una xantocromía amarilla. diferencial de células. El mejor método es utilizar El color amarillo se debe a la bilirrubina que se una preparación citocentrifugada. Con éste forma a partir de la hemoglobina de los eritrocitos método, la fracción celular del líquido se lisados. Aparece a las 12 horas de un episodio concentra y posteriormente se tiñe con colorante hemorrágico, alcanza el máximo en 2-4 días y de Wright o con otros colorantes para estudios desaparece luego de forma gradual en 2-4 citológicos. Si no se dispone de citocentrifuga, se semanas. Cuando la concentración de proteínas centrífuga el líquido cefalorraquídeo a 3.000 rpm es superior a 1,5 g/L, se puede observar un color durante 5 minutos en una centrífuga normal y se similar al color del suero o el plasma. hace un frotis con el sedimento. Se seca rápidamente y se tiñe con colorante de Wright. La Finalmente, la hemorragia subaracnoidea se recuperación de células no es tan buena cómo en asocia con la observación microscópica de el caso de la citocentrifuga, además las células eritrofagia, es decir, la ingestión de eritrocitos por tienden a distorsionarse o dañarse. macrófagos. Independientemente del método de concentración, se cuentan 100 células y se da el porcentaje de Recuentos de eritrocitos y leucocitos cada tipo celular. En algunos casos, las células se identifican sólo cómo polinucleares o De forma general, para los líquidos corporales no mononucleares. Con la citocentrifugación la se utilizan los recuentos electrónicos, ya que identificación es más específica. Cualquiera de estos instrumentos no están estandarizados para las células de la sangre pueden identificarse en el recuentos tan bajos como los que se ven en el líquido cefalorraquídeo. También pueden verse líquido cefalorraquídeo. Además existen células originales del sistema nervioso central, problemas derivados de la viscosidad tales cómo células coroidales, ependimales y (especialmente los líquidos articulares), de la otras células mesoteliales. Si se encuentran variación en el tamaño celular (especialmente células tumorales o células poco usuales deben cuando están presentes células tumorales) y de de remitirse para un examen citológico. residuos (que generalmente son más elevados que las células). Examen bioquímico Ya que frecuentemente estos líquidos suelen estar contaminados por microorganismos Glucosa patógenos, hay que ser cuidadosos para evitar la contaminación, especialmente con las pipetas de La concentración de glucosa en el líquido dilución y con las cámaras de recuento. Las cefalorraquídeo es un reflejo de la concentración cámaras deben de desinfectarse antes de su en suero, ya que deriva del mismo por transporte utilización. a través de los plexos coroideos y también depende de la utilización intracraneal. De forma Si el líquido cefalorraquídeo es de apariencia general, la concentración de glucosa es clara, el recuento de células debe de hacerse sin aproximadamente un 50-75 % de la concentración utilizar líquido de dilución. El recuento ha de en suero. Para una evaluación adecuada de la hacerse lo más rápido posible, ya que las células concentración de glucosa en el líquido se lisan si se prolonga el tiempo de cefalorraquídeo, debe de valorarse paralelamente procesamiento. Lo adecuado, es realizar los la concentración de glucosa en suero, para evitar recuentos en los 30 primeros minutos después de errores de interpretación en casos de la obtención del espécimen. hipoglucemia o de hiperglucemia.
  • 4. 52 S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo Aunque no es un indicador sensible, una específicas: transferrina e inmunoglobulinas. Los glucorraquia reducida puede verse en una geles pueden explorarse por densitometría y meningitis infecciosa (bacteriana, tuberculosa o calcular la concentración de proteínas en las fúngica), una meningitis neoplásica y una bandas. Alternativamente, puede determinarse la hemorragia subaracnoidea (Tabla 2). En general, concentración de estas proteínas individuales. se considera que la reducción se debe a la mayor utilización por las células inflamatorias y por el Evaluación de la barrera hematoencefálica. parénquima cerebral adyacente, más que por los Puede utilizarse clínicamente la concentración organismos microbianos. diferencial de proteínas en el líquido cefalorraquídeo y en el suero. La integridad de la barrera hematoencefálica puede valorarse Proteínas calculando el índice de la albúmina en líquido cefalorraquídeo y suero. Al igual que en el suero, existe en el líquido cefalorraquídeo una variedad de proteínas en albúmina LCR x 1000 diversas concentraciones: prealbúmina, albúmina, Índice albúmina = ------------------------------------ α2-macroglobulina, fibrinógeno, transferrina, albúmina suero ceruloplasmina e inmunoglobulinas. La mayoría de estas proteínas, derivan de la sangre y se Un índice albúmina de 9 es consistente con una transportan al líquido cefalorraquídeo. Otras barrera hematoencefálica intacta, si oscila entre 9 proteínas son sintetizadas de novo por las células y 14 indica un ligero compromiso de la barrera epiteliales de los plexos coroideos. Típicamente, hematoencefálica, de 14 a 30 un compromiso la medida de las proteínas totales en líquido moderado y de 30 a 100 un compromiso severo. cefalorraquídeo se hace junto con una medida de En niños, el índice está elevado hasta proteínas totales en suero. Aunque algo aproximadamente los 6 meses de edad. inespecífico, la elevación de la proteinorraquia puede indicar o bien una ruptura de la barrera Síntesis intratecal de inmunoglobulinas. Para las hematoencefálica o bien una síntesis intratecal inmunoglobulinas en general, o bien para IgG o elevada de inmunoglobulinas. Esto último es de IgM específicas frente a un antígeno (por gran significado cuando se quiere hacer el ejemplo, el virus herpes simplex), pueden diagnóstico de una enfermedad infecciosa o realizarse los siguientes cálculos: inflamatoria que implica al sistema nervioso central y diferenciarlo de una participación IgG líquido cefalorraquídeo sistémica. Índice IgG = --------------------------------------- IgG suero En adultos, las proteínas totales en el líquido cefalorraquídeo oscilan entre 0,15 y 0,45 g/L, Un índice IgG mayor de 0,003 es consistente con pueden llegar hasta 1,50 g/L en recién nacidos y una síntesis intratecal elevada de inmuno- hasta 4 g/L en niños prematuros. globulinas. Sin embargo, este cociente no tiene en cuenta la filtración de la barrera hemato- La electroforesis de proteínas permite la encefálica. Para evitar esto, se calcula el índice evaluación de las proteínas que se encuentran en IgG/albúmina. concentraciones elevadas. El líquido cefalo- rraquídeo se distingue del suero en la presencia IgG LCR /IgG suero de una banda de prealbúmina prominente y dos IgG/albúmina= --------------------------------------------- bandas de transferrina (una de las cuales es la Albúmina LCR /albúmina suero forma desializada, conocida cómo proteína tau y se debe a la presencia de neuraminidasa) (Figura Con este cálculo, al incorporar la concentración 1). Esta técnica, también puede identificar la de albúmina, se corrige la pérdida de proteínas presencia de “bandas oligoclonales” de por la barrera hematoencefálica. El intervalo de inmunoglobulinas. Para descartar la posibilidad de referencia habitual es de 0,3 a 0,7. Se considera que las proteínas reflejen una producción que un índice IgG mayor de 0,7 es consistente sistémica, debe hacerse en paralelo una con una síntesis intratecal aumentada de electroforesis en suero. inmunoglobulinas. Si se quiere caracterizar de forma más sensible una población de proteínas, debe realizarse una inmunofijación con identificación de proteínas
  • 5. S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo 53 Figura 1. Bandas oligoclonales en la esclerosis múltiple. A: suero del paciente, B: líquido cefalorraquídeo del paciente. C: control con una gammapatía monoclonal. El líquido cefalorraquídeo del paciente contiene dos bandas distintas que no aparecen en el suero. Se observa una banda prominente de prealbúmina. La banda de transferrina, representa la transferrina desializada, también llamada proteína tau y β2-transferrina, es de mayor densidad y migra hacia la región gamma, hecho característico del líquido cefalorraquídeo. La pequeña cantidad de transferrina dializada apenas se observa en este gel de agarosa. En individuos normales, la velocidad diaria de transferrina), mientras que prácticamente no se síntesis de IgG puede calcularse utilizando la detecta en las secreciones serosas: nasales, fórmula de Tourtelotte, que tiene en cuenta los saliva, lágrimas y sudor. cocientes del suero frente al líquido cefalorraquídeo, de la IgG y la albúmina, el Debe de analizarse paralelamente el suero, por si volumen de líquido cefalorraquídeo formado en 24 el paciente presenta esta variante genética horas que es de 0,5 L y que el cociente de masa anómala en sangre o bien si consume grandes molar albúmina/IgG es de 0,43: cantidades de alcohol, ya que en esta circunstancia aumenta en sangre la fracción Síntesis IgG = 0,5 L/día x [(IgGLCR – IgGs/369) – desializada de la transferrina. (AlbLCR – Albs/230)] x [(IgGs / Albs) x 0,43] Un valor de síntesis de IgG superior a 8 mg/día Examen microbiológico (para algunos autores es de 3,5), se interpreta cómo una tasa de síntesis intratecal aumentada. Una evaluación rápida puede realizarse utilizando pruebas de aglutinación en látex, para causas bacterianas corrientes de meningitis y para Detección de extravasación infecciones por Cryptococcus. También pueden realizarse cultivos bacterianos (aeróbicos y Ocasionalmente, surge la cuestión de un escape anaeróbicos), fúngicos y víricos. Otros exámenes, de líquido cefalorraquídeo y se plantea el tales cómo cultivos de micobacterias, evaluación diagnóstico diferencial con posibles secreciones de la PCR para tuberculosis y entidades víricas de los lagrimales y glándulas serosas. Para (por ejemplo, virus Epstein-Barr) y evaluación distinguir estos dos líquidos, puede evaluarse el serológica para anticuerpos frente a especies de líquido recogido de la cavidad nasal o de otros Borrelia. lugares. El líquido cefalorraquídeo es rico en la isoforma desializada de la transferrina (proteína tau, β2-
  • 6. 54 S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo El ensayo VDRL es una prueba serológica bien Esclerosis múltiple conocida para la sífilis y que se realiza en el líquido cefalorraquídeo. Sin embargo, puede ser En la mayoría de los pacientes con esclerosis negativa en el 40 – 50 % de los casos. La prueba múltiple se observa un índice IgG / albúmina fluorescente de absorción del anticuerpo mayor de 0,27, un índice IgG mayor de 0,7 y una treponémico es más sensible pero menos tasa de síntesis de IgG mayor de 8. La específica. sensibilidad es elevada en pacientes clasificados clínicamente como esclerosis múltiple “definitiva”, PATOLOGÍA pero es más baja en pacientes con esclerosis múltiple “posible”. Meningitis Para el diagnóstico de esclerosis múltiple se hace Los neutrófilos son un indicador significativo de un estudio de bandas oligoclonales por meningitis bacteriana, sin embargo también electroforesis. Para descartar la posibilidad de aparecen precozmente en una infección fúngica. que el paciente tenga una gammapatía Por otra parte, los linfocitos pueden estar monoclonal que aparecería en el líquido elevados junto con los neutrófilos en el escenario cefalorraquídeo, debe realizarse paralelamente un de una meningitis bacteriana aguda. proteinograma en suero. En el 75 al 90 % de los pacientes se identifican dos o más bandas Las isoenzimas 4 y 5 de la lactato oligloconales. Al comienzo de la enfermedad deshidrogenasa se encuentran elevadas en el pueden no encontrarse bandas oligoclonales, y en líquido cefalorraquídeo en el caso de una algunos pacientes el número de bandas puede meningitis bacteriana, debido a su producción por aumentar con el tiempo. los granulocitos; mientras que en la meningitis vírica pueden observarse elevaciones de las isoenzimas 1 y 2 debido a su producción en los Tumor pineal o hipotalámico linfocitos. En el escenario de un tumor pineal con o sin un La concentración de lactato en líquido tumor hipotalámico concomitante, y cefalorraquídeo aumenta en la meningitis particularmente si es un niño, el diagnóstico bacteriana, pero típicamente no lo hace en las diferencial incluye un tumor germinal. Si la α- meningitis víricas o asépticas. fetoproteína o la gonadotropina coriónica en suero no están claramente elevadas, es de interés su determinación en el líquido cefalorraquídeo para Encefalitis viral descartar claramente un tumor germinal. A diferencia de la meningitis, donde la mayor parte del proceso infeccioso y de la respuesta Enfermedad de Creutzfeldt-Jacob inflamatoria asociada se limita a las meninges, en la encefalitis hay además afectación del En el diagnóstico de la demencia, el uso de la parénquima cerebral. evaluación de la proteína 14-3-3 en el líquido cefalorraquídeo se ha considerado útil para La amplificación por PCR de los ácidos nucleicos confirmar o rechazar el diagnóstico de enfermedad virales se ha convertido en el procedimiento de Creutzfeldt-Jacob. Concentraciones elevadas de diagnóstico de elección para muchos tipos de esta proteína neuronal se ha encontrado que encefalitis viral. Así, un resultado negativo del correlacionan razonablemente bien con el virus del herpes simple mediante PCR excluye el desarrollo de la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob. diagnóstico de encefalitis por virus del herpes simple, a menos que la prueba se haya realizado Sin embargo, elevaciones de la proteína 14-3-3 en una fase muy avanzada de la enfermedad. en líquido cefalorraquídeo también están Con otros virus los resultados son menos claros. presentes en casos de infarto y encefalitis y Sin embargo, la PCR es hoy día la prueba ocasionalmente en pacientes con enfermedad de diagnóstica principal para las infecciones del Alzheimer, demencia fronto-temporal, enfermedad sistema nervioso central producidas por de Lewy y meningitis carcinomatosa, de tal forma citomegalovirus, virus Epstein-Barr, virus varicela que la interpretación debe hacerse con cautela. zoster y enterovirus.
  • 7.
  • 8. Escenario Presión Apariencia RBC PMN Mononucleares Glucosa Proteínas (g/L) Otros 2 2 2 (cm H2O) (/mm ) (/mm ) (/mm ) (mmol/L) Normal 7-20 Claro, incoloro 0 0 0-5 2.7-4.4 0.15-0.45 Meningitis bacteriana Na↑ Nublado, turbio N ↑↑ (>100) ↑ ↓ o ↓↓ ↑ a ↑↑ Aglutinaciones bacterias, aguda (0.5-10) cultivo Meningitis vírica Na↑ Usualmente claro Na↑ Na↑  a ↑↑ Normal ↑ Cultivo, PCR (10 -300) (0.4-2) Meningitis fúngica Na↑ Claro a opalescente N Na↑  a ↑↑ ↓ ↑ a ↑↑ Aglutinación para (30-300) (0.5-7) cryptococcus S. Rodríguez-Segade. Líquido cefalorraquídeo Meningitis tuberculosa Na↑ Claro a opalescente N Na↑  a ↑↑ ↓ ↑ a ↑↑ Cultivo, PCR +/- coágluos (50-500) (0.6-7) Neurosífilis N Claro N Na↑ N a ↑↑ N ↑ al inicio FTA, VDRL; +/- bandas (0-500) N al final oligoclonales Esclerosis múltiple N Claro N N ↑ (5-100) N Na↑ +/- bandas oligoclonales Meningitis neoplásica Na↑ Claro a xantocrómico N N Na↑ No↓ Na↓ Citología, citometría de flujo Punción traumática N Hemorrágica, ↑ eritrocitos/leucocitos N Na↑ Eritrocitos reducidos en sobrenadante claro (mismo cociente que en sangre) tubo 4 frente tubo 1 Hemorragia ↑ Hemorrágica, ↑ eritrocitos/leucocitos No↓ ↑ Número de eritrocitos subaracnoidea xantocrómico (cociente reducido vs sangre) (0.5-1.0) similar en los 4 tubos Tabla 2. Características del líquido cefalorraquídeo en diferentes procesos patológicos. RBC, red blood cell (eritrocitos); PMN, polimorfonucleares; PCR, reacción en cadena de la polimerasa. (según Boyer). 55
  • 9. 56 S. Rodríguez-Segade. Lïquido cefalorraquídeo Hemorragia subaracnoidea de referencia de glutamina en líquido cefalorraquídeo es de 0,3 a 1,4 mmol/L, En la evaluación del líquido cefalorraquídeo en concentraciones superiores a 2,45 mmol/L casi algunos pacientes con hemorragia subaracnoidea siempre se asocian con síntomas de es muy importante el diagnóstico diferencial con encefalopatía metabólica. El coma hepático una punción traumática. Aparte de lo ya indicado, puede verse con concentraciones entre 1,75 y se ha demostrado que la cuantificación 6,65 mmol//L. espectrométrica de productos de la degradación de la hemoglobina es una herramienta útil para el Las concentraciones de glutamina también diagnóstico diferencial. Algunos estudios sugieren pueden encontrarse significativamente incremen- que la determinación del dímero-D sería tados en la sepsis y en la insuficiencia respiratoria importante en el diagnóstico diferencial de la hipercápnica, por tanto, las concentraciones punción lumbar traumática (negativo) y de la elevadas de glutamina en el líquido hemorragia subaracnoidea (positivo) y cefalorraquídeo no son patognomónicas de posiblemente de otras hemorragias intracraneales. enfermedad hepática. El amonio y el α-cetoglutarato en el líquido cefalorraquídeo también se han utilizado para evaluar la Encefalopatía hepática encefalopatía hepática, sin embargo, ya que no son más sensibles ni específicos que la En el sistema nervioso central una gran glutamina, generalmente se prefiere la glutamina, proporción del amonio es secuestrado por el que por otra parte es más fácil de medir. α-cetoglutarato para formar glutamina. El intervalo BIBLIOGRAFÍA Boyer PJ, Simmons Z y Nifong TP. En: automated immunofixation electrophoresis Cerebrospinal Fluid, Lippincott Williams & Wilkins, system. Clin Chem 2005;51:464-470. 2002: 877-891. Reiber H, Peter JB. Cerebrospinal fluid analysis: Johnson AM, Rohlfs EM, Silverman LM. disease-related data patterns and evaluation Proteins. En: Burtis CS, Ashwood ER, eds. Tietz programs. J Neurol Sci 2001; 184:101-122. textbook of clinical chemistry, 3nd ed. Smith GP, Kjeldsberg CR. Cerebrospinal, Philadelphia: W.B. Saunders, 1999:477-540. synovial, and serous body fluids. En: Henry JB, Landy J, McBride D. Textbook of urinalyasis and ed. Clinical diagnosis and management by body fluids: a clinical approach. Lippincott laboratory methods, 29 th ed. Philadelphia: W.B. Williams & Wilkins, 1st edition, 1998. Saunders, 2001:403-411. Linné JJ, Ringsrud KM. Clinical Laboratory Trull AK, Demers LM, Holt DW, Johnston A, Science.4ª ed. St. Louis: Mosby, 1999 Tredger JM, Price CP. Biomarkers of disease. An Papadea C, Schlosser RJ. Rapid method for β2- evidence-based approach. Cambridge University transferrin in cerebrospinal fluid leakage using an Press, 2002. EDUCACIÓN CONTINUADA EN EL LABORATORIO CLÍNICO COMITÉ DE EDUCACIÓN D. Balsells (presidenta), F. Canalias, M. Gassó, A. Moreno, P. Munujos, M. Rodríguez, MC. Villà Depósito legal: B-4063912005 ISBN: 84-89975-20-5 Imprenta: Multitex SL Mayo 2006