1. Evaluación del efecto de diferentes soportes
de liofilización sobre la tromboplastina.
Realizó: QFB Carlos Enrique Guillén Barrios.
Departamento de Nuevos Productos.
Fecha: 28 FEB 2013.
Resumen.
Para probar el efecto que tienen diferentes soportes de liofilización sobre una tromboplastina en desarrollo, se realizó la
prueba manual de tiempo de protrombina con plasma control liofilizado. Los soportes probados fueron manitol,
sorbitol, glicina y sacarosa, en concentraciones de 0 a 4.5%. Se presentaron los tiempos de coagulación en cada caso
encontrando que la glicina presenta menor interferencia en el tiempo de coagulación del plasma control.
Objetivo. alguna tendencia de disminución o aumento del TP. Los
Determinar la aptitud de diferentes soportes de resultados se pueden observar en la Tabla 2 y en el
liofilización para aplicarse en la tromboplastina Gráfico 2.
liofilizada en desarrollo.
Metodología.
Soporte Concentración TP (s)
Tromboplastina. Se prepararon 100 mL por el método
0.0% 12.47
TRL-02.
1.5% 12.47
Solución de calcio 25 mM: Se preparó una solución de Manitol
3.0% 12.92
Cloruro de calcio 25 mM con Azida de sodio. Se
4.5% 13.27
prepararon
0.0% 12.47
Adición de Soportes: Se prepararon soluciones de 0.0%, 1.5% 12.31
1.5%, 3.0% y 4.5% de los diferentes soportes de Glicina
3.0% 11.79
manitol, sorbitol, glicina y sacarosa pesando la cantidad 4.5% 11.97
necesaria de cada uno y aforando con la solución de 0.0% 12.47
calcio 25 mM. Cada una de las soluciones de Calcio- 1.5% 12.76
Sacarosa
Soporte se utilizó para diluir alícuotas de 3.0% 12.71
tromboplastina líquida en proporción 1:1. 4.5% 12.19
Plasma control: Se utilizó el plasma control preparado 0.0% 12.47
por el método PLA-NOV.2012.1 identificado como 1.5% 12.51
Sorbitol
28.NOV.2012, reconstituyendo cada frasco con 1.0 mL 3.0% 12.70
de agua destilada. 4.5% 12.90
Procedimiento: Se realizó la prueba de tiempo de Tabla 1. Tiempos de protrombina obtenidos.
protrombina (PT) al plasma control evaluando cada
soporte a diferentes concentraciones, teniendo un Evento TP (s)
panel de 16 pruebas que se realizaron por triplicado. La 1 12.56
prueba se desarrollo a 37°C agregando 200 µL de 2 12.43
tromboplastina cálcica a 100 µL de plasma control. 3 12.1
4 13.11
5 12.23
Resultados.
6 11.93
El tiempo promedio de coagulación con cada soporte
7 11.95
se muestra en la Tabla 1 y se puede visualizar en el
8 11.88
Gráfico 1.
Media 12.273
La evaluación del reactivo sin soporte (concentración
D.E. 0.416
cero) se llevó a cabo entre las determinaciones para Tabla 2. TP del plasma control.
cada soporte, para detectar en el plasma control

2. Gráfico 1. Tiempos de protrombina obtenidos.
Faltaría determinar el efecto de los diferentes soportes
sobre la sensibilidad del reactivo, mediante una
calibración del Índice Internacional de Sensibilidad (ISI).
La evaluación del plasma muestra una tendencia a
disminuir el tiempo de coagulación a través del tiempo
y se observa una probable.
Conclusiones.
A reserva de los resultados del Índice Internacional de
Gráfico 2. TP del plasma control. Sensibilidad y de la apariencia del producto después de
la liofilización, la glicina es el soporte con mejores
resultados sobre el TP, seguida de sacarosa. Por otro
lado, no es recomendable el uso de manitol y sorbitol
Análisis de resultados debido a su efecto prolongador del tiempo de
Las curvas obtenidas muestran pendientes positivas coagulación.
para el manitol (0.30) y el sorbitol (0.17); mientras que
la pendiente es negativa en el caso de la sacarosa (- Perspectivas en el desarrollo del producto.
0.02) y la glicina (-0.18). Esto quiere decir que, Para continuar con el desarrollo se sugiere realizar y
aparentemente, la adición de glicina logra no solo no evaluar formulaciones de tromboplastina liofilizada
afectar el TP, sino disminuirlo. que incluyan glicina 1.5%, 3.0% y 4.5%.