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Protocolo para la validación de métodos alternativos
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Listeriaspp.
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del alimento en un volumen
establecido de agua peptonada
regulada o solución Ringer.
ser 1:10.
Transferir 0.5 mL de la suspensión de
la muestra a un vial de solución
Transferir 10 mL de la muestra
homogenizada en un tubo apropia-
do (dil. 1:10).
Incubar a 36±1°C por 4-6 horas.
Distribuir 0.2 mL de la suspención
dentro de cada pozo del sistema.
Cubrir los pozos 1-LDC, 2-H2S y
3-UR con una gota de aceite de
vaselina e incube a 36±1°C por
18-24 horas.
Agregar dos gotas de reactivo de
Kovac en el pozo 8-IND para
Agregar dos gotas del reactivo H2O2
a los pozos 11-CAT y observe si hay
formación de burbujas.
mediante la toma de una gota del
pozo 12-Y/M y la observación de
esporas al microscopio (400x).
Anotar los resultados en la forma
provista con el kit.
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  • 1. 1 LDC 2 H2S 3 UR 4 PRO 5 PSE 6 STA 7 ESC 8 IND 9 BCE 10 LIS 11 CAT 12 Y/M * * FOOD SYSTEM Sample A ................................... Sample B ................................... 1 LDC 2 H2S 3 UR 4 PRO 5 PSE 6 STA 7 ESC 8 IND 9 BCE 10 LIS 11 CAT 12 Y/M A B * * patógenos a partir de herramientas alimentarias. FOOD SYSTEM Identificacion microbiana* * * * * * * * ‘ Salmonellaspp. Citrobacter spp. Proteus spp. /Providenciaspp. Pseudomonas spp. Staphylococcus aureus Escherichia coli, E. coli 0157 Bacillus cereus Listeriaspp. Hongos y levaduras ‘ Incoulación a a partir de la suspención Diseño conveniente para dos pruebas Resultados listos en 18-24 horas Interpretación sencilla 1 LDC 2 H2S 3 UR 4 PRO 5 PSE 6 STA 7 ESC 8 IND 9 BCE 10 LIS 11 CAT 12 Y/M * * FOOD SYSTEM Sample A ................................... Sample B ................................... 1 LDC 2 H2S 3 UR 4 PRO 5 PSE 6 STA 7 ESC 8 IND 9 BCE 10 LIS 11 CAT 12 Y/M A B * * 1 LDC 2 H2S 3 UR 4 PRO 5 PSE 6 STA 7 ESC 8 IND 9 BCE 10 LIS 11 CAT 12 Y/M * * FOOD SYSTEM Sample A ................................... Sample B ................................... 1 LDC 2 H2S 3 UR 4 PRO 5 PSE 6 STA 7 ESC 8 IND 9 BCE 10 LIS 11 CAT 12 Y/M A B * * Validacion ISO 16140 ‘ Protocolo para la validación de métodos alternativos en microbiología de alimentos y los objetos utilizados Listeriaspp. Salmonellaspp. *
  • 2. FOOD SYSTEM • • • Resultados Procedimiento • • DESCRIPTION • del alimento en un volumen establecido de agua peptonada regulada o solución Ringer. ser 1:10. Transferir 0.5 mL de la suspensión de la muestra a un vial de solución Transferir 10 mL de la muestra homogenizada en un tubo apropia- do (dil. 1:10). Incubar a 36±1°C por 4-6 horas. Distribuir 0.2 mL de la suspención dentro de cada pozo del sistema. Cubrir los pozos 1-LDC, 2-H2S y 3-UR con una gota de aceite de vaselina e incube a 36±1°C por 18-24 horas. Agregar dos gotas de reactivo de Kovac en el pozo 8-IND para Agregar dos gotas del reactivo H2O2 a los pozos 11-CAT y observe si hay formación de burbujas. mediante la toma de una gota del pozo 12-Y/M y la observación de esporas al microscopio (400x). Anotar los resultados en la forma provista con el kit. 1 2 3 4 5 6 FOOD SYSTEM VASELINE OIL H2O2 REAGENT OXIDASETEST STICK Pseudomonas spp. • prueba de oxidasa positiva Staphylococcus aureus • test de aglutinación positivo Salmonellaspp. •test de aglutinación positivo 2 H2S 1 LDC 3 UR 4 PRO 2 H2S 3 UR 4 PRO 1 LDC Proteus spp. Providenciaspp.1 LDC 2 H2S 1 LDC 2 H2S 3 UR 4 PRO 3 UR 4 PRO 2 H2S 3 UR 4 PRO 2 H2S 3 UR 4 PRO Citrobacter spp. •test de aglutinación negativo 1 LDC 1 LDC Identification 5 PSE 5 PSE 6 STA 6 STA Bacillus cereus •9 BCE 9 BCE Hongos y levaduras 12 Y/M 12 Y/M Escherichia coli *positive indole test • positive agglutination test for E. coli0157 8 IND 7 ESC 7 ESC 8 IND Listeria spp. test de catalasapositivo • • •11 CAT 10 LIS * * 11 CAT 10 LIS KOVAC’S - REAGENT * *