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 Polímeros de nucleotídeos
 Moléculas de informação genética -DNA
 Síntese de macromoléculas -RNA -mRNA, tRNA
rRNA
 Componentes: base nitrogenada, pentose e ligação
fosfodiester
 Pentose:
 desoxirribose -DNA e ribose -RNA
 Bases nitrogenadas:
 Purinas: adenina (A) e guanina (G)
 Pirimidinas: DNA -timina (T) e citosina (C)
RNA -uracila (U) e citosina (C)
Fonte: Alberts et al.(1997)
 DNA: armazenamento e transmissão de genes
 Cromossomos (núcleo), mitocôndria e cloroplastos
 Duas cadeias em hélice em direções opostas -anti-
paralelas = ambas em sentido 5’ -> 3’
 Fita dupla - Bases complementares ligadas por pontes de
hidrogênioA-T (2) e G-C (3)
 Bases hidrofóbicas -internas
 Grupos fosfatos e pentose hidrofílicos -externos
 RNA: fita simples - estrutura por pareamento
complementar
 RNA de transferência ou transportador-tRNA
 RNA mensageiro -mRNA
 RNA ribossômico ou ribossomal -rRNA
 75 a 90 nucleotídeos
 forma de trevo, com bases modificadas
 transfere aminoácidos para posição correta
 reconhece códons em mRNA -anti-códon
 genes de tRNA -processamento pós-transcricional
 tamanhos variados -genes
 Processamento (SPLICING) - éxons e íntrons
É o mais abundante na célula (>80%)
(CLOROPLASTO, MITOCÔNDRIA, RIBOSSOMO E RET. ENDOP. RUGOSO)
 Síntese nuclear combinado com proteínas -
ribossomo
 procarioto 70S -(23S + 5S) (16S)
 eucarioto 80S -(28S+5.8S+5S) (18S)
 Informação hereditária -GENES
 1940s: genes codificam proteínas
 proteínas principal ator celular: enzimas, estrutura, regulação da
expressão gênica, movimento, comunicação
 Inicialmente, considerou-se que proteínas eram o material
genético!
 Genes em Cromossomos
 20 aminoácidos -alfabeto!
 Ácido nucléicos -molécula simples e repetitiva - de célula para
célula e geração para geração
 Dupla fita -> complementares
 Fita -molde da complementar
 Replicação -semiconservativa
 Replicação se inicia por separação das fitas –
DNA helicase
 Origem de Replicação -sequências reconhecidas
por proteínas iniciadoras da replicação - ricas em
A-T
 Formação de Forquilhas de Replicação - Junções em forma deY
 2 forquilhas por cada origem de replicação
 100 a 1.000 pares de nucleotídeos/segundo DNA Polimerase:
 adiciona nucleosídeostrifosfato ao terminal 3’
 nucleotídeo + pirofosfato(PPi)
 Pirofosfato-> 2 fosfatos inorgânico= ENERGIA!
 CATALISA APENAS SENTIDO 5’-> 3’
 REQUER INICIADOR COMTERMINAL 3’
 CAPACIDADE DE CORREÇÃO 3’-5’
 Forquilhas de Replicação:
 uma fita 5’ -> 3’, mas outra fita 3’ -> 5’
 Forquilha é assimétrica
 Fita Líder: síntese contínua 5’ -> 3’
 Fita Descontínua: em pedaços depois ligados
 requer terminal 3’ -iniciador ou primer
 fita líder: um iniciador
 Fita descontínua: síntese contínua de
iniciadores
 Fita descontínua: Fragmentos de Okazaki
 DNA ligase: une fragmentos de Okazaki
 Transcrição é o processo pelo qual uma molécula
de RNA é sintetizada a partir de um molde de DNA.
É principalmente durante a transcrição que a célula
exerce o controle da expressão gênica.
Os genes não são transcritos aleatoriamente, pois
esse processo é regulado por proteínas.
Na maioria dos casos, o principal ponto de regulação
da atividade de um gene é a decisão de iniciar ou não
a sua transcrição.
 A transcrição ocorre a partir da informação contida na
sequência de nucleotídeos de uma molécula de DNA
fita dupla, sendo sempre no sentido 5' → 3'. Apenas
uma das fitas do DNA, chamada de fita molde, é
utilizada durante a síntese, que segue as mesmas
regras de complementaridade e antiparalelismo,
exceto pelo pareamento de uracila (U), ao invés de
timina (T), com adenina (A). O RNA recém sintetizado
(5' → 3') é, portanto, complementar à fita de DNA que
serviu de molde (3' → 5') e idêntico a outra fita de DNA
do duplex (5' → 3'). Por convenção, entretanto, a
sequência de nucleotídeos de um gene é sempre
representada na orientação 5' → 3', ou seja, a fita que
não serve de molde.
 1) reconhecem e ligam-se a sequências
específicas de DNA;
 2) desnaturam o DNA, expondo a sequência de
nucleotídeos a ser copiada;
 3) mantêm as fitas de DNA separadas na região
de síntese;
 4) mantêm estável o duplex DNA:RNA na região
de síntese;
 5) restauram o DNA na região imediatamente
posterior à da síntese; e
 6) sozinhas ou com auxílio de proteínas
específicas, terminam a síntese do RNA.
 A) RNAP I, que sintetiza os rRNAs . Essa polimerase
catalisa a síntese de apenas um tipo de RNA,
precursor dos rRNAs 18S, 5,8S e 28S.
 Entretanto esse é o RNA mais abundante na célula.
Esses pré-RNAs são bastante longos, variando de
6.000 a 15.000 nucleotídeos. Para poder responder a
essa demanda, a célula possui de 100 a 5.000 cópias
dos genes para rRNA, uma ao lado da outra, e sua
síntese ocorre em um ponto especializado no núcleo,
o nucléolo. O complexo RNAP I é composto por 2
subunidades maiores (com 130 e 190 kDa) e por 4-10
subunidades menores.
 B) RNA polimerase II que sintetiza mRNA
 Todos os pré-mRNAs das células são
sintetizados pela RNAP II, que, portanto,
transcreve a maior parte dos RNA
heterogêneos nucleares (hnRNA) precursores
dos mRNAs. As RNAPs II possuem duas
subunidades maiores de 215 e 139kDa e
vários componentes menores (de 6-8), de
aproximadamente 50kDa.
 C) RNAP III, que sintetiza os tRNA
 Essas polimerases catalisam a síntese de
cerca de 10% do RNA da célula dos tRNAs. A
enzima é a mais complexa das RNAPs, com
tamanho aproximado de 700 kDa, sendo
formado por cerca de 14 subunidades. Assim
como as outras RNAPs, 2 subunidades são
maiores, com 160 e 128 kDa, e têm
identidade com as correspondentes
subunidades de RNAP II.
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  • 1.
  • 2.  Polímeros de nucleotídeos  Moléculas de informação genética -DNA  Síntese de macromoléculas -RNA -mRNA, tRNA rRNA  Componentes: base nitrogenada, pentose e ligação fosfodiester  Pentose:  desoxirribose -DNA e ribose -RNA  Bases nitrogenadas:  Purinas: adenina (A) e guanina (G)  Pirimidinas: DNA -timina (T) e citosina (C) RNA -uracila (U) e citosina (C)
  • 3.
  • 4.
  • 5. Fonte: Alberts et al.(1997)
  • 6.  DNA: armazenamento e transmissão de genes  Cromossomos (núcleo), mitocôndria e cloroplastos  Duas cadeias em hélice em direções opostas -anti- paralelas = ambas em sentido 5’ -> 3’  Fita dupla - Bases complementares ligadas por pontes de hidrogênioA-T (2) e G-C (3)  Bases hidrofóbicas -internas  Grupos fosfatos e pentose hidrofílicos -externos
  • 7.
  • 8.
  • 9.  RNA: fita simples - estrutura por pareamento complementar  RNA de transferência ou transportador-tRNA  RNA mensageiro -mRNA  RNA ribossômico ou ribossomal -rRNA
  • 10.  75 a 90 nucleotídeos  forma de trevo, com bases modificadas  transfere aminoácidos para posição correta  reconhece códons em mRNA -anti-códon  genes de tRNA -processamento pós-transcricional
  • 11.
  • 12.  tamanhos variados -genes  Processamento (SPLICING) - éxons e íntrons
  • 13. É o mais abundante na célula (>80%) (CLOROPLASTO, MITOCÔNDRIA, RIBOSSOMO E RET. ENDOP. RUGOSO)  Síntese nuclear combinado com proteínas - ribossomo  procarioto 70S -(23S + 5S) (16S)  eucarioto 80S -(28S+5.8S+5S) (18S)
  • 14.
  • 15.  Informação hereditária -GENES  1940s: genes codificam proteínas  proteínas principal ator celular: enzimas, estrutura, regulação da expressão gênica, movimento, comunicação  Inicialmente, considerou-se que proteínas eram o material genético!  Genes em Cromossomos  20 aminoácidos -alfabeto!  Ácido nucléicos -molécula simples e repetitiva - de célula para célula e geração para geração
  • 16.
  • 17.
  • 18.  Dupla fita -> complementares  Fita -molde da complementar  Replicação -semiconservativa  Replicação se inicia por separação das fitas – DNA helicase  Origem de Replicação -sequências reconhecidas por proteínas iniciadoras da replicação - ricas em A-T
  • 19.
  • 20.
  • 21.
  • 22.  Formação de Forquilhas de Replicação - Junções em forma deY  2 forquilhas por cada origem de replicação  100 a 1.000 pares de nucleotídeos/segundo DNA Polimerase:  adiciona nucleosídeostrifosfato ao terminal 3’  nucleotídeo + pirofosfato(PPi)  Pirofosfato-> 2 fosfatos inorgânico= ENERGIA!  CATALISA APENAS SENTIDO 5’-> 3’  REQUER INICIADOR COMTERMINAL 3’  CAPACIDADE DE CORREÇÃO 3’-5’
  • 23.
  • 24.  Forquilhas de Replicação:  uma fita 5’ -> 3’, mas outra fita 3’ -> 5’  Forquilha é assimétrica  Fita Líder: síntese contínua 5’ -> 3’  Fita Descontínua: em pedaços depois ligados
  • 25.  requer terminal 3’ -iniciador ou primer  fita líder: um iniciador  Fita descontínua: síntese contínua de iniciadores  Fita descontínua: Fragmentos de Okazaki  DNA ligase: une fragmentos de Okazaki
  • 26.
  • 27.
  • 28.
  • 29.
  • 30.
  • 31.  Transcrição é o processo pelo qual uma molécula de RNA é sintetizada a partir de um molde de DNA. É principalmente durante a transcrição que a célula exerce o controle da expressão gênica. Os genes não são transcritos aleatoriamente, pois esse processo é regulado por proteínas. Na maioria dos casos, o principal ponto de regulação da atividade de um gene é a decisão de iniciar ou não a sua transcrição.
  • 32.  A transcrição ocorre a partir da informação contida na sequência de nucleotídeos de uma molécula de DNA fita dupla, sendo sempre no sentido 5' → 3'. Apenas uma das fitas do DNA, chamada de fita molde, é utilizada durante a síntese, que segue as mesmas regras de complementaridade e antiparalelismo, exceto pelo pareamento de uracila (U), ao invés de timina (T), com adenina (A). O RNA recém sintetizado (5' → 3') é, portanto, complementar à fita de DNA que serviu de molde (3' → 5') e idêntico a outra fita de DNA do duplex (5' → 3'). Por convenção, entretanto, a sequência de nucleotídeos de um gene é sempre representada na orientação 5' → 3', ou seja, a fita que não serve de molde.
  • 33.  1) reconhecem e ligam-se a sequências específicas de DNA;  2) desnaturam o DNA, expondo a sequência de nucleotídeos a ser copiada;  3) mantêm as fitas de DNA separadas na região de síntese;  4) mantêm estável o duplex DNA:RNA na região de síntese;  5) restauram o DNA na região imediatamente posterior à da síntese; e  6) sozinhas ou com auxílio de proteínas específicas, terminam a síntese do RNA.
  • 34.  A) RNAP I, que sintetiza os rRNAs . Essa polimerase catalisa a síntese de apenas um tipo de RNA, precursor dos rRNAs 18S, 5,8S e 28S.  Entretanto esse é o RNA mais abundante na célula. Esses pré-RNAs são bastante longos, variando de 6.000 a 15.000 nucleotídeos. Para poder responder a essa demanda, a célula possui de 100 a 5.000 cópias dos genes para rRNA, uma ao lado da outra, e sua síntese ocorre em um ponto especializado no núcleo, o nucléolo. O complexo RNAP I é composto por 2 subunidades maiores (com 130 e 190 kDa) e por 4-10 subunidades menores.
  • 35.
  • 36.  B) RNA polimerase II que sintetiza mRNA  Todos os pré-mRNAs das células são sintetizados pela RNAP II, que, portanto, transcreve a maior parte dos RNA heterogêneos nucleares (hnRNA) precursores dos mRNAs. As RNAPs II possuem duas subunidades maiores de 215 e 139kDa e vários componentes menores (de 6-8), de aproximadamente 50kDa.
  • 37.
  • 38.
  • 39.
  • 40.  C) RNAP III, que sintetiza os tRNA  Essas polimerases catalisam a síntese de cerca de 10% do RNA da célula dos tRNAs. A enzima é a mais complexa das RNAPs, com tamanho aproximado de 700 kDa, sendo formado por cerca de 14 subunidades. Assim como as outras RNAPs, 2 subunidades são maiores, com 160 e 128 kDa, e têm identidade com as correspondentes subunidades de RNAP II.