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INSTITUTO TECNOLÓGICO DE CD. ALTAMIRANO

           BIOLOGÍA CELULAR

          LIC. EN BIOLOGÍA 3B

 UNIDAD II TÉCNICAS DE ESTUDIO CELULAR

  ALUMNO: CHRISTIAN E. LEÓN SALGADO

     ASESOR: ERIKA OROPEZA BRUNO
MICROSCOPIA
                   ÓPTICA




  Descubridor                     PARTES




    Anton Van                 Oculares, foco,
Leeuwenhook, en el                platina,
    siglo XVII.                  objetivo,
                               condensador,
                                diafragma,
                               tubo, brazo,
                               pie, revolver.
CONTRASTE
                     DE FASE




                                      Permite realizar
Desarrollado por:                        exámenes
Zernike en 1932                        inmediatos y
                                      observar células
                                           viva.



               Aumenta el contraste
              entre las partes claras y
               oscuras de las células
                    sin colorear.
MICROSCOPIA O.
                      DE INTERFERENCIA




                                          Permite obtener
  Diseñado por:
                                         datos cualitativos y
Labedeff en 1930.
                                           cuantitativos.




Existen tres tipos:                    Permite apreciar los
  Microscopio de                    cambios que se producen
 interferencia de                     en la masa seca de los
     longitud                       cultivos celulares durante
desdoblada, los de                        los procesos de
  ondas y ondas                      crecimiento y división.
    múltiples.
MICROSCOPIA
                   ÓPTICA DE LUZ
                   ULTRAVIOLETA.




  Radiación de alta            Energía que se utiliza
  energía que si se             para observar ácidos
observa directamente           nucleicos, proteínas y
   daña la retina.                 aminoácidos.




                                          Toma
                                     microfotografías
                                   usando una película
                                     sensible a esta
                                        radiación.
MICROSCOPIA DE
                       FLUORESCENCIA




   Los objetos son                          Inventor:
iluminados por rayos
de una determinada                           Kôhler y
  longitud de onda.                     Siedentopf en 1908




                                        Utiliza los mismos
                                         principios de la
                                           microscopia
                                            óptica, con
                                        diferencias en el
                                        diseño y manejo.
MICROSCOPIA
     ÓPTICA DE
   CAMPO OSCURO




Utiliza un haz enfocado
 de luz muy intensa en
forma de un cono hueco
  concentrado sobre el
       espécimen.




 El objeto iluminado
 dispersa la luz y se
hace así visible contra
 el fondo oscuro que
    tienen detrás.
MICROSCOPIA
                         ELECTRÓNICA
                        DE TRANSICIÓN




Longitud de onda de
los electrones que se                    Emite electrones que
    utilizan en los                         chocan contra el
  electrónicos es de                    espécimen, creando una
   alrededor de 0,5                       imagen aumentada.
      angstroms.

                   Utiliza electrones para
                 iluminar un objeto. Dado
                 que los electrones tienen
                una longitud de onda mucho
                 menor que la luz, pueden
                 mostrar estructuras mucho
                        más pequeñas.
MICROSCOPIA
                        DE LASER
                       CONFOCAL




 Su éxito de debe a las          Su principio se basa en
indudables ventajas que         eliminar la luz reflejada
   ofrece frente a la                 o fluorescente
   microscopia óptica               procedente de los
      tradicional.                planos fuera de foco.




                                    Es básicamente un
       Inventor:
                                 microscopio óptico que
                                 incluye como fuente de
     Petran 1968.
                                  luz láser y un sistema
                                electrónico que ayuda a
                               la captación de imágenes.
MICROSCOPIA
                           DE
                       TRANSMISIÓN


 Desarrollado por:                   Utiliza un haz de
    Ruska y sus                       electrones para
 colaboradores en                       visualizar un
      1931.                          objeto, debido a
                                      que la potencia
                                     amplificadora de
                                      un microscopio
                                         óptico esta
                                      limitada por la
                                     longitud de onda
    Estructura:                      de la luz visible.
     Cañón de
 electrones, lentes
magnéticas, sistema
  de vacío, placa
fotográfica, sistema
    de registro.
Electroforesis




 Desarrollado por:                             Técnica para la
  Arne Tiselius en                              separación de
1973. Biolquímico.                            moléculas según la
                                              movilidad de estas
                                                 en un campo
                                                 electrónico.



           Metodología: 1.- Preparar gel de agarosa.
              2.- Mezclar las muestras a analizar
           adecuado y un colorante. 3.- Montar las
           muestras en el gel. 4.- Realizar la corrida
           electroforética. 5.- Visualizar los ácidos
                           nucleicos.
MÉTODOS
                           CITOQUÍMICOS


                                            Reacciones existentes:
Sustancia más utilizada:
                                           1.- Progresivas estables.
 Tetraóxido de osmio.
                                                 .- Progresivas
         O5O4
                                           indefinidas. 3.- Fugaces


                        Rama de la biología
                     celular que se dedica a la
                           identificación y
                         localización de los
                      compuestos químicos y
                      macromoléculas de las
                               células
• Fraccionamiento del
                       contenido celular




  Tres etapas:
• Disgregación o                        Técnica que tiene
       rotura                             como objetivo
  • Filtración                          obtener fracciones
• Purificación de                      puras o enriquecidas
   componentes                          en un determinado
     celulares                         componente celular.

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  • 1. INSTITUTO TECNOLÓGICO DE CD. ALTAMIRANO BIOLOGÍA CELULAR LIC. EN BIOLOGÍA 3B UNIDAD II TÉCNICAS DE ESTUDIO CELULAR ALUMNO: CHRISTIAN E. LEÓN SALGADO ASESOR: ERIKA OROPEZA BRUNO
  • 2. MICROSCOPIA ÓPTICA Descubridor PARTES Anton Van Oculares, foco, Leeuwenhook, en el platina, siglo XVII. objetivo, condensador, diafragma, tubo, brazo, pie, revolver.
  • 3. CONTRASTE DE FASE Permite realizar Desarrollado por: exámenes Zernike en 1932 inmediatos y observar células viva. Aumenta el contraste entre las partes claras y oscuras de las células sin colorear.
  • 4. MICROSCOPIA O. DE INTERFERENCIA Permite obtener Diseñado por: datos cualitativos y Labedeff en 1930. cuantitativos. Existen tres tipos: Permite apreciar los Microscopio de cambios que se producen interferencia de en la masa seca de los longitud cultivos celulares durante desdoblada, los de los procesos de ondas y ondas crecimiento y división. múltiples.
  • 5. MICROSCOPIA ÓPTICA DE LUZ ULTRAVIOLETA. Radiación de alta Energía que se utiliza energía que si se para observar ácidos observa directamente nucleicos, proteínas y daña la retina. aminoácidos. Toma microfotografías usando una película sensible a esta radiación.
  • 6. MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA Los objetos son Inventor: iluminados por rayos de una determinada Kôhler y longitud de onda. Siedentopf en 1908 Utiliza los mismos principios de la microscopia óptica, con diferencias en el diseño y manejo.
  • 7. MICROSCOPIA ÓPTICA DE CAMPO OSCURO Utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espécimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace así visible contra el fondo oscuro que tienen detrás.
  • 8. MICROSCOPIA ELECTRÓNICA DE TRANSICIÓN Longitud de onda de los electrones que se Emite electrones que utilizan en los chocan contra el electrónicos es de espécimen, creando una alrededor de 0,5 imagen aumentada. angstroms. Utiliza electrones para iluminar un objeto. Dado que los electrones tienen una longitud de onda mucho menor que la luz, pueden mostrar estructuras mucho más pequeñas.
  • 9. MICROSCOPIA DE LASER CONFOCAL Su éxito de debe a las Su principio se basa en indudables ventajas que eliminar la luz reflejada ofrece frente a la o fluorescente microscopia óptica procedente de los tradicional. planos fuera de foco. Es básicamente un Inventor: microscopio óptico que incluye como fuente de Petran 1968. luz láser y un sistema electrónico que ayuda a la captación de imágenes.
  • 10. MICROSCOPIA DE TRANSMISIÓN Desarrollado por: Utiliza un haz de Ruska y sus electrones para colaboradores en visualizar un 1931. objeto, debido a que la potencia amplificadora de un microscopio óptico esta limitada por la longitud de onda Estructura: de la luz visible. Cañón de electrones, lentes magnéticas, sistema de vacío, placa fotográfica, sistema de registro.
  • 11. Electroforesis Desarrollado por: Técnica para la Arne Tiselius en separación de 1973. Biolquímico. moléculas según la movilidad de estas en un campo electrónico. Metodología: 1.- Preparar gel de agarosa. 2.- Mezclar las muestras a analizar adecuado y un colorante. 3.- Montar las muestras en el gel. 4.- Realizar la corrida electroforética. 5.- Visualizar los ácidos nucleicos.
  • 12. MÉTODOS CITOQUÍMICOS Reacciones existentes: Sustancia más utilizada: 1.- Progresivas estables. Tetraóxido de osmio. .- Progresivas O5O4 indefinidas. 3.- Fugaces Rama de la biología celular que se dedica a la identificación y localización de los compuestos químicos y macromoléculas de las células
  • 13. • Fraccionamiento del contenido celular Tres etapas: • Disgregación o Técnica que tiene rotura como objetivo • Filtración obtener fracciones • Purificación de puras o enriquecidas componentes en un determinado celulares componente celular.