Sindrome Linfoproliferativo Autoinmune

1. María Carpintero
Carlos Martínez
Anna Mestre
Máster en Inmunología Avanzada
Curso de Inmunodeficiencias
Marzo 2013

2. Síndrome Linfoproliferativo
Autoinmune (ALPS)
• IDP por desregulación inmunológica: síndromes con
autoinmunidad.
• Enfermedad Autosómica Dominante (AD)
• Posibles casos: Autosómica Recesiva (AR) y alteraciones somáticas
• Mutación en elementos de la vía extrínseca de apoptosis

4. Introducción
Apoptosis
Trimerización de receptor FAS
por unión a su ligando
Cascada activación vía caspasas 8 y 10
- Constricción celular
- Citoplasma denso
- Agrupamiento de las organelas
- Condensación de la cromatina
- Formación de vesículas citoplásmicas
y CA
- Fagocitosis de las células o C
- Ausencia de inflamación.
•Mutación alteración y reducción del aprox.15% función normal del complejo
 Acúmulos celulares por alteración de la fase control

5. ALPS
Características Clínicas
Linfoproliferación
 Proliferación no maligna de linfocitos (100%)
 Linfoadenopatías (87%)
 Esplenomegalia (90%)
 Hepatomegalia (75%)
Autoinmunidad
 Anemia hemolítica autoinmune (53%)
 Trombocitopenia/ Neutropenia autoinmune (31-44%)
 Glomerulonefritis (8%)
 Hepatitis autoinmune (6%)
Neoplasias
 Linfomas (Hodgkin y no Hodgkin) (9%)
 Carcinomas (tiroides, piel, hígado) (6%)

6. ALPS
Clasificación
• ALPS-FAS
• ALPS-FASLG
• ALPS-CASP10
• ALPS-U
Mutaciones gen Fas:
 Disregulación de la
homeostasis de las
poblaciones limfocitárias
>70%
casos
In 69 unrelated families, a total of 62 unique mutations have been reported.

7. ALPS-FAS
Criterios Diagnósticos
Generalmente presentes:
 Autoanticuerpos y autoinmunidad
Datos adicionales que apoyan al diagnóstico:
 Historia familiar de ALPS.
 Ensayo de Apoptosis in vitro mediada por Fas defectuosa
 Hallazgos típicos histopatológicos en nódulos linfáticos o tejido linfoide
 Linfoma
Diagnóstico Definitivo
 Mutaciones en genes que codifican proteínas de vía de apoptosis
Requeridos:
 Acumulación crónica de LT no malignos. (linfoadenopatía +/-
esplenomegalia)
 >2% de células T CD3+ CD4- CD8- (DN) TCR αβ+ en sangre periférica o
cortes histológicos

8. Eomesodermina (Eomes)
• Factor de transcripción familia T-box (parálogo a T-bet)
• Expresado en células T CD8+ efectoras y de memoria y en NKs.
Funciones:
• Induce la secreción de citosinas
• Capacidad citotóxica de las células T CD8+
• Producción IFNγ (vía T-bet independiente)
• Induce la expresión de CD122 (IL-15R)

9. Antecedentes
• Única deficiencia en Fas aumenta DN
• DN podrían derivar de T CD8+ autoreactivas o hiporeactivas que
escapan de la selección Fas-dependiente
• DN Fas-mutada aún producen IFN γ (T-bet independiente)
• DN tienen sensibilidad aumentada a IL-15
• Disregulación Eomes DN en animales  lpr/lpr
DN en pacientes  ALPS
OBJETIVO DEL ESTUDIO:
Posibles efectos de la ausencia de
Eomes en células T deficientes en
Fas.

10. Materiales y métodos
• WT: control
▫ FasWT Eomes+/+ Cd4-Cre-
• Mutante de Fas: variación
en la expresión de Eomes.
▫ Faslpr
• KO Eomes: rol de Eomes en
la patogénesis de ALPS.
▫ Faslpr EomesF/F Cd4-Cre-
▫ Faslpr EomesF/F Cd4-Cre+
 Ratones usados en el estudio
• KO de Tbx21: rol de T-bet en
la patogénesis de ALPS.
▫ FasWT T-bet+/+
▫ Faslpr T-bet+/-
▫ Faslpr T-bet-/-
• KO de IL-15: rol de IL-15 en
la patogénesis de ALPS y la
desregulación de Eomes
▫ FasWT IL-15+/+
▫ FasWT IL-15-/-
▫ Faslpr IL-15+/+
▫ Faslpr IL-15+/-
▫ Faslpr IL-15-/-

11. Resultados
Expresión de Eomes superior en
las células T mutantes de Fas que
en las WT.
Expresión de Eomes más
desregulada en las células T DN.
 Expresión de Eomes en el modelo murino

12. Resultados
 Expresión de Eomes en pacientes con ALPS
Los pacientes con ALPS tienen la
expresión de hEomes aumentada,
similar a las células memoria y las
NKs.
Expresión de Eomes más desregulada
en las células T DN.
El paciente con la enfermedad más
agresiva (Pt5) tiene niveles de
hEomes superiores a los otros
pacientes.

13. Resultados
 Papel de Eomes en la patogénesis de ALPS
La deleción de Eomes en el mutante de Fas reduce el porcentaje
porcentaje de células DN hasta niveles equivalente al ratón WT.

14. Resultados
 Papel de Eomes en la patogénesis de ALPS
La deleción de Eomes en el mutante de Fas también reduce la masa y el
número de células del bazo y los linfonodos.
En el bazo podría existir un mecanismo independiente de Eomes que
provoca un exceso celular

15. Resultados
 Papel de Eomes en la formación de autoanticuerpos anti-
dsDNA
Las manifestaciones autoinmunes de ALPS no se ven afectadas por
la deleción de Eomes en las células T.

16. Resultados
 T-bet
Desregulación moderada de la expresión de T-bet en mutantes de Fas.
La deleción de Tbx21 no afecta a la acumulación de células T DN.

17. Resultados
 IL-15
La deficiencia en IL-15
aporta protección
limitada a los mutantes
de Fas respecto la
acumulación de células T
DN y la linfoadenopatía.
IL-15 no interviene en
desregulación de Eomes.

18. Discusión
• Desregulación de la expresión de Eomes particularmente
en células T DN.
• Eomes fomenta proliferación de T DN Fas-deficientes en
tejidos linfoides.
• Correlación entre expresión de Eomes y agresividad de la
enfermedad.
• Deleción de Eomes evita linfoproliferación, no
autoinmunidad. T-bet no afecta a linfoproliferación.
• La disregulación de Eomes no depende de IL-15, pero
Eomes augmenta la respuesta a IL-15 por proliferación
de DNs.
• Las células DN proliferativas parecen provenir de CD8+
que degeneran a un estado de supervivencia autonoma.

19. Discusión
• No se descarta inducción de Eomes por citocinas en
T DN.
• Futuro: estudiar genes diana de Eomes.
• Eomes es una posible diana terapéutica en ALPS.

20. Bibliografía
• Kinjyo, I.; Gordon, S. M.; Intlekofer, A. M.; Dowdell, K.; Mooney, E. C.; Caricchio, R.;
Grupp, S. A.; Teachey, D. T. et al. (2010). Lymphoproliferation Caused by Fas
Deficiency Is Dependent on the Transcription Factor Eomesodermin. The Journal of
Immunology.
• Intlekofer, A. M.; Takemoto, N.; Wherry, E. J.; Longworth, S. A.; Northrup, J. T.;
Palanivel, V. R.; Mullen, A. C.; Gasink, C. R. et al. (2005). Effector and memory
CD8+ T cell fate coupled by T-bet and eomesodermin. Nature Immunology
• David T. Teachey, Alix E. Seif, Stephan A. Grupp (2009). Advances in the
management and understanding of autoimmune lymphoproliferative syndrome
(ALPS). British Journal of Haematology, 148, 205–216
• Waleed Al-Herz et. al. (2011) Primary immunodeficiency diseases: an update on the
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• Inmunología celular y molecular. Abul K. Abbas, Andrew H. Lichtman, Shiv Pillai.
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