Realizado para el Curso: Fisiología Animal - UNT - ZOOTECNIA - 2013.
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Recuento globular, hematocrito, Dosaje de hemoglobina, Constantes Corpusculares y velocidad de sedimentación en vertebrados
1. “Recuento globular, hematocrito,
Dosaje de hemoglobina, Constantes
Corpusculares y velocidad de
sedimentación en vertebrados”
AUTOR(es): ORTEGA RAMOS Miguel
PHOCO Magali
RUBIO GONZALES Wilson
PROFESOR: Dr. CASTILLO VIERA SEGUNDO FELIX
CURSO: FISIOLOGÍA ANIMAL
INSTITUCIÓN: Universidad Nacional de Trujillo – Facultad de
CIENCIAS BIOLÓGICAS
Trujillo – Perú
2014
2. INTRODUCCIÓN
La sangre es un fluido orgánico de gran importancia, debido a que es un valioso medio usado
para la valoración del desempeño normal del organismo, teniendo como fundamento que no
existe afección que deje de comprometer sus características.
En el desarrollo de la presente práctica, observaremos las técnicas más comunes que son
utilizadas para cuantificar y valorar sus componentes., de los cuales se realizaron los análisis
hematológicos en humanos.
Recuento globular:
Procedimiento que sirve para determinar el número de elementos formes por mm cubico de
sangre, este recuento se da para glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas.
Hematocrito:
Es la relación porcentual que existe entre el volumen del glóbulo rojo y el plasma sanguíneo.
Dosaje de Hemoglobina:
Sirve para poder determinar la cantidad porcentual de hemoglobina en la sangre. Existen
diferentes métodos, de los cuales, el de mayor uso por su grado de simplicidad y eficiencia
es el Método de la hematina alcalina.
Constantes Corpusculares:
Son los valores promedios de: Volumen del hematíe, cantidad de hemoglobina dentro del
hematíe y la concentración de la hemoglobina dentro de los glóbulos rojos. Es importante,
ya que permite precisar algunos cuadros de anemia.
Velocidad de Eritrosedimentación:
Es la velocidad por la cual sedimentan los glóbulos rojos cuando la sangre extravasada se le
coloca algún tipo de anticoagulante.
Es importante precisar que la velocidad de Eritrosedimentación se fe afectada por diferentes
factores como: temperatura, fibrinógeno, tamaño del eritrocito, etc.
3. OBJETIVOS
.- Observar e identificar las características y los mecanismos de la coagulación
sanguínea.
.- Determinar los factores de coagulación en la sangre.
.- Cuantificar por procedimientos de laboratorio El número de Glóbulos Rojos y
Glóbulos Blancos, el Volumen hematocrito, el Dosaje de Hemoglobina, la Lectura en
fotocolorímetro Beckman y los Constantes Corpusculares presentes en la sangre.
MATERIALES
.- Anticoagulantes
EDTA: ácido etilendiaminotetraacético; forma un compuesto con el Calcio
evitando la coagulación.
Citratos: De acción semejante a la anterior.
Heparina: Posee afinidad por las proteínas, como una antitrombina y
antitromboplastina.
.- Soluciones
Solución de Hayem´s: Líquido diluyente para glóbulos rojos. (200 ml)
Solución de türk: Líquido diluyente para glóbulos blancos (100 ml)
Solución de Hidróxido de Amonio al 0.4 %.
.- Lanceta de punción y jeringa hipodérmica.
.- Pipetas para glóbulos blancos y rojos.
.- Cámara cuenta glóbulos
.- Tubos de Hematocrito
.- Micropipetas para el dosaje de hemoglobina
.- Tubos para determinar la velocidad de sedimentación
.- Centrifuga
.- Fotocolorímetro
.- Microscopio
.- Pipetas Pasteur
4. .- Laminillas cubreobjetos
.- Tubos de ensayo
.- Animales de Experimentación
Para el desarrollo de esta práctica, se optó por la utilización de sangre humana.
MÉTODOS
Obtención de la muestra de sangre:
La técnica de obtención de muestra sanguínea que se desarrollo fue: Puntura
de cualquier vaso sanguíneo superficial.
Para eso, la zona elegida (zona del brazo) se desinfecta con alcohol yodado, y
después, una vez de extraer la sangre, protegemos para proteger de la
contaminación el instrumental punzante.
Para evitar la coagulación de la sangre, se hace uso de un anticoagulante.
Recuento de glóbulos rojos
Agitar cuidadosamente el frasco con sangre. Aspirar la sangre hasta la marca
de 0.5 y limpiar cualquier exceso de sangre.
Llenar la pipeta con la solución Hayem´s, quedando así una disolución de la
sangre de 1/200. Luego, sacar el tubo de goma de la pipeta, y mezclamos muy
cuidadosamente.
Poner en contacto una gota en el borde del cubreobjetos que se ha colocado
sobre la cámara, de manera que el líquido llene la cámara.
Colocar la cámara en el microscopio, y localizar el campo de visión. Contar
las células en los cuatro campos de las esquinas el del centro el de 16 cuadritos
cada uno. Incluir en cada cuadrado las células que se encuentran en la línea
superior e izquierda de cada cuadrado.
Calcular el número promedio de células por cada cuadrado pequeño.
Recuento de glóbulos blancos
La técnica de tomar la muestra es la misma que para eritrocitos, pero la pipeta
usada tiene mayor diámetro y cuando se llena con sangre hasta la marca 0,5,
se diluye con la solución de türk, quedando una dilución de 1/20
Colocar el líquido en la cámara y contar los leucocitos de los cuatro mm. De
las esquina, y luego sumarlos.
Realizar el cálculo correspondiente para glóbulos blancos.
5. Volumen Hematocrito
En un tubo de Wintrobe para hematocrito, llenar con sangre citratada hasta la
marca 100, centrifugar por 30 min, hasta que el volumen de eritrocito
permanezca invariable, y luego realizar la lectura.
Dosaje de Hemoglobina
Con una micropipeta para Hemoglobina, tomar 0,02 ml de sangre, y luego
pasarlo varias veces por un tubo, el cual contiene una solución de NH4(OH),
luego aflorar con a 5 ml con dicha solución. Dejar en reposos por un periodo
de 5 min, después, leer en fotocolorímetro.
RESULTADOS
Recuento de Glóbulos Rojos:
N: Numero de hematíes en los 80 cuadritos contados (N = 531)
Factor por mm cubico: 10000
N x 10000
Resultado: 5310000 (número de glóbulos rojos por mm cubico).
Recuento de Glóbulos Blancos:
N: Numero de glóbulos blancos contados en los cuatro milímetros cuadrados.
(N = 108)
Factor por milímetro cubico: 50
N x 50
Resultado: 5400 (número de glóbulos blancos por mm cubico).
Volumen hematocrito
Dosaje de Hemoglobina
Lectura en fotocolorímetro Beckman: 11.6 (cantidad de gramos por cada
10ml)
Constantes Corpusculares
V.C.M:
Volumen medio correspondiente a un eritrocito: 101.69 micras cubicas
Hb.C.M:
6. Cantidad media de Hemoglobina correspondiente a un eritrocito: 22.02
microgramos
C.Hb.C.M:
Concentración de la Hemoglobina dentro del eritrocito: 21.65 %
Velocidad de Eritrosedimentación
11:35 am (Inicio del procedimiento)
12:02 pm (Finalizado del procedimiento)
4mm en 30 min
Resultado: 8 mm en 1 hora (Resultado de Eritrosedimentación).
CONCLUSIONES
.- Los mecanismos que dan resultado para la coagulación de la sangre son:
Vasoconstricción
Formación del tapón plaquetario
Producción de una malla de fibrina, el cual envuelve el tapón plaquetario.
.- Los factores de coagulación de mayor importancia son:
Factores
F I Fibrinógeno: Proteína soluble al plasma
F II Protrombina: Adherida a la membrana
plaquetaria
F III Se libera del endotelio vascular a causa de
una lesión.
F IV Calcio
F V Proacelerina, adherida a la membrana
plaquetaria.
F VI -Sin Datos-
F VII Proconvertina
F VIII Factor antihemofílico. Adherido a la
membrana plaquetaria.
F IX Antihemofílico B. Adherido a la membrana
plaquetaria.
F X Factor de Stuart-Power. Adherido a la
membrana plaquetaria.
F XI Factor antihemofílico C
F XII Factor de Hageman.
F XIII Factor estabilizante de la fibrina.
7. .- Cuantificación de los procedimientos en laboratorio
Recuento de Glóbulos Rojos 5310000 (número de glóbulos rojos por
mm cubico)
Recuento de Glóbulos Blancos 5400 (número de glóbulos blancos por
mm cubico)
Dosaje de Hemoglobina 11.6 (cantidad de gramos por cada 10ml)
Constantes Corpusculares
V.C.M 101.69 micras cubicas
Hb.C.M 22.02 microgramos
C.Hb.C.M 21.65 %
Velocidad de Eritrosedimentación 8 mm en 1 hora (Resultado de
Eritrosedimentación)
8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
“Principios de la Fisiología Animal” – Cristopher D. Moyes – PEARSON EDUCACIÓN
S.A – Madrid, España, 2007
“Fisiología Animal Mecanismos y Adaptaciones” – 4° Edición – David Randall –
PANAMERICANA – Madrid, España, 2002
REREFERENCIAS DE PÁGINAS WEB
Cátedra de Fisiología I – Facultad de Medicina U.A.E.M:
http://www.kardiagnostx.com/documentos/Hemato_36.pdf
Tema 02. Coagulación sanguínea:
http://ocw.um.es/cc.-de-la-salud/fisiologia-animal/Material%20de%20clase/bloque-
1-cap-2-tema-2.-coagulacion-sanguinea.pdf
Estado Actual del mecanismo de la coagulación sanguínea – Instituto de Hematología e
Inmunología:
http://bvs.sld.cu/revistas/hih/vol17_2_01/hih01201.pdf
10. Figura2. Extraccion de sangre, para colocar en las diferentes pipetas. (Fuente: Miguel
Ortega)
Figura3. Sangre diluida con Nh4(OH) (Fuente: Miguel Ortega)