Presentación sobre el funcionamiento básico, operaciones y aplicaciones de un espectrómetro de plasmón superficial (SPR)

1. ESPECTROMETRÍA DE RESONANCIA DE
PLASMÓN SUPERFICIAL (SPR)

2. 1. CONCEPTOS

3. 1. CONCEPTOS

4. 2. PRINCIPIO
• Al incidir un haz de luz p-polarizada, en
un film metálico, se produce excitación
en electrones libres.
• Se genera un oscilación tipo onda en (xy)
y un campo electromagnético, arriba y
abajo del film.

5. 2. PRINCIPIO
• Se produce disminución de la intensidad
del haz reflejado, en ciertas λ
• Existe un ángulo de incidencia en que la
disminución es máxima (ángulo de
resonancia φSPR)
• El φSPR, depende del índice de
refracción en las caras del film

6. 3. FENÓMENO Y EQUIPO

7. 4. RESPUESTA
• Respuesta RU (Unidades
de Respuesta)
1000 RU= 0,1 ° (Δφ)
• Límites de detección
1x𝟏𝟎−𝟒 °------------- 3°
• Alta sensibilidad desde 0,1
ng/𝐜𝐦 𝟐
SENSORGRAMA

8. 5. ENSAYO Y MUESTRAS
1. Acondicionar (inyección
de buffers), evita
variaciones de pH y activa
los ligandos
2. Inyectar analito (se
espera el equilibrio)
3. Lavar compuestos no
específicos (obtención de
respuesta real)
4. Regeneración (inyección
de soluciones), rompen
enlaces analito-ligando y
retornan el equipo a su
estado inicial
LIMITE DE SATURACIÓN

9. 5. ENSAYO Y MUESTRAS
DETECCIÓN DIRECTA

10. 5. ENSAYO Y MUESTRAS
DETECCIÓN POR PATRONES

11. 5. ENSAYO Y MUESTRAS
DETECCIÓN POR PATRONES

12. 6. COSTO
BIACORE 3000 (USADO)
$ 69000,00

13. 6. APLICACIONES
• Identificación de proteínas (con MS)
• Análisis funcionales de proteínas
• Detección de impurezas en proteínas terapeúticas
• Separación de productos en reacciones enzimáticas
• Cuantificación de antibióticos y productos veterinarios
en productos de consumo (miel, carne, etc.).
• Detección de anticuerpos en animales de consumo
• Detección de presencia de GMO
• Análisis de leche
• Análisis de metales pesados a nivel de trazas (en combinación con técnicas
voltamétricas o mediante la adición de compuestos sinergicos a los ligandos como
apo-MT)
http://www.biosensingusa.com/flow-injection-spr-sensitive-
determinations-of-heavy-metal-ions.html

14. BIBLIOGRAFÍA:
• Schasfoort, R. y Tudos, A. (2008). Handbook of Surface Plasmon
Resonance. (1ra. Ed.) Cambridge, Reino Unido: The Royal Society of
Chemistry.
• Skoog, D. et al. (2007). Principles of Instrumental Analysis. (6ta. Ed.).
Belmont, USA: Thomson Higher Education.
• Ramírez, N. (2005). Biosensores, un acercamiento a la Resonancia del
Plasmón Superficial. Revista CENIC Ciencias Biológicas. 36(Especial), 1-
11.