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1  sur  69
BIOTECNOLOGIA




      Prof.ª Viviane Santos Moreira
Reimplementar a vida baseada na escolha
                humana




                    biotecnologianavida.blogspot.com
Variabilidade genética




                                      e-porteflio.blogspot.com
 virtual.epm.br




                  bulevoador.com.br
Primeiros indícios

Influência do homem
  sobre as espécies
      cultivadas
                                    inovabrasil.blogspot.com




                                  Identificar
                            características de bom
                             interesse econômico
                             Seleção inconsciente
         lce.esalq.usp.br
Melhoramento Genético
Ciência voltada para obtenção de
 genótipos superiores aos atualmente
 utilizados sob determinadas condições
 ecológicas.




          MELHORIA AMBIENTAL
Melhoramento genético

       Aumentar as frequências
              gênicas
        Aumento do percentual
         dos alelos favoráveis
            Redução dos
            desfavoráveis
Plantas                           Criação
Melhora-
           autógamas                          de novos   Posterior
 mento
              (auto-                          genótipo    seleção
Genético                                          s
           fecundação)

              kokopelli-seed-foundation.com
a.C.
Domesticação do
 trigo, cevada, ervilhas, lentilhas, bana
 na, maça, batata, milho.




                              creiaemjesus.com.br

     lituraterre.com
Era Cristã
Redescobertas da regras de
 Mendel
Métodos de melhoramento
Geneticista de plantas e animais
 domésticos
Microorganismos – produção
de antibióticos, vitaminas e
 enzimas.


                             blog.mcientifica.com.br
Milho: Zea mays


                 Resistência a    Sensíveis a
   Gene de
                 doença+baixa    doença + alta
  interesse
                 produtividade   produtividade


                           RESISTENTE
                                E
                              ALTA
                         PRODUTIVIDADE

deeproot.co.uk
Gene favorável não está disponível na
        espécie em questão.
         ESPÉCIES SILVESTRES APARENTADAS


       Cruzamento entre silvestres e cultivados

                      HÍBRIDOS

         Retrocruzamento com a espécie
       cultivada, acompanhada de seleção
      Descendentes semelhante ao parental
        cultivado com genes derivados da
                 espécie silvestre
Cruzamentos interespecíficos
• Trigo e centeio

• Triticale (cultivado, atualmente, em larga
  escala)

• Mistura de milhares de genes das duas
  espécies.


                                               biologie.uni-hamburg.de
Incompatibilidade entre espécies
Espécies A, B,e C
Espécie A e C são incompatíveis
Usa espécie ponte: B (compatível com as
 duas)

A cruza com B, que posteriormente cruza com
  C
Transferência de genes
Plantas autógamas e alógamas
 TÉCNICAS CONVENCIONAIS:
 seleção de culturas autógamas e alógamas
 hibridização no melhoramento
 retrocruzamento
 endogamia
 heterose em variedades híbridas
 seleção recorrente
 variedades sintéticas
 métodos de melhoramento de plantas
  propagadas assexualmente
Melhoramento Convencional
  Transferência de     Limitações
       genes           intrínsecas

                     Incompatibilidade
                          sexual
    Cruzamento
                     Redução do pool
                         gênico



     Processo árduo e demorado
Introdução de
genes exógenos

  Técnicas
  biotecnológicas

    Ganhos expressivos
    de produção.
Melhoramento convencional +
            entretenimento.r7.com           engenharia genética
                                               Aperfeiçoamento da exploração agrícola
                                               Aumento do rendimento de
                                               grãos, raízes e folha
blogreen.ligadonessa.com




                                               Aumento da tolerância a acidez e
                                               elementos tóxicos
            semadinjapan.blogspot.com




                                               Aumento da toletância a problemas
                                               híbridos, temperatura, ataque de
                                               microorganismos, insetos e pássaros.
Melhoramento convencional X
    Engenharia Genética
Leis de Mendel (1900)
 Desenvolvimento da genética
 Incorporar bases genéticas as técnicas
  rudimentares de melhoramento
 Surgimento da Biotecnologia




                                   portaldoagronegocio.com.br
Biotecnologia
 Técnica que utiliza organismos vivos ou partes destes, para
 fazer ou modificar produtos, melhorar plantas ou
 animais, ou desenvolver microrganismos para uso
 específico.


Obtenção de genótipos com maior
 produtividade e qualidade
Transformação genética - introdução
 controlada de um gene ou fragmento de
 DNA no genoma de uma célula receptora e
 sua posterior expressão.
Tecnologia do DNA recombinante
               Endonuclease de
                  restrição            Produzir
                                        novos
                                       arranjos



 cienciadiaria.com.br

                         CÓDIGO GENÉTICO
                            UNIVERSAL
Clonagens em plantas
Primer



                                   uel.br




  As endonucleases reconhecem
seqüência especificas de dupla-fita de
 DNA, conhecidas como seqüência de
          reconhecimento
Plasmídeo

                     Incorporar fragmentos
                    extras contendo genes que
                    não continha.

                     Facilitada pela existência
                    de plasmídios bacterianos

                     Pequenos DNA circulares
                    com capacidade de
                    replicarem de forma
                    autônoma na célula.

libertaria.pro.br
Melhoramento
                 não se restringe
                     mais ao
                   organismo


flaviovisa.com
Transformação de Plantas

Estudo de função gênica
Estudo de regulação gênica
Melhoramento genético de plantas
   Nutrição
   Resistência à fatores bióticos e abióticos

 Biofábricas
      Fármacos
      Vacinas
      Anticorpos
                                 dfrural.wordpress.com
      Biomateriais
Técnicas de transformação
Métodos diretos:

  – Eletroporação de protoplastos

  – Biobalística

Métodos indiretos:

  – Agrobacterium tumefaciens
Eletroporação de Protoplastos
 Introdução de moléculas de DNA (em plasmídeos , por
  exemplo) em células vegetais desprovidas de paredes
  celulares (protoplastos)

Obtenção de protoplasto: Incubação do tecido vegetal
em meio de digestão composto de enzimas
pectocelulolíticas;




                                 www.unimedia.fr/.../soc98/socproto6.htm
O material é incubado numa solução contendo DNA
Pulsos elétricos de alta voltagem
Abrem os poros da membrana plasmática
 DNA entra na célula onde se integra no genoma.
Os protoplastos
   reconstituem suas
   paredes, dividem-
      se, formam
colônias, calos, regenera
     m plantas por
    embriogênese ou
     organogênese
                            Nicotiana tabacum
Limitações:
  • Baixa eficiência de transformação
  • Baixa eficiência de obtenção de
    transformantes estáveis
  • Obrigatoriedade do uso de protoplastos
Técnicas de transformação
Métodos diretos:

  – Eletroporação de protoplastos

  – Biobalística

Métodos indiretos:

  – Agrobacterium tumefaciens
Biobalística
Bombardeamento de partículas
Aceleração de micropartículas que
 atravessam a parede celular e a membrana
 plasmática, de forma não letal, carreando
 DNA para o interior da célula
Meristemas apicais e as células
 embriogênicas mais eficientes


                      cgm.icb.ufmg.br
pioneersementes.com.br
Milho Bt produzido por Biobalística
                                                  Cultura de
   Genes específicos                              tecidos
    de Bacillus
    thuringiensis que
    levam à produção de
    proteínas tóxicas a
    determinadas ordens
    de insetos
    considerados pragas
    (insetos que causam
    danos econômicos)
    para a cultura.
                          http://neetescuela.com/modificacion-genetica-de-las-plantas/
 Vantagens
  • Permite a transformação de diferentes tipos
    de células e tecidos independentemente do
    genótipo
  • Envolve menos manipulação das células

 Limitações
   • Baixa freqüência de transformação estável
   • Materiais e reagentes são caros
   • A inserção de múltiplas cópias pode levar ao
     silenciamento gênico
Técnicas de transformação
Métodos diretos:

  – Eletroporação de protoplastos

  – Biobalística

Métodos indiretos:

  – Agrobacterium tumefaciens
Agrobacterium tumefaciens
• Proliferação de tumor (galha de coroa)
  promovido pela bactéria Agrobacterium
  tumefeciens
 Desviar o metabolismo
  da planta hospedeira

   Fragmento de DNA
plasmidial, denominado T-
 DNA é transferido para a
célula vegetal e integrado
     ao seu genoma.
                             genmol.blogspot.com
bib2011genetik.wikispaces.com
Engenheiro genético natural
Obtenção de linhagens desarmadas: o T-DNA
original, contendo os oncogenes, é deletado pelo
processo de dupla recombinação.
Preparação do vetor: o T-DNA contendo o(s) gene(s) de
interesse é preparado em vetores .
ufpel.edu.br
Confirmação da transformação




    roche-applied-science.com
BENEFÍCIOS
Insulina Humana




       10emtudo.com.br
Indústria farmacêutica


                                       Produção de
                      vacinas, anticorpos, proteínas
                          e produtos farmacêuticos
                      derivados de plantas, em que
                          seu custo fosse baixo e de
                                        fácil acesso.
 saude.abril.com.br
Aproveitamento de áreas devastadas
                 GANHO ECOLÓGICO
     Produzir plantas capazes de sobreviverem em
         solo já descartados pela agricultura




     Produzir alimentos nas mesmas áreas de uso
         Diminuição da degradação do solo
engenhariaagronomicamc.blogspot.com




pt.dreamstime.com
foxpragas.wordpress.com




portalatento.com
entrejovensmundomissao.blogspot.com
Soja transgênica


  Primeiro vegetal
transgênico produzido
       no Brasil
     Sul do país
     Linhagens
adaptadas ao cerrado

                        professormarcianodantas.blogspot.com
Tomate
Genes que alteram a biossíntese do
 etileno
Retardamento do amadurecimento




              blog.multivegetal.com
Arroz Dourado
Arroz transgênico
Enriquecido com B- caroteno
Precursor da vitamina A




                      souagro.com.br
Batata
Alteração das vias
 metabólicas de
 biossíntese dos
 ácidos graxos.
Maior teor de
 amido
Menor absorção
 de óleo durante a
 fritura.
                      bibianaswiechdeborba.blogspot.com
Feijão transgênico
                              CTNBio - Comissão Técnica Nacional
                              de Biossegurança aprovou a
                              liberação para cultivo comercial do
                              feijão geneticamente modificado
                              (GM) desenvolvido pela Embrapa
                              (instituição pública de pesquisa
                              brasileira)

                                   Resistente ao vírus do mosaico
                               dourado, pior inimigo dessa cultura
                                agrícola no Brasil e na América do
                                                               Sul.

mercadoetico.terra.com.br
Riscos Superalimentos
                    Superpragas
          Perda da biodiversidade




paixaoporalimentos.blogspot.com
sstrabalho.wordpress.com




        Biosegurança
 Práticas seguras, nível ambiental e da
  saúde humana.
 Impactos e riscos potenciais

 Alergias provocadas por OMG
 Aumento da resistência a antibióticos
 Novos vírus por recombinação genética

   FDA (Administração de Alimentos e
 Medicamentos) regulamenta os transgênicos
Conjunto de
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   seletivos


Direcionamento
de acasalamento    SELEÇÃO NATURAL
                          X
                  SELEÇÃO ARTIFICIAL
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    alélica




                                       formandosestadual2010.zip.net
   Interesse
  econômico
Identifica variações na sequência de DNA que
permitem diferenciar os indivíduos de uma
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                  cibpt.wordpress.com
Principais métodos
 Sinalização de genes     Desenvolvimento de
  de resistência a          mapas gênicos
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  insetos.                 Reconstituição de
 Caracterização de         pedigrees
  germoplasma              Testes de pureza
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  pais híbridos            Seleção de
 Introgressão gênica       resistência a
 Seleção auxiliada por     patógenos exóticos
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Inseminação artificial e transferência
           de embriões




                                     paixaocapixaba.com.br
      cptcursospresenciais.com.br




                            PROGRAMAS DE
                        MELHORAMENTO GENÉTICO
Eficiência de produção
                                                   Padronização de animais
                                                        Velocidade de
cavet-uss.blogspot.com




                                                          crescimento
                                                       Ganho de peso
                                                   Conformidade para corte
                                blog.faa.edu.br      Facilidade de parto
                                                    Produtividade de leite
                                                     Animais resistentes

                         cachoeiracoffees.com.br
Interesse médico-farmacêutico
  Vacas e ovelhas para produção de proteínas
   no leite.
  Redução do custo quando comparado aos
   microorganismos.




               agrorural-ms.blogspot.com
Oferta de lã
     Programas de
  melhoramento que
     geram melhor
 lã, sem necessidade
   de suplementar a
       dieta com
aminoácidos, enxofre
            .



                       interural.com
Prejuízos
   Reações alérgicas
   Perca da biodiversidade
   Não ocorrência da seleção natural
   Características não selecionadas pela
    natureza.

                  SOBREVIVÊNCIA
mst.org.br



             EMPRESA BRASILEIRA DE PESQUISA
                    AGROPECUÁRIA




                            cnpt.embrapa.br
Referências
• CARPENTIERI-PIPOLO, V. et al Culturas
  transgênicas: uma abordagem de benefícios e
  riscos. Londrina: EDUEL, 2009, 414p.
• GRIFFITHIS, A. J. F. et al Introdução a
  genética.7ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara
  Koogan, 2002,794p.

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Biologia e aplicações da biotecnologia

  • 1. BIOTECNOLOGIA Prof.ª Viviane Santos Moreira
  • 2. Reimplementar a vida baseada na escolha humana biotecnologianavida.blogspot.com
  • 3.
  • 4. Variabilidade genética e-porteflio.blogspot.com virtual.epm.br bulevoador.com.br
  • 5. Primeiros indícios Influência do homem sobre as espécies cultivadas inovabrasil.blogspot.com Identificar características de bom interesse econômico Seleção inconsciente lce.esalq.usp.br
  • 6. Melhoramento Genético Ciência voltada para obtenção de genótipos superiores aos atualmente utilizados sob determinadas condições ecológicas. MELHORIA AMBIENTAL
  • 7. Melhoramento genético Aumentar as frequências gênicas Aumento do percentual dos alelos favoráveis Redução dos desfavoráveis
  • 8. Plantas Criação Melhora- autógamas de novos Posterior mento (auto- genótipo seleção Genético s fecundação) kokopelli-seed-foundation.com
  • 9. a.C. Domesticação do trigo, cevada, ervilhas, lentilhas, bana na, maça, batata, milho. creiaemjesus.com.br lituraterre.com
  • 10. Era Cristã Redescobertas da regras de Mendel Métodos de melhoramento Geneticista de plantas e animais domésticos Microorganismos – produção de antibióticos, vitaminas e enzimas. blog.mcientifica.com.br
  • 11. Milho: Zea mays Resistência a Sensíveis a Gene de doença+baixa doença + alta interesse produtividade produtividade RESISTENTE E ALTA PRODUTIVIDADE deeproot.co.uk
  • 12. Gene favorável não está disponível na espécie em questão. ESPÉCIES SILVESTRES APARENTADAS Cruzamento entre silvestres e cultivados HÍBRIDOS Retrocruzamento com a espécie cultivada, acompanhada de seleção Descendentes semelhante ao parental cultivado com genes derivados da espécie silvestre
  • 13. Cruzamentos interespecíficos • Trigo e centeio • Triticale (cultivado, atualmente, em larga escala) • Mistura de milhares de genes das duas espécies. biologie.uni-hamburg.de
  • 14. Incompatibilidade entre espécies Espécies A, B,e C Espécie A e C são incompatíveis Usa espécie ponte: B (compatível com as duas) A cruza com B, que posteriormente cruza com C Transferência de genes
  • 15. Plantas autógamas e alógamas  TÉCNICAS CONVENCIONAIS:  seleção de culturas autógamas e alógamas  hibridização no melhoramento  retrocruzamento  endogamia  heterose em variedades híbridas  seleção recorrente  variedades sintéticas  métodos de melhoramento de plantas propagadas assexualmente
  • 16. Melhoramento Convencional Transferência de Limitações genes intrínsecas Incompatibilidade sexual Cruzamento Redução do pool gênico Processo árduo e demorado
  • 17. Introdução de genes exógenos Técnicas biotecnológicas Ganhos expressivos de produção.
  • 18. Melhoramento convencional + entretenimento.r7.com engenharia genética Aperfeiçoamento da exploração agrícola Aumento do rendimento de grãos, raízes e folha blogreen.ligadonessa.com Aumento da tolerância a acidez e elementos tóxicos semadinjapan.blogspot.com Aumento da toletância a problemas híbridos, temperatura, ataque de microorganismos, insetos e pássaros.
  • 19. Melhoramento convencional X Engenharia Genética
  • 20. Leis de Mendel (1900)  Desenvolvimento da genética  Incorporar bases genéticas as técnicas rudimentares de melhoramento  Surgimento da Biotecnologia portaldoagronegocio.com.br
  • 21. Biotecnologia Técnica que utiliza organismos vivos ou partes destes, para fazer ou modificar produtos, melhorar plantas ou animais, ou desenvolver microrganismos para uso específico. Obtenção de genótipos com maior produtividade e qualidade Transformação genética - introdução controlada de um gene ou fragmento de DNA no genoma de uma célula receptora e sua posterior expressão.
  • 22. Tecnologia do DNA recombinante Endonuclease de restrição Produzir novos arranjos cienciadiaria.com.br CÓDIGO GENÉTICO UNIVERSAL
  • 24. Primer uel.br As endonucleases reconhecem seqüência especificas de dupla-fita de DNA, conhecidas como seqüência de reconhecimento
  • 25. Plasmídeo  Incorporar fragmentos extras contendo genes que não continha.  Facilitada pela existência de plasmídios bacterianos  Pequenos DNA circulares com capacidade de replicarem de forma autônoma na célula. libertaria.pro.br
  • 26. Melhoramento não se restringe mais ao organismo flaviovisa.com
  • 27. Transformação de Plantas Estudo de função gênica Estudo de regulação gênica Melhoramento genético de plantas  Nutrição  Resistência à fatores bióticos e abióticos Biofábricas  Fármacos  Vacinas  Anticorpos dfrural.wordpress.com  Biomateriais
  • 28. Técnicas de transformação Métodos diretos: – Eletroporação de protoplastos – Biobalística Métodos indiretos: – Agrobacterium tumefaciens
  • 29. Eletroporação de Protoplastos  Introdução de moléculas de DNA (em plasmídeos , por exemplo) em células vegetais desprovidas de paredes celulares (protoplastos) Obtenção de protoplasto: Incubação do tecido vegetal em meio de digestão composto de enzimas pectocelulolíticas; www.unimedia.fr/.../soc98/socproto6.htm
  • 30. O material é incubado numa solução contendo DNA Pulsos elétricos de alta voltagem Abrem os poros da membrana plasmática  DNA entra na célula onde se integra no genoma.
  • 31. Os protoplastos reconstituem suas paredes, dividem- se, formam colônias, calos, regenera m plantas por embriogênese ou organogênese Nicotiana tabacum
  • 32. Limitações: • Baixa eficiência de transformação • Baixa eficiência de obtenção de transformantes estáveis • Obrigatoriedade do uso de protoplastos
  • 33. Técnicas de transformação Métodos diretos: – Eletroporação de protoplastos – Biobalística Métodos indiretos: – Agrobacterium tumefaciens
  • 34. Biobalística Bombardeamento de partículas Aceleração de micropartículas que atravessam a parede celular e a membrana plasmática, de forma não letal, carreando DNA para o interior da célula Meristemas apicais e as células embriogênicas mais eficientes cgm.icb.ufmg.br
  • 36. Milho Bt produzido por Biobalística Cultura de  Genes específicos tecidos de Bacillus thuringiensis que levam à produção de proteínas tóxicas a determinadas ordens de insetos considerados pragas (insetos que causam danos econômicos) para a cultura. http://neetescuela.com/modificacion-genetica-de-las-plantas/
  • 37.  Vantagens • Permite a transformação de diferentes tipos de células e tecidos independentemente do genótipo • Envolve menos manipulação das células  Limitações • Baixa freqüência de transformação estável • Materiais e reagentes são caros • A inserção de múltiplas cópias pode levar ao silenciamento gênico
  • 38. Técnicas de transformação Métodos diretos: – Eletroporação de protoplastos – Biobalística Métodos indiretos: – Agrobacterium tumefaciens
  • 39. Agrobacterium tumefaciens • Proliferação de tumor (galha de coroa) promovido pela bactéria Agrobacterium tumefeciens Desviar o metabolismo da planta hospedeira Fragmento de DNA plasmidial, denominado T- DNA é transferido para a célula vegetal e integrado ao seu genoma. genmol.blogspot.com
  • 41. Engenheiro genético natural Obtenção de linhagens desarmadas: o T-DNA original, contendo os oncogenes, é deletado pelo processo de dupla recombinação. Preparação do vetor: o T-DNA contendo o(s) gene(s) de interesse é preparado em vetores .
  • 43. Confirmação da transformação roche-applied-science.com
  • 45. Insulina Humana 10emtudo.com.br
  • 46. Indústria farmacêutica Produção de vacinas, anticorpos, proteínas e produtos farmacêuticos derivados de plantas, em que seu custo fosse baixo e de fácil acesso. saude.abril.com.br
  • 47. Aproveitamento de áreas devastadas GANHO ECOLÓGICO Produzir plantas capazes de sobreviverem em solo já descartados pela agricultura Produzir alimentos nas mesmas áreas de uso Diminuição da degradação do solo
  • 51. Soja transgênica Primeiro vegetal transgênico produzido no Brasil Sul do país Linhagens adaptadas ao cerrado professormarcianodantas.blogspot.com
  • 52. Tomate Genes que alteram a biossíntese do etileno Retardamento do amadurecimento blog.multivegetal.com
  • 53. Arroz Dourado Arroz transgênico Enriquecido com B- caroteno Precursor da vitamina A souagro.com.br
  • 54. Batata Alteração das vias metabólicas de biossíntese dos ácidos graxos. Maior teor de amido Menor absorção de óleo durante a fritura. bibianaswiechdeborba.blogspot.com
  • 55. Feijão transgênico CTNBio - Comissão Técnica Nacional de Biossegurança aprovou a liberação para cultivo comercial do feijão geneticamente modificado (GM) desenvolvido pela Embrapa (instituição pública de pesquisa brasileira) Resistente ao vírus do mosaico dourado, pior inimigo dessa cultura agrícola no Brasil e na América do Sul. mercadoetico.terra.com.br
  • 56. Riscos Superalimentos Superpragas Perda da biodiversidade paixaoporalimentos.blogspot.com
  • 57.
  • 58. sstrabalho.wordpress.com Biosegurança  Práticas seguras, nível ambiental e da saúde humana.  Impactos e riscos potenciais  Alergias provocadas por OMG  Aumento da resistência a antibióticos  Novos vírus por recombinação genética FDA (Administração de Alimentos e Medicamentos) regulamenta os transgênicos
  • 59. Conjunto de processos seletivos Direcionamento de acasalamento SELEÇÃO NATURAL X SELEÇÃO ARTIFICIAL Frequência alélica formandosestadual2010.zip.net Interesse econômico
  • 60. Identifica variações na sequência de DNA que permitem diferenciar os indivíduos de uma espécie e identificar os animais com predisposição genética cibpt.wordpress.com
  • 61. Principais métodos  Sinalização de genes  Desenvolvimento de de resistência a mapas gênicos doenças, pragas e  Heterose insetos.  Reconstituição de  Caracterização de pedigrees germoplasma  Testes de pureza  Melhoramento dos genética pais híbridos  Seleção de  Introgressão gênica resistência a  Seleção auxiliada por patógenos exóticos marcadores
  • 62. Inseminação artificial e transferência de embriões paixaocapixaba.com.br cptcursospresenciais.com.br PROGRAMAS DE MELHORAMENTO GENÉTICO
  • 63.
  • 64. Eficiência de produção Padronização de animais Velocidade de cavet-uss.blogspot.com crescimento Ganho de peso Conformidade para corte blog.faa.edu.br Facilidade de parto Produtividade de leite Animais resistentes cachoeiracoffees.com.br
  • 65. Interesse médico-farmacêutico  Vacas e ovelhas para produção de proteínas no leite.  Redução do custo quando comparado aos microorganismos. agrorural-ms.blogspot.com
  • 66. Oferta de lã Programas de melhoramento que geram melhor lã, sem necessidade de suplementar a dieta com aminoácidos, enxofre . interural.com
  • 67. Prejuízos  Reações alérgicas  Perca da biodiversidade  Não ocorrência da seleção natural  Características não selecionadas pela natureza. SOBREVIVÊNCIA
  • 68. mst.org.br EMPRESA BRASILEIRA DE PESQUISA AGROPECUÁRIA cnpt.embrapa.br
  • 69. Referências • CARPENTIERI-PIPOLO, V. et al Culturas transgênicas: uma abordagem de benefícios e riscos. Londrina: EDUEL, 2009, 414p. • GRIFFITHIS, A. J. F. et al Introdução a genética.7ª ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2002,794p.