1. CROMATOGRAFIA EN UNA Y DOS DIMENSIONES
Originalmente usada por los antiguos romanos para probar colorantes y pigmentos.
Cuando se coloca una solución con varios pigmentos sobre un trozo de papel o tela,
se pueden producir anillos concéntricos con los distintos colorantes. Sin embargo esta
técnica no fue desarrollada mas allá de una simple prueba.
En 1944, Martin desarrollo la técnica de la cromatografía en papel de filtro, en donde
la humedad en el papel hace de fase estacionaria.
Esta técnica en pocos años se difundió extraordinariamente debido a todas las
ventajas que ella presenta. Llegando a un punto donde se ha logrado separar una
parte de la componente de una célula sobre una sola fibra. Posteriormente, Stahl
introdujo mejoras a esta técnica con la cromatografía de capa delgada (TLC). Esta
última es mas versátil ya que permite utilizar literalmente cualquier sustrato fijado
sobre una placa de vidrio en una película o capa delgada.
La colocación de muestras, desarrollo y revelación, es prácticamente el mismo tipo de
operación que el de cromatografía en papel. Ambas técnicas, además de su
simplicidad, presentan dos ventajas sobresalientes sobre las técnicas de columna:
1º_ Se pueden analizar muestras de una gama (ug) o aun menos, según
las posibilidades practicas de la detección.
2º_ Es más fácil y en muchos casos ventajoso utilizar las propiedades
eluctivas de dos o mas solventes para separar los componentes de una muestra y
además se pueden procesar en forma simultánea varias muestras.
Fundamentos de la Cromatografía Plana .
Las bases teóricas de la cromatografía a
columna son validas para la cromatografía plana. La diferencia es principalmente
geométrica y no funcional en el sentido de la separación.
Los mecanismos de partición y de plato teórico son mas fáciles de visualizar en una
columna que en una hoja de papel.
Lo esencial es que tanto en cromatografía plana como en la de columna, el proceso
es debido a equilibrios continuos y sucesivos a medida que pasa la muestra con el
eluctante sobre el sustrato.
En cromatografía de columna, vimos que la nitidez de la separación es función del
volumen o tiempo de retención de las distintas fracciones separadas.
En cromatografía plana el grado de separación se
expresa en función del movimiento de cada
componente desde el lugar de siembra, relativo al
movimiento del frente del solvente a partir del
mismo punto de siembra.
Surge así el concepto de Rf (relate to front)
Rfa=a/ r ; rfb =b/ r ; etc.
La medida de los Rf representa dificultades ya que
a causa de la difusión, los componentes se
manifiestan como muchas no puntuales.
Es así que cuando se informan lo distintos Rf, se
debe aclarar la forma de mediad. Si la mancha es
simétrica; se considera el centro de la misma.

2. Otra forma es, considerar el punto de la marcha de más concentración (mas intensa coloración).
Si los problemas difusionales son notables, se desdobla el Rf en un Rf de cabeza que considera
el borde superior (si es cromatografía ascendente)
Y un Rf de cola que considera el borde inferior de la mancha (si es ascendente).
Al igual que en cromatografía de la columna, en donde los volúmenes o tiempo de
retención si bien pueden orientar a los fines de identificación dependen de las
características de las fases en contacto y otras condiciones que resultan difíciles de
reproducir, por lo que se introducen los volúmenes o tiempos de retención relativos a
una referencia, que si se mantienen constantes a una temperatura y en una fase
estacionaria dad, cuales quiera que sean las demás condiciones operatorias; en
cromatografía plana los Rf no dan seguridad a los fines de la determinación cualitativa,
por lo que se introduce el Rx, que es la relación entre los Rf de la sustancia a
determinar y de una referencia: Rx= RFa/RFx= a/ x (lo que avanza “a” con respecto a lo
que avanza la referencia “x”).
Cromatografía de papel:
Se usa un papel de celulosa purificado y de características
uniformes, de calidad semejante a la del papel de filtro.
La celulosa es un polímetro con varios miles de glucosas unidos a través de
puentes de oxigeno. Teóricamente deberían existir tres grupos OH por glucosa, pero
una buena parte de estos han sido oxidados durante la elaboración del producto a
grupos aldehído, cetona o COOH. Además el papel contiene trazas de impurezas
incluyendo cationes inorgánicos que funcionan como cationes intercambiables, sales
absorbibles o materia mineral que queda en el papel durante el proceso de fabricación.
La celulosa tiene gran afinidad por el agua y otros solventes polares y los
retiene con gran tenacidad. Estos solventes penetran en las fibras y producen
hinchamiento en el papel cambiando sus dimensiones. El papel puede adsorber mas
del 20 % de su peso en agua, sin parecer húmedo. De la cantidad de agua adsorbida
sobre las fibras dependen los distintos Rf y otros efectos diversos sobre la misma
partida de papel.
Así el papel con poco o nada de agua separa cromatograficamente por
adsorción diferencial los distintos componentes, pero con un máximo de agua
adsorbida, la separación es por partición.
Se puede mejorar la selectividad y calidad de la separación cromatografía e en
el papel, impregnando las fibras del mismo con diversas sustancias como azúcar
impalpable, alúmina, MgO, silica gel, etc.
Procedimientos experimentales:
La diferencia mas grande entre la cromatografía en
columna y la plana que esta ultima debe transcurrir en un recipiente cerrado casi
herméticamente, con una atmosfera saturada con los vapores en equilibrio con el
solvente usado con eluctante. Esta consideración es necesaria para que el eluctante
no se seque sobre el papel o placa durante el desarrollo de cromatogramas.
Las dimensiones del recipiente pueden variar desde las de un tubo de ensayo
hasta una vitrina. La temperatura no es un factor muy crítico dentro de los valores
normales. En algunos casos es conveniente trabajar a bajas temperaturas, en otras, a
temperatura relativamente alta para favorecer la separación o prevenir la
descomposición de algún componente de la muestra.

3. Los pasos a seguir son los siguientes:
Se coloca una gotita carca del borde del papel que se sumerge en el solvente
eluctante (0,5 cm por arriba del nivel del solvente eluctante). El volumen del liquido con
la muestra debe ser mínimo para que sea mas nítida la separación y neutralizar la
tendencia de difusión de la muestra durante el desarrollo, la que tiende a aumentar la
superficie de las manchas que se forman durante la separación.
Los elementos que se requieren son: un soporte para papel
Un recipiente para solvente
Una cámara cerrada.
Con respecto al sentido de la circulación podemos distinguir una cromatografía
ascendente y con una descendente.
En la primera la siembra de la muestra es en
la parte inferior. En la segunda en la parte superior.
El eluctante sube o baja por capilaridad y lleva los
distintos componentes con velocidades variables
que dependen de la naturaleza de componente
especifico y del eluctante. Si es necesario
determinar los Rf de las distintas fracciones aisladas
en el cromatogramas, se coloca una marca con un
lápiz en la orilla del papel a la altura de la mancha
muestra antes de empezar el desarrollo del
cartograma. Cuando el frente llega casi hasta el
borde superior del papel, se saca del recipiente o
cámara y se seca rápidamente con calor suave a la
estufa, indicando antes con lápiz la altura alcanzada
por el liquido. Al secar el papel se ubican las
manchas formadas y se coloca una marca con lápiz en el mismo borde del papel a la
altura de las distintas manchas.
Es conveniente colocar junto a la mancha de muestra, otra mancha patrón que
contenga los componentes que podrían estar presentes en la muestra.
De esta manera la identificación se puede realizar independiente de posibles
variaciones de Rf porque se trabaja en idénticas condiciones.
Para realizar un cromatogramas en dos dimensiones, se coloca la muestra cerca de
una esquina de un papel cuadrado y se desarrolla con el primer solvente, se seca y se
realiza el segundo cromatogramas dando vuelta el papel 90º y usando otro solvente.

4. Cromatografía radial:
Puede ser circular o elíptica. En el primer caso, se siembra en el
centro de un pepe circular apropiado (Wathman Nº1). Se agrega el eluctante con una
mecha alimentada por capilaridad. Los distintos componentes de la muestra se
desarrollan en círculos concéntricos.
La cámara hermética es eliminada, colocando el papel entre dos hojas de
vidrio. El vidrio superior debe tener un agujero en el centro para proveer el eluctante
con una mecha. Para los mejores resultados con esta técnica es necesario tener en
cuenta la afinidad entre el eluctante y el vidrio. Si hay mucha atracción entre el vidrio y
un liquido, este escurre sobre la superficie del vidrio y arrastra la muestra no
cromatografía. Este efecto se acentúa con los solventes polares y se puede eliminar
cubriendo con una película de “agua repelente” como ser la parafina.
Las ventajas de la cromatografía circular son:
1º) Rapidez (no mas de 2 horas)
2º)Separaciones nítidas. Esta técnica tiene mayor resolutivo porque al distribuirse en
anillos hay una disminución del ancho del anillo a medida que aumenta el radio.
3º) Revelador simultáneos. El papel puede cortarse en sectores y revelar cada uno de
ellos con un revelado diferente.
4ª) Por esta técnica se pueden procesar distintas muestras, sembrando en un circulo
concéntrico próximo al centro. O sembrar la muestra y una serie de sustancias de
rederencia.
Cromatografía elíptica:
Caso particular de la cromatografía circular. El solvente
asciende hacia el disco de papel por un trozo del mismo
papel que ha sido cortado ex profeso en forma radial.
El frente del solvente avanza en forma elíptica.
Desventaja los radios varia en las distintas direcciones.
Cromatografía acelerada:
Consiste en aumentar la velocidad de recorrida del solvente
sobre el papel por efectos de aplicación de una fuerza
centrifuga.
Se cortan tiras de papel y se colocan en forma
radial en un plato de centrifuga con los puntos de
siembra hacia el centro. Estas tiras son prensadas
débilmente con un disco de vidrio que se fija al plato de
la centrifuga.

5. Por desbordamiento:
Caso particular de la cromatografía descendente. Se la aplica
para el caso en que los componentes a separar tengan Rf muy próximos. La diferencia
es que el solvente cuando llega al extremo de la tira de papel se lo deja fluir
libremente.
Es por ello que es imposible el calculo de Rf y entonces de define el Rx
Deteccion de las manchas desarrolladas en el cromatogramas:
Si las manchas separadas no tienen un calor inherente, se pueden tratar con
reactivos que producen un contraste entre la mancha y el resto del papel (coloreando
selectivamente el papel) o que producen visibilidad de la mancha por calor del
producto de la reacción.
Técnicas mas comunes para la detección:
1º) – exposición de las manchas a los vapores de iodo elemental. Revelado poco
selectivo, visto que casi todos los componentes orgánicos reaccionan con iodo para
formar un compuesto con un color que puede variar desde amarillo claro hasta un
color violeta o azul.
2º) – colores producidos por la oxidación o reducción de la mancha por los
correspondientes reactivos: HNO3,K2MnO4, AgNO3, quinhidrona, hidracina, amoniaco,
glucosa, agua oxigenada, bromo, etc. En distintas condiciones de temperatura, pH,
solventes, etc.
4º) –absorción de la luz ultravioleta o infrarroja
5º) –Reacción del componente aislado con reactivos específicos que producen una
sustancia coloreada. Por ejemplo la ninhidrina reacciona con los aminoácidos
produciendo varios tonos e intensidades de azul y violeta:
6º) –acompañar la muestra con algunos de sus componentes sintetizados con átomos
radioactivos en la molécula en lugar de los correspondientes átomos normales.
7º) –autobiografía: colocar al cromatogramas en medio solido sembrado con
microorganismos cuyo aumento o descenso en la velocidad de crecimiento indique la

6. identidad y concentración de sustancias tales como antibióticos, vitaminas, hormonas,
etc.
En cromatografía de capa fina, un reactivo de aplicación general (incluido en el
caso 3º) es el permanganato potásico acido sulfúrico que oxida hasta la vaselina y la
reacción puede servir para la comprobación de toda clase de hidrocarburo.
Valoración cualitativa:
Anteriormente dijimos que una forma de identificación es
mediante la medida de los Rf o mejor aun de los Rx
El hecho de que dos manchas den iguales valores de Rf, no da seguridad
sobre si ambas corresponden al mismo soluto. Por ello se recurre a la
“espectogramatografía” que consiste en la media de los Rf de un soluto dado unos
distintos solventes (por lo general 10 o 15 solventes). Posteriormente se grafica Rf vs
Nº de solvente.
Esta gráfica si es característica del soluto incógnita.
Cuando se trabaja en técnica bidimensional,
no es posible determinar un valor de Rf. En este caso
se hace un uso de plantillas de referencia, es decir
una mezcla de los solutos que presumiblemente
están presentes en la muestra. Se efectúa una
cromatografía bidimensional, se revelan las manchas
y se coloca el cromatogramas sobre un papel
transparente y luego la solución problema se corre
sobre un papel del mismo tipo y en iguales
condiciones de trabajo, se revela y se coloca la plantilla sobre el cromatogramas. La
coincidencia de manchas corresponderá a un soluto dado.
Cuando se sospecha cuales son los componentes de la muestra problema, se pueden
sembrar junto a la mancha correspondiente, los posibles componentes. Al final del
desarrollo y revelado, igual coloración y posición implica la existencia de ese soluto en
la muestra problema.
Valoracion cuantitativa:
Un método consiste en hacer correr en forma simultanea con el
soluto a valorar una serie de soluciones que contengan cantidades crecientes y
conocidas del mismo soluto, seleccionada de tal forma que la concentración incógnita
se encuentra comprendida dentro de los valores extremos de la escala. Una
semejanza en el tamaño de la mancha corresponderá a cantidades equivalentes del
soluto.
La apreciación puede ser visual, como
un alto grado de erros (15%) o bien
apoyándose en la relación que existe entre la
superficie de la mancha y el logaritmo de la
concentración. Sedemustra que la relacios es

7. lineal por lo que si se grafica superficie vs log C, se obtiene unas series de rectas tal
que para las mismas operativas cada una de ellas corresponde a un soluto distinto, o
bien para un mismo soluto, cada recta representa una condición operativa diferente.
Otra técnica cuantitativa es la elución de la sustancia. Se corta la zona del papel
donde esta retirada la sustancia y mediante el uso de un reactivo apropiado
(disolvente) o calcinando el papel, se extrae el componente, llevándolo a solución y
haciendo uso de un reactivo se provoca una reacción de calor y así se puede
averiguar la cantidad de soluto original midiendo la absorbencia de la solución.
Densitometria:
Para ello se hace uso de un densitómetro que es un equipo que tiene
una fuente de radiación, un sistema de filtros coloreados (para aislar una banda del
espectro). Una ranura generalmente fija, un sistema fotosensible que se usa como un
detector y un sistema de engranajes que permite el arrastre de la tira de papel
haciéndola pasar a una velocidad constante sobre la ranura, la tira es transparentada y
las manchas son reveladoras. El densitómetro esta acoplado a un sistema de registro
automático que grafica distancia recorrida por la tira de papel vs una cierta señal de
desbalance del detector. La curva es aproximadamente a una gausiana y el área esta
relacionada con la cantidad de soluto en la marcha.
Cromatografía en capa delgada (T.L.C)
Los fundamentos teóricos de la TLC son los vistos para papel y columna.
La diferencia son operativas. La TLC presenta ventajas frente a la cromatografía de
papel como se mencionan el la tabla adjunta. Consiste en impregnar una placa de
vidrio, plástico o aluminio con un con un adsorbente apropiado espesor adecuado (250
micrones por lo general). Luego de un tratamiento a la capa así formada, de secado y
activación, se siembra la muestra con una micro pipeta, micro capilar o jeringa a 1,5
cm del borde inferior de la placa. Se evapora el disolvente portador de los solutos a
separar y se ubica la placa en una cámara cerrada la cual se llevara a cabo la
cromatografía correspondiente gracias a un solvente (eluyente) presente en el fondo
de la cámara, hasta una altura de 0,5 cm aproximadamente, y que satura la atmosfera
de la misma. El eluyente asciende por la capa superando la mancha de origen.asi los
diversos solutos se desplazas a velocidades características. Gracias a mecanismos de
adsorción, partición, filtración molecular e intercambio iónico. Una vez que el frente del
solvente alcanza un nivel apropiado, se saca la placa de la cámara, se seca, se
revelan los componentes de la/s muestras por procedimientos ya descriptos en
cromatografía de papel. Determinados sus RFy/o Rx, luego se evalúa
cuantitativamente por procedimientos ya vistos en cromatografía de papel u otros que
luego se indicaran. Si es necesario se “documenta” el cromatogramas.
Sustratos usados:
Se usan los correspondientes al tema a tratar de acuerdo al
diagrama “circulo-triangulo”. Los mas apropiados figuran el la tabla adjunta
(“adsorbentes para TLC”): silicagel, alúmina, poliamida, celulosa microcristalina, florisil,
cleulosa nativa. Se observa que junto al adsorbente figura la letra G, o bien H, F y en

8. algunos casos el numero 254 (esta codificación corresponde a los productos Merck). G
indica la presencia de yeso en aproximadamente un 10% que tiene como misión la de
aglutinar. H indica la no existencia de yeso ni aglutinantes orgánicos. De esta manera,
al exponer la placa a la acción de la luz UV aparecen como manchas opacas en un
fondo fluorescentes el aquellos solutos que adsorben la luz U.V. por supuesto habrá
que especificar la longitud de onda: 254 y/o 366. En caso de usar luz U.V se aconseja
proteger la vista de tales radiaciones nocivas. De tal manera que si el adsorbente
aconsejado es sílicagel GF 254 + 366 significa que se usa sílicagel con yeso y reactivo
de fluorescencia en las longitudes de onda 254 y 366 nm.
El aglutinante también funciona como sustrato cromatográficos y es importante esto
cuando se lo usa con sustancias de poica polaridad como celulosa en polvo o tierras
diatomeas. Si o efecto del aglutinante resultare nocivo se puede recurrir a uno menos
polar o bien reducir la concentración del mismo.
Preparación de las placas:
Existen diversos caminos que se clasifican en: Inmersión,
asperjado, extensión y vertido.
Inmersión: se agita enérgicamente durante 3 minutos una mezcla de 35 g de silicagel
G y 100 ml de cloroformo en un matraz de erlenmeyer cerrado. Se sumergen dos
placas desengrasadas y superpuestas en la suspensión, luego se sacan lentamente.
Después de escurrir, se separan y se evapora el disolvente.
Luego se pasa vapor por agua sobre las capas para que fragüe el yeso.
Asperjado: se puede llevar a cabo recubrimiento con el uso de spray comerciales pero
la uniformidad de la placa depende de la habilidad del operador
Vertido: requiere más tiempo, trabajo y es menos económico que el procedimiento por
extensión. Se vierte rápidamente la suspensión en su totalidad y se reparte lo mas
uniforme posible, inclinando ligueramente la mono. Luego se seca en posición
horizontal.
Extensión: es el medio más conveniente y en consecuencia más explotado. El equipo
básico diseñado por Stahl es el más usado. Mediante el mismo se pueden lograr
películas de 0,25 mm de espesor. Las placas miden aproximadamente 5 x 20 cm, 10 x
20 cm, 20 x 20 cm; en algunos casos es importante controlar perfectamente el espesor
de la placa de vidrio.

11. El equipo posee tres partes.
Un cilindro metálico rotable, un bloque metálico dentro del cual se coloca el cilindro
una tapa que abre o cierra el cilindro. El aplicador vacio se mueve a lo ancho de la
placa de izquierda a derecha para asegurar que esta bien alineada la placa. El cilindro
presenta una abertura longitudinal que inicialmente esta la parte superior y a través de
la cual se lo llena con el sustrato en suspensión. Mediante un brazo, se rota un cilindro
180º de tal forma que la abertura quede hacia abajo. El bloque metálico previamente
ha sido regulado para fijar el espesor de la copa, mediante una perilla y una escala. Se
mueve lentamente el aplicador y a velocidad constante. También existen aplicaciones
que varían constantemente el espesor. (Dando un gradiente de espesor).
El equipo Shandon, es semejante al ya descripto. Posee una plataforma que permite
lograr una superficie totalmente plana de las placas de vidrio, aun cuando estas no
posean el mismo espesor. Esta plataforma en la parte superior tiene una chapa
metálica que es presionada por una bolsa de goma mediante cilindros indispensables.
El implicador es simplemente una “caja” metálica abierta en las caras superior e
inferior. Una de las caras laterales mayores es móvil y regulable mediante tornillos, de
tal manera que insertando una planchuela de espesor conocido en la parte inferior de
la caja la cara lateral móvil apoye sobre la misma.

12. Otros equipos:
Existen otros equipos más sencillos, alguno de los cuales pueden ser caseros. Uno de
ellos consiste en una varilla de vidrio o metálica de tamaño uniforme, en los extremos
se insertan argollas de goma de espesor conocido. Se vierte en la placa la suspensión
y se hace girar la varilla lenta y uniformemente sobre la misma.
Una modificación consiste en adherir en los extremos de la placa, tela adhesiva o
planchuelas de plástico o metálicas, de espesor conocido, y hacer rodar una varilla de
vidrio sobre la misma
Existe en el mercado también una barra extensora de plástico con la que se pueden
recubrir las placas en espesores de 3.5 y 10mm.
Secado y activación
Una vez aplicada la capa adsorbente, se seca la misma con exposición al aire y luego se lleva a
estufa de calor suave, a una temperatura apropiada que no sea superior a la que pueda
soportar el sustrato sin descomponerse. Se debe aclarar que el grado de calor usado para
secar no se establece solamente por la temperatura que puede soportar el sustrato sino
también por el tipo de cromatografía que se desea realizar.
En algunos casos el sustrato es activado al ser lavado con un solvente como éter de petróleo y
seguido de desecación a baja temperatura.
Si la placa no se va a usar inmediatamente se debe guardar en desecador.
El vidrio sobre el que se aplica la capa debe estar muy limpio, libre de grasas y de materias
tensoactivas. Pueden utilizarse para su limpieza ácidos, álcalis o detergentes y luego deben ser
enjuagados con abundante agua y agua destilada.
En el laboratorio se puede disponer de los elementos para realizar estas placas pero puede
ocurrir que no se cumplan todas las condiciones que estas deben cumplir para lograr una
separación exitosa. En el mercado existen cromatoplacas y cromatofolios ya preparados, con
adsorbentes estandarizados, con granulometría exacta, espesor adecuado para el fin previsto.
Estas placas resisten el rayado, la presión y pueden ser apiladas para el traslado y conservación
sin que presenten inconvenientes
Realización de la cromatografía
Aplicación de las sustancias

13. Se preparan las soluciones en las concentraciones necesarias para cromatografiar, se debe
tratar que sean soluciones diluidas para evitar las colas, que además dependen de los
adsorbentes usados.
La siembra se hace en una línea a 1.0- 1.5cm del borde inferior, cuidando siempre que no
llegue al nivel del solvente que se encuentra en la cuba. Para la aplicación de las muestras se
recurre a a micropipetas de 5 a 10 µl, microjeringas o microcapilares. Hay diversos
proveedores de equipamiento para siembra ce muestras y en algunos casos en forma circular,
de banda o puntuales.
Existen además aplicadores diseñados para la aplicación de muchas muestras en un intervalo
mínimo de tiempo. Ademas el aplicador siembra las muestras con una velocidad uniforme.
Pistado
Cuando se deben sembrar muchas muestras en una placa pueden superponerse los
cromatogramas. Esto se puede evitar mediante el pistado de la misma. A tal fin, se trazan
líneas paralelas entre los puntos de siembra. Se puede realizar esta tarea con regla y lápiz pero
también hay disponibles en el mercado instrumentos llamados “peines” que permiten realizar
esta operación simultáneamente. O el mismo aplicador múltiple de siembra se puede utilizar
con este fin.
Elección del solvente
Se lleva a cabo mediante el diagrama círculo triángulo, de acuerdo a las características de la
muestra y el sustrato. De acuerdo a estas se elige en la serie eluotrópica aquel disolvente con
polaridad sea la conveniente.
Existe, no obstante, un procedimiento práctico que permite decidir al respecto del solvente.
Consiste en aplicar sobre el sustrato semejante al elegido para la corrida, en diferentes
lugares, siembras puntuales de la muestra a resolver y una ez evaporado el disolvente
portador de las muestras, se deja caer sobre las muestras una gota de los posibles eluyentes a
utilizar en la corrida. Se producirá una cromatografía circular en cada muestra,
a) b) c)
a) Todos los círculos de los componentes de la muestra tienen radios próximos al frente
de solvente, indican que ese disolvente tiene un poder eluotrópico demasiado alto.
b) Todos los círculos de los componentes de la muestra tienen radios muy pequeños con
respecto al frente de solvente, indican que ese disolvente tiene un poder eluotrópico
demasiado bajo.

14. c) Es el caso ideal que es la formación de círculos concéntricos bien separados y de radios
intermedios entre el punto de siembra y el frente de solvente.

15. High Perfomance Thin-Layer Chromatography (HPTLC) is...
the most advanced form of instrumental TLC, but the term does not simply imply instrumental
TLC on special high performance layers. HPTLC is an entire concept that includes a widely
standardized methodology based on scientific facts as well as the use of validated methods for
qualitative and quantitative analysis. Sophisticated instruments, controlled by an integrated
software platform ensure to the highest possible degree the usefulness, reliability, and
reproducibility of generated data. HPTLC is therefore the term for a method that meets all
quality requirements of today’s analytical labs even in a fully regulated environment.