3. DEFINICIÓN DE ELECTROFORESIS
es un método de laboratorio en el que se
utiliza una corriente eléctrica controlada
con la finalidad de separar biomoleculas
según su tamaño y carga eléctrica a
través de una matriz gelatinosa.
4. APLICACIÓN EN BIOQUÍMICA
se aplica en el campo de la Bioquímica a la
separación de compuestos que poseen
grupos ionizables (aminoácidos, péptidos, pr
oteínas, ácidos nucleídos) teniendo en
cuenta que la carga neta de estas sustancias
depende del pH del medio en que se
encuentren. Si la molécula tiene carga
positiva migrará hacia el cátodo y si tiene
carga negativa, hacia el ánodo.
5. MÉTODOS ELECTROFORÉTICOS ZONALES
Son los más comunes, dada su alta
aplicabilidad en diferentes campos. Son
útiles para lograr la separación de
mezclas complejas. Se aplican pequeñas
cantidades de la disolución de proteínas a
un soporte sólido, que se impregna con
una solución tampón.
7. ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA
Los geles de poliacrilamida se forman
por polimerización de la acrilamida por
acción de un agente entrecruzado, es
químicamente inerte, de propiedades
uniformes, capaz de ser preparado de forma
rápida y reproducible. Forma, además, geles
transparentes con estabilidad
mecánica, insolubles en agua, relativamente
no iónicos y que permiten buena
visualización de las bandas durante un
tiempo prolongado.
8. ELECTROFORESIS EN GELES DE GRADIENTES
El uso de geles de poliacrilamida que
tienen un gradiente creciente de
concentración de archilamida +
bisacrilamida, y en consecuencia un
gradiente decreciente en el tamaño del
poro, pueden tener ventajas sobre los
geles de concentraciones uniformes de
acrilamida.
9. ELECTROFORESIS EN GELES DE AGAROSA
La agarosa es un polisacárido (originalmente
obtenido de algas, como el agar-agar, pero de
composición homogénea), cuyas disoluciones
(típicamente de 0.5 a 2 %) poseen la propiedad de
permanecer liquidas por encima de 50 grados C y
formar un gel, semisólido al enfriarse. Este gel
esta constituido por una matriz o trama
tridimensional de fibras poliméricas embebida en
gran cantidad de medio líquido, que retarda el
paso de las moléculas, se usa usualmente para
separar moléculas grandes de alrededor 20.000
nucleótidos.
10. ELECTROFORESIS CAPILAR
La electroforesis capilar se basa en los
mismos principios de las técnicas
electroforéticas convencionales, pero utiliza
condiciones y tecnología distinta que nos
permiten obtener una serie de ventajas al
respecto, Esta separación de péptidos
realizada sobre un capilar de silica fundida a
potenciales elevados 20 a 30 Kv en un
campo de 400 a 500 v/cm refrigerados por
aire.
11. ELECTROFORESIS BIDIMENSIONAL
La electroforesis bidimensional se basa
en separar las proteínas en una mezcla
según sus dos propiedades
moleculares, una en cada dimensión. El
procedimiento más usado se basa en la
separación en una primera dimensión
mediante isoelectroenfoque y la segunda
dimensión según peso molecular
mediante electroforesis en poliacrilamida.
