Este documento describe diferentes técnicas utilizadas para diagnosticar leucemias mieloides agudas, incluyendo inmunohistoquímica, tinción de mieloperoxidasa, negro de Sudán y marcadores de cúmulo de diferenciación. También resume los tipos principales de leucemia mieloide aguda según la Organización Mundial de la Salud, incluyendo leucemia mieloblástica con mínima diferenciación y leucemia mieloblástica sin maduración.

1. LEUCEMIAS MIELOIDES AGUDAS

2. INMUNOHISTOQUIMICA
Técnica que se usa para identificar
moléculas específicas en diferentes
clases de tejido. El tejido se trata con
anticuerpos que se unen con la
molécula específica. Estos se pueden
ver bajo un microscopio cuando se
utiliza una reacción colorante, un
radioisótopo, oro coloidal o un colorante
fluorescente. La inmunohistoquímica
se usa para ayudar a diagnosticar
enfermedades como el cáncer y para
detectar la presencia de
microorganismos. También se usa en la
investigación básica para entender el
modo en que las células crecen y se
diferencian (se vuelven más
especializadas).

3. En las técnicas
inmunoenzimaticas se utilizan
como marcadores enzimas
capaces de hacer cambiar de
color un sustrato incoloro.

4. TINCION DE MIELOPEROXIDASA
 La demostración citoquímica de esta enzima se basa en la acción oxidante
de la peroxidasa sobre el substrato, bencidina, en presencia de peróxido de
hidrógeno, apareciendo un precipitado amarillo ocre en el lugar del
citoplasma en donde se ha producido la reacción.
 La mieloperoxidasa se sintetiza en el retículo endoplasmático rugoso, de
donde pasa a las cisternas del aparato de Golgi quedando localizada
fundamentalmente en la granulación 1ª o azurófila. Se localiza sobre todo,
en los gránulos primarios de los neutrófilos y precursores, así como en los
gránulos de los eosinófilos y monocitos.
 Dicha enzima se combina in vivo con peróxido de hidrógeno
transformándose en un potente agente bactericida, viricida y fungicida.
 La aplicación fundamental de la mieloperoxidasa se refiere a la capacidad
discriminatoria entre celularidad blástica mieloide y linfoide, ya que los
mieloblastos muy primitivos pueden ser mieloperoxidasa positivos.

5. NEGRO B DE SUDÁN
Es una coloración no enzimática útil en
patología mieloide. Tiñe los fosfolípidos
y otros lípidos, colorea los gránulos
azurófilos y específicos de los
granulocitos y tiene la ventaja de que
con el tiempo no disminuye la
actividad. Los neutrófilos segmentados
y sus precursores muestran unos
gránulos gruesos en el citoplasma de
color gris muy oscuro.

6. Que son los CD?

7. Cúmulo de diferenciación:
(Cluster of differentiation en
inglés) (CD) son moléculas
marcadoras en la superficie
celular, que reconocen ciertos
anticuerpos, usadas para la
identificación del tipo de célula,
estadio de diferenciación celular
y actividad de la misma.

8. LEUCEMIAS AGUDAS
 Las leucemias agudas son neoplasias de
los precursores de celulas
hematopoyeticas.
 La cuenta de leucocitos puede estar
disminuida, normal o aumentada.
 La mayoria de los pacientes presentan
Anemia, trombocitopenia y neutropenia
debido al reemplazo de las celulas
normales de la medula osea por celulas
leucemicas

9. Epidemiologi
a
Clinica Morfologia Citoquimica Inmunofenotipo Diagnostico
diferencial
LMA con
minima
diferenci
acion
M0
< 5% LMA
Cualquier
edad pero
principalmente
en infantes o
adultos
mayores
Anemia
Trombocitopeni
a
Neutropenia
Leucocitosis
( blastos)
> 90 %Blastos
con citoplasma
agranular
(tambien pueden
parecer
precursores).
Neutrofilos
residuales, sin
transiciones en la
maduracion.
MPO (-) < 3%
blastos
SBB (-)
CAE (-)
αNAE (-)
MPO (+) en una fraccion
de blastos por citometria
de flujo o
inmunohistoquimica
Marcadores mielodes
tempranos (+):CD34
CD38
HLA-DR CD 33.
CD13 CD117. CD33
Marcadores linfoides (-) :
CD3 CD79a CD22
CD7 (+) 40% TdT (+)
50%
Marcadores asociados a
maduracion mieloide o
monocitica (-): CD11b,
CD15,CD14,CD64,CD65
Leucemia
linfoblastica
aguda
Leucemia aguda
megacarioblastic
a
Leucemia aguda
de fenotipo
mixto
Linfoma de
celulas grandes
LMA sin
madurac
ion
M1
5 – 10% LMA
Ocurre a
cualquier edad
pero la
mayoria en
adultos (45 a)
Anemia
Trombocitopeni
a
Neutropenia
Leucocitosis
( blastos)
≥ 90 % de
blastos , algunos
con granulos
azurofilos o
bastones de
Auer
MPO o SBB
(+) > 3%
blastos
MPO (+) en cierto
porcentaje de blastos
Marcadores mielodes:
CD13 CD33 CD 117.
HLA-DR y CD34 en 70%
En general (-) a
marcadores asociados a
maduracion: CD15 o
CD65 y marcadores de
monocitos CD14 y CD64
Marcadores linfoides (-)
CD3 CD79a CD22.
CD7 (+) 30%
CD2,CD4,CD19, CD56
(+) 10-20%
Leucemia
linfoblastica
aguda
Leucemia
mielode aguda
con
diferenciacion.

10. Epidemiolo
gia
Clinica Morfologia Citoquim
ica
Inmunofenotipo Geneti
ca
Diagnostico
diferencial
LMA
con
madura
cion
M2
10 % LMA
Cualquier
edad
20 % de
pacientes
< 25 a
40% de
pacientes
> 60 a
Anemia
Trombocitope
nia
Neutropenia
Leucocitos y
% blastos
variable.
Buen
pronostico.
≥ 20 % de
blastos y
evidencia de
maduracion;
≥ 10 %
promielocitos
… neutrofilos;
< 20% de
celulas de
estirpe
monocitica
Blasto con o sin
granulos,
bastones de
Auer presentes
Puede haber
aumento de
basofilos y
eosinofilos
MPO (+)
αNAE (-)
Los blastos
expresan uno o mas
Marcadores
mielodes :CD13
CD33
CD11b CD 65 CD15
Variable: HLA-DR ,
CD34 O CD117
Marcadores linfoides
(-): CD2 CD56
CD19 CD4 (< 10%
de los casos)
CD7 (+) en 20 –
30% de los casos
Marcadores
monociticos
usualmente (-):
CD 14 CD 64
t(8:21)
20 –
30%
casos
Anemia refrectaria
con exceso de
blastos.
Leucemia mielode
aguda sin
maduracion cuando
el % de blastos es
alto.
Leucemia
mielomonocitica
aguda en casos de
monocitos
aumentados.
Clasificacion por:
Mielodisplasia Tx
alquilantes
Sx Down
Alteraciones
geneticas
recurrentes

11. Epidemiolo
gia
Clinica Morfologia Citoquim
ica
Inmunofenotipo Geneti
ca
Diagnostico
diferencial
Leuce
mia
aguda
promiel
ocitoca
M3
5 – 8% LMA
Ocurre a
cualquier
edad pero la
mayoria en
adultos (40
a)
Anemia
Trombocitope
nia
Neutropenia
Leucocitosis
(microgranula
r)
CID (factor
tisular que
se une al
factor VII)
Esquizocitos
TP y TTP
alargados
Fib bajo
Promielocitos
con mas
granulos de los
normales
(algunos que
dan apariencia
de nata)
Celulas de
Fagot (muchos
bastones de
Auer)
Celulas sin
granulos
visibles
(wright, pero
MPO +) con
nucleos
monocitoides:
Variante
microgranular
MPO
(+++)
Baja expresion o
ausencia HLA-
DR,CD34,CD11a,
CD11b
CD33 y CD13 (+)
Marcadores de
diferenciacion
granulocitica (-):
CD15, CD65
t(15:17
)
LMA con
maduracion.
Variante
microgranular vs
M5b (buscar cel.
Fagot)

12. CTH
UFCgemm
Megacarioblasto Proeritroblasto Mieloblasto Monoblasto
Prec
Linfoides
UFCe/mg UFCg/m
UFCmg UFCe UFCneu UFCeo UFCbas UFCmon

13. CLASIFICACIÓN DE LAS LEUCEMIAS AGUDAS
PROPUESTAS POR LA OMS.
 Leucemias mieloides agudas con anomalías
citogéneticas recurrentes.
 Leucemias mieloides agudas con cambios tipo
mielodisplasia
 Leucemias mieloides agudas relacionadas con
terapia
 Sarcoma mieloide
 Proliferaciones mieloides relacionadas al sindrome
de Down
 Neoplasia blastica de celulas dendriticas
plasmocitoides
 NOS (No relacionadas con las anteriores)

14. LEUCEMIA MIELOBLASTICA CON MINIMA
DIFERENCIACION. M0 (FAB)
 Mas de 90% Mieloblastos I (sin granulos con Wright)
MPO no detectable enzimaticamente(menos del 3% son
positivos, citoquimicamente y al microscopio de luz,
aunque frecuentemente son totalmente negativos)

15. LEUCEMIA MIELOBLASTICA CON MINIMA
DIFERENCIACION. M0 (FAB)
 Granulocitos normales residuales (sin transiciones en la
maduracion).
 No bastones de Auer
 CD13 CD33 CD 34
 Sin marcadores linfoides (muy parecida
morfologicamente a la leucemia de precursores B)

18. LEUCEMIA MIELOBLASTICA SIN
MADURACION (M1)
 ≥ 90% de Mieloblastos
 Bastones de Auer (granulos azurofilos cristalizados
en forma anormal, solo se observan en celulas
leucemicas)
 > 3% de mieloperoxidasa positiva,
 CD13, CD33, CD34.
 No marcadores linfoides