1. Sol Cortés de Miguel
R4 H.U San Cecilio Granada
TERAPIAS
AVANZADAS

2. medicamento TERAPIAS
AVANZADAS
TERAPI
A
GÉNICA
TERAPIA
CELULAR
SOMÁTICA
TERAPIA
INGENIERÍA
TISULAR

3. Novedad
Complejidad científica y ética
UNIÓN
EUROPEA
REGULACIÓN
LEGAL
PARLAMENTO
EUROPEO
Y
EL
CONSEJO
2007
Reglamento (CE) nº 1394/2007
sobre medicamentos de terapia
avanzada.
definiciones
clasificación

4. Medicamento de terapia avanzada uno de los siguientes
medicamentos de uso humano: de terapia génica, de terapia celular
somática, o derivado de la ingeniería tisular.
Producto derivado de la ingeniería tisular el que contiene o está
constituido por cels o tej obtenidos por ingeniería celular o tisular y tiene
la capacidad de regenerar, reparar ó sustituir un tej humano, o se utiliza
en personas o se les administra con ese fin. Puede contener cel o tej de
uso humano, animal ó ambos, como también prod cels, biomoléculas,
biomateriales, sust qcas, soportes ó matrices.
Medicamento combinado de terapia avanzada el que incorpora como
parte integral 1 ó más prod sanitarios en el sentido de la Directiva
93/42/CEE, ó 1 ó más prod sanitarios implantables activos en el sentido
de la Directiva 90/385/CEE. Su parte cel ó tisular debe también contener
cels ó tejs viables o, cuando no sean viables, debe poder ejercer una
acción en el cuerpo humano que se considere fundamental respecto de la
de los productos sanitarios mencionados.
Medicamento de terapia avanzada de uso autólogo el que contiene
tejs y céls procedentes del organismo del propio paciente, y que se le
administra.

5. Clasificación ATMP
Medicamento de terapia génica (GT, Gene Therapy)
Medicamento de terapia celular somática (sCT; somatic Cell Therapy)
Terapia de ingeniería tisular (TEP: Tissue Engineered Product)

6. Medicamento
terapia génica (GT)
Medicamento
terapia celular
somática (sCT)
-Incluye un principio activo que contiene un AN recombinante, o
está constituido por él, utilizado en seres humanos, o administrado
a los mismos, con la finalidad de regular, reparar, reemplazar,
añadir o eliminar una secuencia genética.
– Sus efectos terapéuticos, preventivos o diagnósticos están
directamente relacionados con la secuencia de ácido nucleico que
contiene, o con el producto de la expresión genética de esta
secuencia.
– No se considera medicamento de terapia génica a ninguna vacuna
frente a enfermedades infecciosas
-Contiene células o tejidos, o están constituidos por ellos, que han
sido objeto de una manipulación sustancial de modo que se hayan
alterado sus características biológicas, funciones fisiológicas o
propiedades estructurales pertinentes para el uso clínico previsto, o
por células o tejidos que no se pretenden destinar a la misma función
esencial en el receptor y en el donante.
– Se presenta con propiedades para ser usado por seres humanos, o
administrado a los mismos, con objeto de tratar, prevenir o
diagnosticar una enfermedad mediante la acción farmacológica,
inmunológica o metabólica de sus células o tejidos.

7. Terapia
ingeniería
tisular (TEP)
-Contiene células o tejidos modificados con propiedades para, o usados
en, o administrados a seres humanos con el objetivo de regenerar,
reparar o remplazar un tejido humano.
-Puede contener tanto células viables como no viables. Se excluyen de
esta categoría a aquellos productos que no contienen ninguna célula
viable y que no actúa principalmente a través de una acción metabólica.
La clasificación de los
diversos productos en una
de estas tres categorías
está sujeta a una serie de
reglas.

8. GT>TEP>sCT
En junio de 2009, el Comité de Terapias Avanzadas de EMEA adoptó su
primera recomendación científica de clasificación de un medicamento
de terapia avanzada.
se han ido clasificando
otras propuestas

10. localizado genes relacionados con enfermedades como la
HTA , la diabetes o la IC.
-Constituyen más del 80% de las más de 8.000
enfermedades raras descritas hasta ahora
- Aunque su prevalencia individual es inferior a 1 caso
por cada 2.000 habitantes, conjuntamente provocan
el 5-8% de todas las hospitalizaciones infantiles y
afectan gravemente a más de 35 millones de
ciudadanos europeos
La modificación del material genético
de una célula afecta tanto a la célula
como a sus descendientes
Todas las integraciones cromosómicas
poseen el potencial de alteración fortuita
de material genético (mutagénesis) que
puede derivar en oncogénesis u otros
graves trastornos.

11. Para ello, se emplean dos sistemas:
– In vivo: Introducir directamente el gen en las células del
tejido diana.
– Ex vivo: Obtener células del paciente, tratarlas y volver a
introducirlas (linfocitos T, hepatocitos, etc.).
Transferencia de material genético nuevo a células
de un individuo dando lugar a un beneficio
terapéutico para el mismo, consistente en corregir
defectos genéticos, bloquear ciertas alteraciones
moleculares nocivas (oncogenes) o sus efectos, y
facilitar otros tratamientos (anular la resistencia
a ciertos fármacos o incrementar la tolerancia a
otros).

12. Transfección: Adquisición de nuevo material genético por una célula
humana, por incorporación de ADN adicional.
Vectores: Sistemas que ayudan en el proceso de transferencia de un gen
exógeno a la célula, facilitando la entrada y biodisponibilidad intracelular del
mismo, de tal modo que este pueda funcionar correctamente. Pueden ser víricos
y no víricos.
Eficiencia transfectiva: Capacidad relativa para transfectar
selectivamente a una población determinada de células.

13. proceso de transformación
carga
genética
adicional
Infectan a casi todas las células
Suelen dejar solo una copia en el
genoma
Tienen una estructura genómica viral
bien conocida generalmente
Todas las etapas del proceso son
controlables
el ADN viral puede insertarse en
regiones esenciales del genoma celular
(provocando la activación de oncogenes o
de otros genes defectuosos),
pueden activar virus latentes
o transformarse en virus patológicos,
al recombinarse con el genoma celular.

14. Retrovirus Adenovirus V Adenoasociados Herpesvirus
Lugares preferentes
de inserción en el
genoma celular
Son fáciles de producir en
grandes cantidades y son
capaces de transferir genes de
forma eficiente en una amplia
cantidad de células y tejidos
Virus muy pequeños, de
organización muy simple ,
con un ADN lineal de
cadena sencilla y requieren
la coinfección con
adenovirus u otros para
replicarse
Pueden llevar grandes
secuencias de ADN extraño
insertadas
Permiten incorporar
secuencias específicas
para determinados
tejidos y marcadores
para comprobar
si las células han sido
transfectadas
Infectan células en fase no
proliferativa y pueden usarse
in vivo en ciertos casos;
además, permiten
la inserción de trozos grandes
de ADN (7 kb)
Tienen la virtud de facilitar
una expresión génica a
largo plazo en células que
no se dividen.
Al ser simples pueden
provocar menos respuesta
de la célula hospedadora
que del adenovirus
Establecern infecciones
latentes de larga duración
Sólo transfectan a
células en fase de
división
Pueden replicar in vivo en
ciertas células e activar la
síntesis de proteínas tóxicas e
inducir respuestas
inmunológicas e inflamatorias
frente a las células diana
Son difíciles de
desarrollar en grandes
cantidades.
Son enormemente diversos,
tanto en lo que se refiere al
tamaño de genoma,
organización del genoma, a
su contenido genético, a las
células sobre las que actúa,
a sus mec. patogenéticos
No pueden ser
utilizados en métodos
in vivo, porque son
peligrosos e inestables
en el torrente
sanguíneo.
Producen una expresión
sólo transitoria de los genes
transferidos al genoma: la
respuesta del hosp al virus
parece limitar la duración de la
expresión y la capacidad de
repetir la dosis.
La naturaleza de la
latencia viral es de
particular relevancia.
Por ello hasta el momento,
solo se han experimentado
con virus del herpes
simplex in vivo

15. Complejos ADN-liposomaBombardeo de
partículas de ADN
Inserción directa de AN
- Variaciones en la eficiencia de
la expresión de los genes, por
diferencias de la rigidez de los
tejidos, de la procedencia del ADN
extraño y de la propia capacidad
de transcripción intrínseca
- Potencial a corto plazo, ensayos
en protocolos de vacunación, con
resultados positivos en la inyección
directa en el músculo del gen que
codifica la proteína de matriz del
virus de la gripe A.
- ADN o ARN puro circular y
cerrado covalent, dentro del tejido
deseado.
-Técnica factible solo para det
tejidos, como el muscular, pero es
simple, económ y no es tóxica.
-Tiene potencial para llevar largas
construcciones de ADN.
-Produce unos niveles y una
persistencia de la expresión de
genes demasiado corta (días).
- Podría tener potencial como un
procedimiento de vacunación, y
como expresión de genes a un
nivel bajo pero suficiente para
provocar una resp inmunológica.
Distrofia muscular
de Duchenne,
-+
- --
-
-
-
-
-
ENLACES
ELECTROSTÁTICOS
- No existe limitación para
el tamaño del plásmido
-No pueden replicarse o
recombinarse para dar
lugar a un virus infeccioso
- No provocan respuestas
inmunes o inflamatorias;
por tanto pueden usarse en
técnicas in vivo
- Hasta el momento no se ha
conseguido una eficiencia
transfectiva satisfactoria
- La expresión de los genes
insertados suele ser muy
transitoria.

16. ADN no posee la
capacidad de
introducirse en su
tejido diana.
Azúcares
Péptidos
hormonas
técnicas de transferencia de
genes mediante receptores
complejos de
transfección
acidificación
Molec
fusiógenas
Es posible en las células en
crecimiento (especialmente
células en cultivo) durante
la división celular, cuando se
rompe la envoltura nuclear
Las células en reposo : la mayor
parte de las células del organismo
Moléculas tamaño < 9 nm
DIFUSIÓN
Moléculas de tamaño entre 9 y 25 nm
TRANSPORTE ACTIVO X POROS
necesita el reconocimiento de unas señales especiales
llamadas señales de localización nuclear (NLS)
La mayoría de los
complejos de transferencia
son >25nm
Actualmente, esta etapa
del transporte nuclear es la
más difícil de resolver
Si el vector ha de permanecer asociado al
ADN hasta el interior del núcleo, su presencia ha
de interferir con la transcripción del gen
introducido (trasgen): los transportadores
lipídicos catiónicos inhiben la transcripción
cuando tienen un exceso de cargas positivas.
Otros elementos cruciales son el
mantenimiento duradero del gen terapéutico en
las células y la regulación de su expresión según
las necesidades del organismo
Otros
problemas

17. En terapia génica, se han aprobado más de 1.400 ensayos clínicos en todo el
mundo en estos 20 años de vida, desde que se inició el primero en 1989, con la
participación de más de 5.000 pacientes.
2/3
10
%
60% son EC en Fase I, algo más de un 3% están ya
en fase III.
25% utiliza adenovirus y casi otro 25% emplea
retrovirus, un 4% virus adenoasociados, un 7%
liposomas y un 18% DNA desnudo.
El CÁNCER en 2 de cada 3 estudios, seguido de
enfermedades CV en un 9% y de las enfermedades
monogénicas y las enfermedades infecciosas, ambas
alrededor del 8%.
Gendicine®, (rAdp53), un
adenovirus que expresa
el gen supresor de tumor p53.
5
%6
EC
Enfermedades neoplásicas:
 Células tumorales modificadas:
- Para inducir una respuesta inmunológica
específica.
- Para incorporar genes productores de
citocinas (IL, TNF, INF)
 Linfocitos T modificados (inducción de citocinas).
 Inserción de genes «suicidas» (activación de fárm).
 Inserción de genes «protectores» (tolerancia a ciertos
efectos adversos).
 Inserción de genes represores de oncogenes.

18. Consideraciones sobre virus enclíticos: CHMP/GTWP/607698/085.
Estudios preclínicos previos al primer uso clínico de medicamentos de terapia
génica: CHMP/GTWP/125459/066.
Seguimiento de pacientes tratados con medicamentos de terapia génica: CHMP/
GTWP/60436/077.
Requerimientos científicos para la valoración del riesgo medioambiental de los
medicamentos de terapia génica: CHMP/GTWP/ 125491/068.
Pruebas preclinical para transmission inadvertida de líneas germinales de
vectores de transferencia génica: EMEA/273974/059.

19. 1. Oligonucleótidos antisentido
2. Oligonucleótidos específicos
3. Ribozimas
1. Oligonucleótidos antisentido
Secuencias cortas de AN diseñados para
unirse, de forma complementaria a
secuencias específicas de
ADN (formación
de ADN tríplex)
ARN (formación de
heterodúplex ARN-ADN)
bloquea la
traducción del
mensaje
genético a
proteína.
Tienen gran potencial terapéutico para inhibir la expresión de genes en patologías como el cáncer,
enfermedades autoinmunes y enfermedades infecciosas como el SIDA.
Utilidad limitada por su rápida eliminación de la circulación sistémica y por la dificultad para acceder
al núcleo celular.
Oblimersen o augmerosen (Genasense®) oligodesoxinucleótido G3139 antisentido del gen blc-2.
Autorizado para su
empleo en clínica, si
bien no con muy
buenos resultados.
En estudio como
tratamiento de leucemia
linfocítica crónica, linfoma
de células B y cáncer de
mama.
Bloquea la producción de la proteína
Bcl-2, implicada en la supervivencia de
las células neoplásicas. El bloqueo
genético de bcl-2 hace a estas células
más sensibles a la quimioterapia.

20. 2. Oligonucleótidos específicos
3. Ribozimas
Permiten reparar genes con alteraciones estructurales conocidas (mutaciones puntuales)
Se diseñan oligonucleótidos específicos para secuencias genómicas adyacentes al lugar de la
mutación, que forman enlace covalente con el nucleótido responsable de la mutación. La lesión
selectiva del nucleótido mutado, desencadena el proceso celular de reparación del ADN que conduce a
una normalización estructural y funcional del gen.
Son moléculas de ARN con actividad enzimática que producen rotura y
ligazón de las cadenas en sitios específicos.
Diferentes centros catalíticos de ribozima han sido incorporados a
ARN (oligonucleótidos) antisentido, dándole la capacidad de aparearse
con un ARN diana, provocando su corte e inactivación. Una vez que la
diana ha sido cortada, el ribozima puede disociarse de los productos
cortados y repetir el ciclo de unión, rotura y disociación, lo que
constituye una evidente ventaja sobre los oligonucleótidos antisentido
estándar.

21. La terapia celular con CM consiste en el transplante de células
diferenciadas, obtenidas a partir de CM, destinado a reparar
tejidos en los que se ha perdido la funcionalidad celular.
El nº de enfermedades para las cuales está probada la terapia celular es pequeño, aunque se
están tratando patologías sanguíneas e inmunológicas desde hace más de 50 años mediante
transplantes de médula ósea (CM adultas) o de células de la sangre de cordón umbilical (CM
fetales).
Más recientemente, están jugando un papel importante en algunos transplantes de tejidos,
como los transplantes de piel o de córnea.

22. El uso de la transferencia nuclear de la célula somática (SCNT) puede ser otra manera que las
células madre pluripotent podrían ser aisladas.
En estudios con los animales usando SCNT, los investigadores toman una célula animal normal del
huevo y le quitan el núcleo (estructura de la célula que contiene los cromosomas). El material
dejado en la célula del huevo contiene los alimentos y otros materiales de la producción de energía
que son esenciales para el desarrollo del embrión. Entonces, usando técnicas muy cuidadosas de
laboratorio, una célula somática : una celula huevo o una célula de la esperma , se pone proxima al
huevo de el cual el núcleo había sido quitado y los dos son fundidos.
La celula fundida resultante y sus inmediatos descendientes son totipotent y pronto formarán
un blastocisto. Las células de la masa interna de este blastocisto se podían, en teoría, utilizar para
desarrollar líneas pluripotent de la célula madre.

23. Líneas
celulares CELULAR
Las células
madre
pluripotent
permitirían
probar en
más tipos
de células.
quemaduras,
osteoartritis
y artritis
reumatoide
Lesión
médula
espinal
Enfermedades
Parkinson,
Alzheimer,
Huntington
Diabetes
Enfermedad
cardíaca

24. Antineoplásico ideal
Vehículo terapéutico que le permitiese llegar
específicamente al tumor
No presentar problemas de inmunidad.
Estas condiciones pueden ser cumplidas por algunos tipos celulares
del propio paciente.
CELULA
TUMORAL
LINFOCITOS
PROGENITORES
ENDOTELIALES
MACRÓFAGOS CÉLULAS NK
VEGF/FGF
FACTOR SDF-1FACTOR SDF-1
+ IL-2 in vitro
cultivo
Linfocitos
activados
Efecto
Antitumoral
Dosis IL-2
Nº cels administradasterapias
inmunomoduladoras,
especialmente con
melanomas

25. se localizan preferentemente
en las áreas tumorales.
Células tumorales infundidas
se localizan en las lesiones
metastásicas preexistentes.
Transduciendo estas células
con genes suicidas o virus
oncolíticos, se obtiene una
remisión significativa de las
lesiones tumorales.

26. Podrían localizarse
en las áreas tumorales.
CELS MADRE
ENDOTELIALES
TUMOR AL CRECER
NECESITA
VASCULARIZACIÓN
CELS MADRE
MESENQUIMATOSAS
Alojo selectivoIF GAMMA
Supervivencia
CELS PRECURSORAS
NERVIOSAS
Transduciendo estas células con genes
suicidas o virus oncolíticos

27. Construir carne viva mediante la aplicación de los
principios de la ingeniería y la combinación de
materiales inertes con células
Las técnicas actuales para sustituir órganos (trasplantes y máquinas de
diálisis renal) han salvado muchas vidas, siguen siendo soluciones imperfectas
que suponen una pesada carga para el paciente.
Por el contrario, los tejidos biológicos obtenidos por ingeniería se crean a la
medida del paciente y son inmunocompatibles.

28. Entre los primeros tejidos en ensayarse en humanos se encuentran la piel y
el cartílago, debido a que no necesitan una extensa vasculatura interna.
La mayoría de los tejidos, en cambio, sí la necesitan.
cualquier tejido de más de unos cientos de
micras de grosor necesita un sistema
vascular, para absorber el oxígeno y los
nutrientes
Esta dificultad para proporcionar suministro
sanguíneo siempre ha limitado el desarrollo de
tejidos creados por ingeniería y, por ello, han
sido objeto de una abundante investigación
que está comenzando a dar resultado.

29. Lo ideal sería construir un tejido implantable a
partir de las propias células de un paciente
Sin embargo, la capacidad de las células normales para
multiplicarse en cultivo es limitada, lo que dificulta la
obtención de suficiente tejido para un implante.
células
madre
adultas
paciente
d
o
n
a
n
t
e
Desarrollo de métodos para aislar las células
Inducirlas a proliferar
Diferenciarse para dar lugar a diversos tipos
de tejido en cultivo.
Entorno a la medida del tejido
que se pretende fabricar
En los órganos más complejos,los tipos
celulares trabajan coordinados.
Para reproducir en el tejido artificial la
funcionalidad deseada deben conservarse la
microarquitectura del tejido natural, así como las
posiciones relativas de las células entre sí.

30. En 2008, varios productos derivados de la ingeniería tisular generaron ventas anuales
de casi 1.500 millones de dólares.
La obtención de la autorización de comercialización por parte de la Agencias
Reguladoras (EMEA en Europa, FDA en Estados Unidos) sigue siendo uno de
los principales obstáculos, en parte porque las células obtenidas de personas
distintas pueden no comportarse de la misma forma y porque los receptores
pueden desarrollar diversas respuestas ante un mismo tipo de implante.
Esta impredecibilidad puede hacer que resulte difícil para las agencias
reguladoras determinar si una estructura concreta creada por ingeniería es
segura y eficaz.
Existen aspectos éticos y legales que distan mucho de estar resueltos y que
generan importantes controversias
A pesar de todo, hasta el momento al menos 70 compañías han desarrollado o
están desarrollando productos tisulares implantables, en los que las células
originarias son suministradas por el mismo receptor del implante.
Andamiajes libres de células: materiales de soporte implantables o inyectables y
componentes de la matriz del tejido.
Productos basados en células: células encapsuladas, agregados o láminas con un solo
tipo de células, dispositivos de ayuda para órganos.
Tejidos enteros: vasos sanguíneos, cartílago, hueso, vejiga urinaria, músculo cardiaco,
piel compleja.
Para ensayar
productos químicos sin
utilizar animales.

31. Ensayos de potencia para medicamentos inmunoterapeuticos basados en
células para el tratamiento de cáncer: CHMP/BWP/271475/06
Medicamentos basados en células xenogénicas: CHMP/CPWP/83508/09
Medicamentos basados en células humanas: CHMP/410869/06