Este documento resume un estudio que evaluó la actividad genotóxica del extracto metanólico de la planta Gynoxis verrucosa mediante el ensayo de micronúcleos con bloqueo de citocinesis en células de astrocitoma cerebral. Los resultados mostraron que el extracto no tuvo un efecto citostático a concentraciones de 10, 20 y 25 ug/ml, pero sí tuvo un efecto genotóxico al aumentar significativamente la frecuencia de micronúcleos a esas mismas concentraciones, lo que indica da

1. Universidad Técnica Particular de Loja Evaluación de la actividad genotóxica del extracto metanólico de Gynosis verrucosa mediante el ensayo Micronúcleos con bloqueo de Citocinesis en la línea celular Astrocitoma cerebral (D-384) Diana J. Herrera Torres Director: Dr. Natalia Bailón M.

2. DEFINICIÓN El cáncer se caracteriza por un crecimiento incontrolado y la propagación de células anormales Macdonald F. et al ,2004 La muerte por cáncer en 2007 fueron 7.6 millones personas En el 2008, los diagnósticos de cáncer fueron de 1.4 millones de personas.

3. INCIDENCIA Pulmón (25%) Próstata (15%) Colon y recto (10%) Pulmón (26%) Mama (14%) Colon y recto (10%) Iriarte, 2008 Brown, 2008 Mujeres: mama y cérvix Hombres: próstata y estómago. En 1997 al 2002 Mujeres: cérvix invasor, mama, piel, estomago Hombres: Estómago, próstata, leucemia Veniecuador, 2005 Aracno, 2006

4. TRATAMIENTO Radiación Procesosquirúrgicos Novo J., 2005 García J., 2003 Quimioterapia sistémica Navarra, 2007

5. Catharanthusroseus AGENTES ANTICANCERIGENOS 1. Alcaloides de la Vinca Podophyllumpeltatum 2.Epipodofilotoxinas 3. Taxanos 4.Camptotecinas Taxusbrevifolia Desde décadas atrás se han utilizado especies vegetales y microorganismos para obtener principios activos para la fabricación de nuevos medicamentos. Camptotecinacuminata

6. Carrión, 2007

7. Gynoxis verrucosa Malangón O. 2007

8. Gynoxis verrucosa El extracto metanólico mostró en CHO-K1 Citotóxico a <100ug/ml Citostático a <10ug/ml DL50 (ug/ml) ENSAYO MTS LÍNEA CELULAR TUMORAL HUMANA El extracto metanólico mostró IC50 = 22,06 ± 10,7ug/ml (Astudillo A., 2006)

9. Micronúcleos con bloqueo de citocinesis (CBMN) Micronúcleos evalúa la inestabilidad genética, indica rotura cromosómica, en biomonitoreo de exposición a genotóxico y sus efectos en humanos. Posibles destinos a la exposición citotóxicos o agentes genotóxicos Los MN se forman por ruptura directa del ADN

10. Objetivo General Evaluar la actividad genotóxica del extracto metanólico de Gynoxis verrucosa mediante el ensayo CBMN en la línea celular Astrocitoma cerebral (D384).

13. MATERIALES Y METODOS

14. 24 Horas 24 Horas Tratamiento Siembra Cultivar células D-384 24 Horas 24 Horas Tinción Cosecha Evaluación MATERIALES Y METODOS

15. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Figura.3.1.Efecto del extracto G. verrucosa en la proliferación celularT. de DUNETT. *P<0.00001, **P<0.008. Provoca daño puntual que interactúan directamente al ADN, indicando toxicidad.

16. INDICE DE DIVISION NUCLEAR Figura2.Índice de división nuclear T. de DUNETT. *** P<0.00001; **P< 0.00002; *P<0.00003 El IDN hace referencia a la velocidad de la división celular siendo un indicativo del grado de toxicidad. Se sabe que extracto en células CHO-K1, 10ug/ml es citostático medido por curva crecimiento clonal (Astudillo, 2006)

17. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Estableciendo que el efecto puede variar dependiendo de la naturaleza del estudio . La diferencia del modelo, la diversa sensibilidad de cada técnica

18. FRECUENCIA DE MICRONUCLEOS Figura 3. Efecto genotóxico, en las células D384, T. de DUNETT. *P> 0,00001. Hay un incremento en la frecuencia de MN conforme incrementa la concentración del extracto , por lo que creemos que los datos obtenidos se debe a la presencia de lactonas sesquiterpénicas.

19. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Las lactonas sesquiterpénicas afectan la formación del huso mitótico lo que podría indicar el incremento de micronúcleos. Se observa una actividad genotóxica por el incremento de la frecuencia de MN a partir de 1ug/ml en linfocitos humanos CBN (Toledo Z., 2007) Medido por el ensayo cometa se puede evidenciar un incremento en eldaño al ADN a partir de 0.01ug/ml. (Vintimilla A., 2007)

20. Conclusiones El extracto metanólico de Gynoxis verrucosa a las concentraciones de 10, 20 y 25ug/ml no tiene un efecto citostático en la línea celular de Astrocitoma cerebral D-384 evaluadas mediante el índice de división nuclear. El extracto metanólico de Gynoxis verrucosa tiene un efecto genotóxico produciendo un daño significativo en la línea celular de Astrocitoma cerebral D-384 evaluadas mediante la frecuencia de MN a las concentraciones probadas de 10, 20, 25ug/ml en células binucleadas.

21. GRACIAS

22. GRACIAS