O documento fornece informações sobre o cuidado correto com o botijão criogênico que armazena sêmen congelado para inseminação artificial. Explica que o botijão deve ser mantido em local ventilado e protegido, e reabastecido com nitrogênio líquido sempre que atingir 15cm de nível para manter o sêmen a -196°C. Também descreve os procedimentos para manusear e transferir o sêmen e os canecos de forma rápida para evitar danos à qualidade do material genético.

1. ABS News Pergunte ao Veterinário
Cuidados no manuseio do botijão de sêmen
Muitos fazendeiros e técnicos de inseminação artificial
têm dúvidas sobre o uso do botijão criogênico para
a armazenagem e o transporte de sêmen congelado,
única forma de conservar o material genético
adquirido de uma central de tecnologia de sêmen
bovino. Nesta seção serão respondidas algumas
perguntas que chegaram ao departamento técnico
da ABS Pecplan, demonstrando que os conhecimentos
sobre estocagem e transporte do botijão são poucos
e o sucesso de um programa de inseminação artificial
começa no manuseio adequado do sêmen.
1. Como surgiu o botijão criogênico para conservação
do sêmen congelado?
Na década de 1950 o fundador da ABS, John
Rockefeller Prentice tornou-se interessado no uso do
nitrogênio líquido para a conservação do sêmen
bovino na temperatura de -196ºC, quando vislumbrou
a grande aplicação do sêmen congelado para o
crescimento da inseminação artificial. A mistura do
gelo seco (dióxido de carbono) e o álcool absoluto
na temperatura de -79ºC era a principal forma de
conservar o sêmen congelado naquele tempo. Após
a primeira tentativa feita pela Corning Company para 2. Como o botijão criogênico é construído?
desenvolver um frasco isotérmico feito de vidro revestido
Os botijões para armazenagem de sêmen são
com metal, para conservar o nitrogênio líquido, “Rock”
recipientes isotérmicos, com duas camadas de metal
Prentice então com seus próprios recursos financeiros,
(alumínio) como “um botijão dentro de outro botijão”,
recrutou a Divisão Linde da Union Carbide para
com material isolante (folhas de alumínio e lã de vidro)
fabricar um frasco de Dewar feito de aço inoxidável.
e vácuo entre as capas internas e externas, semelhante
Os primeiros modelos, usados por muitos anos, não
a uma garrafa térmica. Os botijões para uso no campo
precisavam reabastecer com nitrogênio líquido por
possuem 6 canecos, com capacidade para receber
até 4 semanas. Graças aos novos sistemas de super
de 10 a 12 raques. Cada raque tem capacidade
isolamento, uso do alumínio e desenhos melhores, os
para 10 palhetas médias ou 20 palhetas finas. O
recipientes tornaram-se mais leves, com baixo custo
botijão recebe o nitrogênio líquido, que conserva o
de recarga, podendo permanecer até 4 meses sem
sêmen congelado a uma temperatura de -196ºC
recarga de nitrogênio líquido.
(cento e noventa e seis graus centígrados negativos)
por tempo indeterminado, desde que se mantenha
um determinado nível mínimo do líquido refrigerante,
abastecendo-o periodicamente, conforme
recomendação do fabricante do equipamento.

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3. Onde e como devo guardar o botijão na minha 4. Qual o nível mínimo de nitrogênio líquido no
propriedade? botijão e por quê?
O botijão criogênico deve ser guardado em local Os botijões criogênicos estão disponíveis em diversos
ventilado, limpo, seco e ao abrigo do sol, de preferência tamanhos, com diferentes capacidades para nitrogênio
sobre uma grade de madeira ou plástico para evitar líquido. Porém, os modelos mais comuns são aqueles
possível corrosão devido ao contato do metal com de 20 litros, para armazenar em torno de 600 palhetas
o cimento. Ele deve ser manuseado com o máximo médias ou 1200 palhetas finas. O nível do nitrogênio
cuidado para evitar danos que possam resultar em líquido é medido com a régua plástica adequada,
amassamento ou furo da capa externa e deslocamento onde deve estar com 33 cm quando cheio (20 litros).
do gargalo, que pode ocasionar a perda prematura A altura mínima é de 15 cm de nitrogênio liquido (em
do nitrogênio líquido. Para diminuir os riscos com o torno de 9 litros), e é extremamente importante que
botijão, é aconselhável a construção de uma caixa neste nível ele seja imediatamente reabastecido. Na
de madeira ou plástico para seu acondicionamento, medida em que o nitrogênio líquido evapora, ocorre
evitando que sofra choques ou movimentos muito uma troca de temperatura do meio ambiente para
bruscos, além de tombamento derramando todo o dentro da câmara onde estão as doses de sêmen.
seu conteúdo. A caixa deve conter uma camada de Toda a vez que o técnico inseminador ergue o
5 cm de isopor no fundo e uma forração nas laterais caneco para retirar o sêmen, mais ar entra na câmara
para evitar riscos e avarias. A tampa da caixa pode ser ocorrendo mais evaporação. No gargalo do botijão
vazada para possibilitar a visualização do botijão. a temperatura fica próxima de -100ºC e na boca do
botijão ela está na temperatura ambiente, crítica para

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o sêmen e onde poderão ocorrer danos irreversíveis se proteção durante o seu manuseio. Em caso de estar
a dose não for retirada rapidamente. em ambiente pouco ventilado, abra a porta para que
o vapor do nitrogênio se dissipe para o meio ambiente.
5. Como devo reabastecer o botijão com nitrogênio
líquido? 6. Para que servem as ampolas monitoras?
Quando o seu botijão estiver com 15 cm de nitrogênio, Os botijões comercializados pela ABS Pecplan são
deve ser reabastecido imediatamente. Caso baixe acompanhados de uma raque com duas ampolas
para 10 cm, significa que possui 5,5 litros restantes. Se monitoras (uma azul e outra vermelha), que servem para
a capacidade é de 20 litros, faltam aproximadamente monitorar a possível falta de nitrogênio liquido. Quando
15 litros para completá-lo. Nesse nível de 10 cm a a ampola monitora azul estiver descongelada o sêmen
evaporação é maior ainda pela troca de ar com o provavelmente está bom, mas é recomendável
ambiente toda a vez que removemos a tampa do avaliá-lo num laboratório. Quando também a
botijão para erguer o caneco. Então como regra ampola monitora vermelha estiver descongelada,
geral, abasteça seu botijão o mais rápido possível, provavelmente o sêmen está danificado e deve ser
quando atingir 15 cm de nível de nitrogênio líquido. avaliado imediatamente. Nunca retira a raque com as
O botijão deve ser reabastecido pelos representantes ampolas monitoras do botijão.
da ABS Pecplan, que estão habilitados para lidar com
o nitrogênio líquido. Tome cuidado ao reabastecê-
lo porque o nitrogênio líquido é muito frio e provoca
queimaduras quando em contato com a pele. O
recomendado é utilizar luvas apropriadas e óculos de

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7. Como devo manusear o sêmen durante a sua
retirada do botijão?
Para evitar manuseios desnecessários, deve ser
feito um inventário detalhado do sêmen, para que
as palhetas possam ser localizadas facilmente e
retiradas rapidamente do botijão, evitando exposição
á temperatura ambiente. Toda a raque contém
o número de identificação do touro na central, o
que facilita a localização do sêmen. O caneco que
contém o sêmen deverá ser levantado até no máximo
5 cm abaixo da boca do botijão para que a dose
8. Por que devo evitar a exposição do sêmen à
seja retirada. Neste manuseio é essencial o uso de
temperatura ambiente?
uma boa pinça para remover a palheta. O tempo
máximo para a total retirada do sêmen de seu interior, Porque as alterações causadas nos espermatozóides
não deve ser mais que 5 segundos para qualquer tanto na motilidade com nas membranas
tipo de embalagem (palheta media ou fina). Caso citoplasmáticas, ocorrem acima de -79ºC. Estas lesões
não consiga identificar o sêmen e retirá-lo em cinco não voltam ao normal depois que o sêmen retorna
segundos, deve-se abaixar a caneca até o fundo do para a temperatura do nitrogênio líquido. A palheta
botijão e 10 segundos depois, recomeçar a operação. fina é mais sensível e manuseios errados provocam
Após retirar o sêmen do botijão nunca o deixe sem a alterações na temperatura interna da palheta, com
tampa, para evitar evaporação do nitrogênio líquido. perda na qualidade e redução da fertilidade. O
sêmen sexado é envasado em palhetas finas (0,22
mL), contendo 2,1 milhões de espermatozóides. O
menor diâmetro e a menor concentração a tornam
mais sensível a erros de manuseio. Lembre-se que a
temperatura ambiente afeta o tempo de exposição
do sêmen na boca do botijão. Em temperaturas
ambientes de 36ºC os efeitos são mais prejudiciais do
que em temperaturas ambientes a 18ºC, por exemplo.
Correntes de vento direto na boca do botijão de sêmen
também prejudicam a qualidade do sêmen.

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9. Como devo fazer para transferir as raques ou os 10. Quais os cuidados no transporte do botijão de
canecos com sêmen de um botijão para outro? sêmen?
Quando for necessário fazer a troca de raques de um Os botijões criogênicos devem ser transportados com
botijão para outro, coloque os botijões um ao lado muito cuidado, firmemente amarrados na caçamba
do outro. Para fazer esta operação são necessárias do veículo, para evitar que tombe e derrame o
duas pessoas, sendo que uma levanta o caneco nitrogênio líquido. De preferência transportá-los na
até o gargalo, o suficiente para apanhar a raque a própria caixa de proteção. Não devemos transportar
transferir, baixando-o imediatamente até o fundo do botijões em carros de passeio, porque com os vidros
botijão, enquanto a outra pessoa levanta o caneco fechados o nitrogênio líquido ao evaporar, torna-se um
do outro botijão para introduzir a raque e colocar o gás asfixiante pela remoção do oxigênio do ambiente,
mesmo imediatamente na sua posição. Os canecos podendo provocar desmaios e morte nos casos mais
com as raques não devem ser levantados a uma altura graves. Ao movimentá-lo fazer sempre com duas
superior a 5 cm abaixo do gargalo do botijão, devendo pessoas para evitar tombamentos e danificar a sua
ser mantidos a esta altura o mínimo tempo possível. estrutura interna.
Sendo necessário tempo adicional, desça o caneco
durante 10 segundos para que volte à temperatura
do nitrogênio líquido. A raque não pode ser exposta à
temperatura ambiente por mais de 10 segundos.
Lembre-se: seu botijão criogênico é o cofre onde
estão guardadas as doses de sêmen dos reprodutores
valiosos que você escolheu para suas vacas. Então
guarde-o com muito cuidado e usufrua dos seus
Para a transferência de canecos entre botijões os benefícios.
procedimentos são muito semelhantes à transferência
Mande suas dúvidas para serem respondidas pela
de raques. Os botijões devem ser colocados um
equipe de especialistas da ABS: neimar@absnet.
ao lado do outro e depois de retiradas as tampas,
com.br
deve-se proceder com rapidez a transferência de
cada caneco. O tempo de exposição do caneco a
temperatura ambiente não deve exceder 15 segundos,
porque o caneco não conserva nitrogênio líquido no
seu interior. Devemos tomar cuidado no encaixe dos
canecos no aro separador do fundo do botijão e
também no encaixe da alça do caneco no número
do aro da boca do botijão. Esta mesma operação
deve ser realizada com todos os canecos a transferir,
terminando a operação com rapidez, precisão e
cuidado.