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Inativação e preservação dos vírus
Agentes físicos e químicos
Finalidade:
inativação vírus em programas de desinfecção
inativar vírus em vacinas
preservar vírus em amostras
Inativação por agentes físicos
Temperatura:
 Destruição → 50o
C-60o
C / 30’
→ desnaturação proteíca;
 Vírus icosaédricos →
+ estáveis a 37o
C;
 Vírus envelopados →
+ termolábeis a 37o
C.
Vírus desnudos
Vírus envelopados
Inativação por agentes físicos
Temperatura:
 Calor úmido
Fervura
Autoclavação
Pasteurização.
Inativação por agentes físicos
Temperatura: Calor seco
Bico Bunsen
DefumaçãoEstufa
Incineração
Vassoura de fogo
Inativação por agentes físicos
Radiações:
 Inativação
desnaturação do ácido nucléico;
 Radiações ionizantes
Raio X Raio gama
Inativação por agentes físicos
 Radiações não -ionizantes
Luz UV
Inativação por agentes físicos
pH:
 Estabilidade → entre
pH de 5,0 a 9,0;
 Enterovírus (exceção) → resistem pH 2,0 – 3,0 →
inativação por ácidos fortes
 Inativação
 ácidos fracos = hidróxido de Na
 álcalis = hipoclorito de Na
Inativação por agentes químicos
Agentes químicos:
 Utilização
desinfetantes
produção de vacinas inativadas;
Ação depende
tipo vírus
tempo de exposição
concentração
presença ou não de matéria orgânica.
Agentes químicos utilizados na inativação viral
Tipos Ação Exemplos
agentes oxidantes oxidação de grupos sulfidrila hipoclorito de sódio,
tintura de iodo
agentes
alcalinizantes
atravessam a camada protéica e
inativam o ácido nucléico
formaldeído, glutaraldeído
agentes
proteolíticos
desnaturam a camada protéica álcoóis,
fenóis
agentes
desnaturantes
desnaturam o ácido nucléico β-propiolactona,
acetiletilamina
Inativação por agentes químicos
Inativação por agentes químicos
Detergentes não iônicos:
 Ação → desnaturam
lipídeos do envelope;
Triton X-100,
Nonidet P40
Tween 20
Detergentes não-iônicos
Inativação por agentes químicos
Detergentes iônicos:
 Ação → desnaturam lipídeos
e podem romper protéinas
 Tipos :
aniônicos,
catiônicos
aniônicosAniônicos (-)
Catiônicos (+)
 Ex: derivados quaternários da amônia, lisol (cloridrato
benzalcônico) deoxicolato de sódio, éter, clorofórmio
Preservação viral
Temperatura:
 Ambiente (18 - 22o
C) → viabilidade viral por dias;
4o
C → viabilidade viral por semanas;
-20o
C / - 70o
C ou menos → sobrevivência por meses
ou anos
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 ↓ ou perda da infecciosidade viral.
Preservação viral
Sais:
 Sais (1 mol/L) → ↑ estabilidade de muitos vírus:
 Estabilidade viral → produção de vacinas → sais ↑potência
→ duração de semanas a T.A.
MgCl2 → picornavírus, reovírus
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Na2SO4 → herpesvírus
CaCl2 → rotavírus
Preservação viral
Liofilização:
 Consiste na retirada total de água;
 Preservação
4o
C / TA
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Inativação e preservação de vírus: agentes físicos e químicos

  • 2. Agentes físicos e químicos Finalidade: inativação vírus em programas de desinfecção inativar vírus em vacinas preservar vírus em amostras
  • 3. Inativação por agentes físicos Temperatura:  Destruição → 50o C-60o C / 30’ → desnaturação proteíca;  Vírus icosaédricos → + estáveis a 37o C;  Vírus envelopados → + termolábeis a 37o C. Vírus desnudos Vírus envelopados
  • 4. Inativação por agentes físicos Temperatura:  Calor úmido Fervura Autoclavação Pasteurização.
  • 5. Inativação por agentes físicos Temperatura: Calor seco Bico Bunsen DefumaçãoEstufa Incineração Vassoura de fogo
  • 6. Inativação por agentes físicos Radiações:  Inativação desnaturação do ácido nucléico;  Radiações ionizantes Raio X Raio gama
  • 7. Inativação por agentes físicos  Radiações não -ionizantes Luz UV
  • 8. Inativação por agentes físicos pH:  Estabilidade → entre pH de 5,0 a 9,0;  Enterovírus (exceção) → resistem pH 2,0 – 3,0 → inativação por ácidos fortes  Inativação  ácidos fracos = hidróxido de Na  álcalis = hipoclorito de Na
  • 9. Inativação por agentes químicos Agentes químicos:  Utilização desinfetantes produção de vacinas inativadas; Ação depende tipo vírus tempo de exposição concentração presença ou não de matéria orgânica.
  • 10. Agentes químicos utilizados na inativação viral Tipos Ação Exemplos agentes oxidantes oxidação de grupos sulfidrila hipoclorito de sódio, tintura de iodo agentes alcalinizantes atravessam a camada protéica e inativam o ácido nucléico formaldeído, glutaraldeído agentes proteolíticos desnaturam a camada protéica álcoóis, fenóis agentes desnaturantes desnaturam o ácido nucléico β-propiolactona, acetiletilamina Inativação por agentes químicos
  • 11. Inativação por agentes químicos Detergentes não iônicos:  Ação → desnaturam lipídeos do envelope; Triton X-100, Nonidet P40 Tween 20 Detergentes não-iônicos
  • 12. Inativação por agentes químicos Detergentes iônicos:  Ação → desnaturam lipídeos e podem romper protéinas  Tipos : aniônicos, catiônicos aniônicosAniônicos (-) Catiônicos (+)  Ex: derivados quaternários da amônia, lisol (cloridrato benzalcônico) deoxicolato de sódio, éter, clorofórmio
  • 13. Preservação viral Temperatura:  Ambiente (18 - 22o C) → viabilidade viral por dias; 4o C → viabilidade viral por semanas; -20o C / - 70o C ou menos → sobrevivência por meses ou anos Congelamento e descongelamento  ↓ ou perda da infecciosidade viral.
  • 14. Preservação viral Sais:  Sais (1 mol/L) → ↑ estabilidade de muitos vírus:  Estabilidade viral → produção de vacinas → sais ↑potência → duração de semanas a T.A. MgCl2 → picornavírus, reovírus – MgSO4 → ortomixovírus e paramixovírus Na2SO4 → herpesvírus CaCl2 → rotavírus
  • 15. Preservação viral Liofilização:  Consiste na retirada total de água;  Preservação 4o C / TA
  • 16. Preservação viral Glicerol: Álcool polihídrico Soro fetal bovino: Componente nutritivo (proteínas e aminoácidos) → ↑ tempo da preservação viral. Meio cultura celular