El documento describe la historia de la selección genética y los avances en el desarrollo de marcadores moleculares. Explica que los primeros marcadores se basaban en proteínas e isoenzimas, pero que luego se desarrollaron técnicas como RFLP, RAPD y AFLP que permiten detectar polimorfismos a nivel de ADN. Finalmente, enfatiza la necesidad de una política nacional de ciencia y tecnología en Colombia.
2. Desde la prehistoria, el hombre ha seleccionado y mejorado
especies vegetales, animales y microbianas basándose en el
fenotipo. Las mejoras genéticas eran posible gracias a la
variabilidad genética, a la heredabilidad del carácter que se
quería aislar, a la eficacia e intensidad de la selección
aplicada, y al tiempo necesario para realizar un ciclo de
selección. Sin embargo, quedan muchos aspectos
desconocidos, como son el número y efecto de los genes
implicados en la expresión de un carácter, la localización de
estos genes, y su función fisiológica. Por otra parte, la
taxonomía siempre ha estudiado características morfológicas,
lo cual requiere observaciones muy exhaustivas de los
organismos en diferentes estadios de desarrollo. Los criterios
utilizados carecen muy a menudo de definición y objetividad
y, en cualquier caso, son marcadores ambiguos debido a las
influencias ambientales
3.
4. son biomoléculas que se pueden relacionar con un rasgo
genético. Las biomoléculas que pueden ser marcadores
moleculares son las proteínas (antígenos e isoenzimas) y el DNA
(genes conocidos o fragmentos de secuencia y función
desconocida).
Cuando varios marcadores moleculares se asocian
inequívocamente con un rasgo genético, se dice que forman
un QTL (loci de rasgos cuantitativos o cuantificables).
Un marcador molecular monomórfico es invariable en todos los
organismos estudiados, pero cuando presenta diferencias en el
peso molecular, actividad enzimática, estructura, o sitios de
restricción, se dice que es polimórfico. A veces el grado de
variación es tal que se denominan hipervariable.
5. Los primeros marcadores desarrollados a finales de los 70 se
basaron en la identificación de proteínas e isoenzimas por
electroforesis en geles de almidón o poliacrilamida. Con ellos
se abrió el conocimiento de la estructura y heterogeneidad
genética entre diferentes especies, variedades, y poblaciones
de distinto origen geográfico. Pero esta técnica tenía una
limitación muy importante: no era capaz de detectar
suficiente polimorfismo entre variedades o especies próximas
debido a que las proteínas son el resultado de la expresión
génica, que puede ser distinta de unos tejidos a otros, de una
etapa de desarrollo a otra, de un medio ambiente a otro, y
de una época del año a otra.
8. RFLP (Polimorfismo en el
tamaño de los fragmentos
de restricción).
En cambio, para moléculas de DNA
de mayor tamaño, como el DNA
cromosómico, el patrón de bandas es
tan complejo que es necesario utilizar
sondas específicas para visualizar sólo
ciertos fragmentos mediante la
técnica de Southern Blot. Las sondas
de DNA para esta técnica suelen
corresponder a genes previamente
conocidos, aunque a veces se usan
se basa en la detección de fragmentos DNA preparados a partir de
de DNA de distinto peso molecular en amplificaciones inespecíficas.
diferentes organismos. Los fragmentos
más fáciles de analizar son los
pequeños derivados de la digestión del
genoma de las mitocondrias o los
cloroplastos, puesto que delecciones,
sustituciones o mutaciones pueden Aunque la RFLP evalúa sólo un tipo de
alterar significativamente el patrón de polimorfismo en cada ensayo, el
bandas identificable por electroforesis resultado es muy preciso. Los primeros
en geles de agarosa, donde migran de mapas genómicos basados en la
acuerdo con su peso molecular. distribución física de los genes en vez de
la frecuencia de entrecruzamiento se
hicieron utilizando esta técnica. Cuando
se emplea la PCR en lugar de sondas
radiactivas para visualizar los
polimorfismos, se le denomina PCR-RFLP
9. Se usa una
colección de
RAPD (DNA decanucleótidos
para amplificar por
polimórfico PCR áreas
amplificado al azar) específicas
distribuidas al azar
por el genoma
MAAP
(Múltiples La idea es similar a la
de la RAPD,
perfiles AP-PCR (PCR con desarrollándose a la vez
que ésta, aunque se
arbitrarios oligonucleótidos
cambia el diseño de los
arbitrarios)
de oligonucleótidos y el
tipo de PCR.
amplifica
ción) combina el uso de
enzimas de restricción
y oligonucleótidos
para PCR, de manera
AFLP (Polimorfismo que se obtienen
de la longitud de marcadores
moleculares muy
los fragmentos específicos sin
amplificados) necesidad de
conocer la secuencia
con anterioridad
10. aprovecha las secuencias conocidas, únicas dentro del genoma, para amplificarlas
por PCR. El polimorfismo se suele encontrar fácilmente cuando lo que se amplifican son
intrones en lugar de exones. La ventaja principal es la velocidad con la que se pueden
realizar los análisis una vez que las parejas de oligonucleótidos se han establecido
claramente.
CAPS (Secuencia
SSR (Repetición de EST (Sitios
polimórfica
secuencias etiquetados por la
amplificada y
discretas) expresión)
cortada)
SCAR (Regiones
D/TGGE (Geles de SSCP (Polimorfismo de
amplificadas
electroforesis en gradiente conformaciones
caracterizadas y desnaturalizante/térmico) monocatenarias)
secuenciadas)
11. Es de urgencia para el país
apostarle a una Política de
Nación de Ciencia y de
Tecnología, que identifique los
nichos de conocimiento a
ocupar, y promueva la
adquisición de infraestructura
necesaria y la formación de
recursos humanos con
capacidad de investigar,
desarrollar y aprovechar
tecnologías que ayuden a
mejorar la calidad de vida de los
colombianos.