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Mitocondria



              Sandra Alonso
mitocondria
Mitocondrias de una célula hepática
de rata con crestas longitudinales
(MET)
¿cómo vamos a estudiarlas?

    1.   situación y distribución
    2.   número
    3.   morfología
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Anatomía bioquímica de
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Las crestas de la MMI le confieren una
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mitocondria puede tener más de 10.000
conjuntos de sistemas de transferencia de
electrones (cadenas respiratorias) de
moléculas de ATP sintasa distribuidas por
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corazón con gran profusión de crestas y,
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Micrografía electrónica de las fases sucesivas
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Fraccionamiento de
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  en sus componentes

Estas técnicas han hecho posible estudiar las
diferentes proteínas de cada compartimiento
mitocondrial. El método mostrado, que
permite el procesamiento de un gran número
de mitocondrias al mismo tiempo, aprovecha el
hecho de que en un medio con fuerza
osmótica baja, el agua fluye hacia adentro de
la mitocondria y dilata el espacio matricial
(amarillo). Mientras que las crestas de la
membrana mitocondrial interna le permiten
desplegarse para acomodarse a la expansión,
la MME – que no tiene pliegues – se rompe,
liberando una estructura compuesta sólo por la
MMI y la matriz
Mediante centrifugación diferencial
es posible obtener fracciones enriquecidas de
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     a partir de homogenados celulares
La centrifugación separa los componentes de la célula
            en base a su tamaño y densidad




La centrifugación repetida a velocidades progresivamente mayores
acaba fraccionando los homogenados celulares en sus componentes
Transferencia de electrones a través de los tres
   complejos enzimáticos respiratorios en la MMI




Se indica la forma y el tamaño de cada complejo. Durante la transferencia de e-
desde el NADH hasta le O2 (líneas rojas), los p+ procedentes del H2O son
bombeados a través de la membrana por cada uno de los complejos enzimáticos
respiratorios. La ubiquinona (Q) y el citocromo c (c) actúan como transportadores
móviles que transportan electrones desde un complejo al siguiente
Mecanismo general de la fosforilación oxidativa




Cuando un e- de alta energía es transferido a lo largo de la cadena de transporte
de e-, parte de la energía liberada se utiliza para impulsar la acción de 3 complejos
enzimáticos que bombean H+ hacia el espacio intermembrana. Estos protones
provocan un gradiente electroquímico a través de la MMI que impulsa a los H+ a
volver hacia la matriz a través de la ATP sintasa, un complejo proteico
transmembrana que utiliza la energía del flujo de protones para sintetizar ATP a
partir de ADP y Pi en la matriz.
El potencial redox aumenta
a medida que se avanza por
 la cadena de transporte de
   electrones mitocondrial

El mayor incremento del
potencial redox ocurre en
cada uno de los 3 complejos
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como resulta necesario para
que cada uno de ellos pueda
bombear protones
ATP sintasa




Biolcel.VIDEOSFuncionamiento-ATPsintasa[www.savevid.com].mp4
La ATP sintasa en un mecanismo reversible acoplado
que puede transformar la energía del gradiente de H+
     en energía de enlace químico o viceversa
Importancia del transporte de H+
             en las bacterias

A.En una bacteria aeróbica, se genera un
gradiente electroquímico de H+ a través de la
MP mediante una cadena respiratoria y luego
ese gradiente será utilizado para transportar
algunos nutrientes al interior de la bacteria y
producir ATP.

B. La misma bacteria, pero en condiciones
anaeróbicas, obtendrá ATP de la glucólisis.
Parte de ese ATP será hidrolizado por la ATP
sintasa para generar un gradiente
electroquímico de H+ impulsará los mismos
procesos de transporte que dependen de la
cadena respiratoria en A.
Algunos procesos de transporte activo impulsados por
         el gradiente EQ a través de la MMI




El piruvato, el fosfato inorgánico y el ADP entran a la matriz mitocondrial,
mientras que el ATP es bombeado hacia el exterior. La carga de cada
una de las moléculas se indica con respecto al potencial de membrana,
que es negativo en el interior. La MME es permeable a todos estos
compuestos
¿Cómo son bombeados los protones a través
           de las membranas?




                     Cuando un electrón pasa por la
                     cadena de transporte de electrones
                     embebida en la BL, en cada paso
                     puede captar y liberar un protón.
                     En este esquema, el transportador
                     de electrones B capta un protón
                     (H+) de un lado de la membrana
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Resumen del metabolismo transductor de
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                     mitocondria




En la FO, la energía liberada por la oxidación de NADH a NAD+ es utilizada, a
través de un proceso de conversión energética en la membrana (transferencia
de electrones, bombeo de protones y flujo de protones a través de la ATP
sintasa), para los requisitos energéticos de la fosforilación de ADP a ATP. Los
electrones de alta energía cedidos por el NADH se desplazan a través de una
cadena de transporte de electrones de la membrana y finalmente se combinan
con O2 molecular y con H+ y forman H2O. La ecuación neta para este proceso
de transferencia de electrones es:
        NADH + ½ O2 + H+  NAD+ + H2O, y 2e- que pasan hasta el O2
Tejido adiposo adulto,   Tejido adiposo joven,
 unilocular o blanco      multilocular o pardo
tejido adiposo adulto




                        tejido adiposo joven
Bibliografía:
•   ALBERTS B. – JOHNSON A. – LEWIS J. – RAFF M. – ROBERTS K. – WALTER P.:
    Biología molecular de la célula ( 3ª y 4ª edición2004) – Editorial Omega

•   ALBERTS B. – JOHNSON A. – LEWIS J. – RAFF M. – ROBERTS K. – WALTER P.:
    Molecular Biology of the Cell (5ª2007) – Garland Science

•   ALBERTS. B. BRAY D. – HOPKIN K. – JOHNSON A.  LEWIS J.  RAFF M. 
    ROBERTS K.  WALTER P.: Introducción a la Biología Celular (2ª edición2006) –
    Editorial Médica Panamericana

•   BECKER W. M. – KLEINSMITH L. – J. HARDIN J.: El mundo de la célula (6ª edición–
    2007) – Editorial Pearson-Addison Westey

•   COOPER G. M.: La célula (2ª edición2002) – Editorial Marban

•   KARP G.: Biología celular y molecular – (4ª edición–2006) – Editorial Mc Graw Hill
    Interamericana

•   NELSON D. L. – COX M. M.: Lehninger–Principios de Bioquímica (2ª edición–1993) –
    Editorial Omega

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mitocondria

  • 1. Mitocondria Sandra Alonso
  • 2.
  • 4. Mitocondrias de una célula hepática de rata con crestas longitudinales (MET)
  • 5. ¿cómo vamos a estudiarlas? 1. situación y distribución 2. número 3. morfología 4. tamaño 5. estructura 6. estudio 7. biogénesis 8. procesos que ocurren en las mitocondrias
  • 6.
  • 7. Forman una parte importante del volumen celular
  • 9.
  • 10. Complejos enzimáticos respiratorios y transportadores difusibles de la MMI
  • 11. Complejos enzimáticos respiratorios de MMI y ATP sintasa
  • 12. Anatomía bioquímica de una mitocondria Las crestas de la MMI le confieren una gran área superficial. La MMI de una sola mitocondria puede tener más de 10.000 conjuntos de sistemas de transferencia de electrones (cadenas respiratorias) de moléculas de ATP sintasa distribuidas por toda su superficie. Las mitocondrias del corazón con gran profusión de crestas y, por lo tanto, con un área de membrana mucho mayor, tienen más de tres veces el número de conjuntos de sistemas de transferencia electrónica que las mitocondrias hepáticas
  • 13. Micrografía electrónica de las fases sucesivas (A – C) de la división de una mitocondria
  • 14. Fraccionamiento de mitocondrias purificadas en sus componentes Estas técnicas han hecho posible estudiar las diferentes proteínas de cada compartimiento mitocondrial. El método mostrado, que permite el procesamiento de un gran número de mitocondrias al mismo tiempo, aprovecha el hecho de que en un medio con fuerza osmótica baja, el agua fluye hacia adentro de la mitocondria y dilata el espacio matricial (amarillo). Mientras que las crestas de la membrana mitocondrial interna le permiten desplegarse para acomodarse a la expansión, la MME – que no tiene pliegues – se rompe, liberando una estructura compuesta sólo por la MMI y la matriz
  • 15. Mediante centrifugación diferencial es posible obtener fracciones enriquecidas de todos los organelos celulares a partir de homogenados celulares
  • 16. La centrifugación separa los componentes de la célula en base a su tamaño y densidad La centrifugación repetida a velocidades progresivamente mayores acaba fraccionando los homogenados celulares en sus componentes
  • 17.
  • 18. Transferencia de electrones a través de los tres complejos enzimáticos respiratorios en la MMI Se indica la forma y el tamaño de cada complejo. Durante la transferencia de e- desde el NADH hasta le O2 (líneas rojas), los p+ procedentes del H2O son bombeados a través de la membrana por cada uno de los complejos enzimáticos respiratorios. La ubiquinona (Q) y el citocromo c (c) actúan como transportadores móviles que transportan electrones desde un complejo al siguiente
  • 19. Mecanismo general de la fosforilación oxidativa Cuando un e- de alta energía es transferido a lo largo de la cadena de transporte de e-, parte de la energía liberada se utiliza para impulsar la acción de 3 complejos enzimáticos que bombean H+ hacia el espacio intermembrana. Estos protones provocan un gradiente electroquímico a través de la MMI que impulsa a los H+ a volver hacia la matriz a través de la ATP sintasa, un complejo proteico transmembrana que utiliza la energía del flujo de protones para sintetizar ATP a partir de ADP y Pi en la matriz.
  • 20. El potencial redox aumenta a medida que se avanza por la cadena de transporte de electrones mitocondrial El mayor incremento del potencial redox ocurre en cada uno de los 3 complejos enzimáticos respiratorios, como resulta necesario para que cada uno de ellos pueda bombear protones
  • 22. La ATP sintasa en un mecanismo reversible acoplado que puede transformar la energía del gradiente de H+ en energía de enlace químico o viceversa
  • 23. Importancia del transporte de H+ en las bacterias A.En una bacteria aeróbica, se genera un gradiente electroquímico de H+ a través de la MP mediante una cadena respiratoria y luego ese gradiente será utilizado para transportar algunos nutrientes al interior de la bacteria y producir ATP. B. La misma bacteria, pero en condiciones anaeróbicas, obtendrá ATP de la glucólisis. Parte de ese ATP será hidrolizado por la ATP sintasa para generar un gradiente electroquímico de H+ impulsará los mismos procesos de transporte que dependen de la cadena respiratoria en A.
  • 24. Algunos procesos de transporte activo impulsados por el gradiente EQ a través de la MMI El piruvato, el fosfato inorgánico y el ADP entran a la matriz mitocondrial, mientras que el ATP es bombeado hacia el exterior. La carga de cada una de las moléculas se indica con respecto al potencial de membrana, que es negativo en el interior. La MME es permeable a todos estos compuestos
  • 25. ¿Cómo son bombeados los protones a través de las membranas? Cuando un electrón pasa por la cadena de transporte de electrones embebida en la BL, en cada paso puede captar y liberar un protón. En este esquema, el transportador de electrones B capta un protón (H+) de un lado de la membrana cuando acepta un electrón (e-) del transportador A y libera el protón al otro lado de la membrana cuando cede su electrón al transportador C.
  • 26. Resumen del metabolismo transductor de energía en las mitocondrias
  • 27.
  • 28. Diagrama simplificado de las tres etapas del catabolismo que conducen desde el alimento hasta los productos residuales
  • 29. Principal transformación energética que ocurre en la mitocondria En la FO, la energía liberada por la oxidación de NADH a NAD+ es utilizada, a través de un proceso de conversión energética en la membrana (transferencia de electrones, bombeo de protones y flujo de protones a través de la ATP sintasa), para los requisitos energéticos de la fosforilación de ADP a ATP. Los electrones de alta energía cedidos por el NADH se desplazan a través de una cadena de transporte de electrones de la membrana y finalmente se combinan con O2 molecular y con H+ y forman H2O. La ecuación neta para este proceso de transferencia de electrones es: NADH + ½ O2 + H+  NAD+ + H2O, y 2e- que pasan hasta el O2
  • 30. Tejido adiposo adulto, Tejido adiposo joven, unilocular o blanco multilocular o pardo
  • 31. tejido adiposo adulto tejido adiposo joven
  • 32. Bibliografía: • ALBERTS B. – JOHNSON A. – LEWIS J. – RAFF M. – ROBERTS K. – WALTER P.: Biología molecular de la célula ( 3ª y 4ª edición2004) – Editorial Omega • ALBERTS B. – JOHNSON A. – LEWIS J. – RAFF M. – ROBERTS K. – WALTER P.: Molecular Biology of the Cell (5ª2007) – Garland Science • ALBERTS. B. BRAY D. – HOPKIN K. – JOHNSON A.  LEWIS J.  RAFF M.  ROBERTS K.  WALTER P.: Introducción a la Biología Celular (2ª edición2006) – Editorial Médica Panamericana • BECKER W. M. – KLEINSMITH L. – J. HARDIN J.: El mundo de la célula (6ª edición– 2007) – Editorial Pearson-Addison Westey • COOPER G. M.: La célula (2ª edición2002) – Editorial Marban • KARP G.: Biología celular y molecular – (4ª edición–2006) – Editorial Mc Graw Hill Interamericana • NELSON D. L. – COX M. M.: Lehninger–Principios de Bioquímica (2ª edición–1993) – Editorial Omega