BQM CL

1. DILUCIONES Y ESTÁNDARES
Muchos de los procedimientos de laboratorio implican el uso de diluciones. Es
importante comprender el concepto de diluciones, ya que son una herramienta manual que
se utiliza en todas las áreas del laboratorio clínico. Estas diluciones deben tenerse en cuenta
ya que marcan una diferencia cuantitativa en lo que está sucediendo. Primero, hay varios
términos usados para expresar dilución:
1. "Dilución: - Las diluciones se expresan como la proporción de la cantidad de un soluto
deseado (suero, orina, solución química, etc.) contenida en un solvente (diluyente). Se hizo
una dilución 1:10 de suero agregando un parte de suero por nueve partes de diluyente para
hacer un total de diez partes.Si se agrega 1.0 mililitro de suero a 9.0 mililitros de H2O, se
obtiene un volumen total de 10.0 mililitros.Por lo tanto, la dilución se expresa de acuerdo con
la siguiente ecuación.
volumen de suero / volumen de solución = [1,0 ml de suero] / [1,0 ml de suero + 9,0 ml
de H20]
1,0 ml de suero / 10 ml de solución = 1:10 en total
Esto significa que cada mililitro de solución contiene 1/10 de la cantidad de suero que cada
mililitro del suero original. Otra forma de decir esto, una muestra de suero se diluyó 1:10 con
H2O.
Una precaución: algunas personas escriben relación que significa la cantidad de soluto en
proporción a la cantidad de soluto. Si no está seguro de la intención de alguien, pida una
aclaración.
2. "Diluido a": esto es esencialmente lo mismo que "dilución". Si se diluye 1 mililitro a 10
mililitros, se agrega suficiente diluyente al volumen original para producir un volumen total
final de 10 mililitros.
Por ejemplo, si se diluye 1 mililitro de suero en 10 mililitros de solución, se añaden 9 mililitros
de H2O a la muestra de suero original. Usando esta información, uno puede ver por qué
"diluido a" es lo mismo que "dilución" usando la siguiente ecuación:
volumen de suero / volumen total de solución = 1 ml / 10 ml = 1:10
Se diluyó un mililitro de suero a 10 mililitros.
3. "Agregado a": esta expresión suele ser un obstáculo, ya que no es lo mismo que "diluido
en". "Agregado a" se refiere al volumen del soluto agregado a un volumen específico de
solvente.
Por ejemplo, si se agrega 1 mililitro de suero a 10 mililitros de H2O, esto significa que 1 mL +
10 mL rinde un volumen total de 11 mL. Si expresó esto usando uno de los términos
anteriores, debe decir que se agregó 1 ml a 10 ml o que 1 ml se diluyó a 11 ml. Esto significa
que se hizo una dilución 1/11 ya que:
volumen de suero / volumen total de solución = 1 ml de suero / [1 ml de suero + 10 ml
de H20] = 1:11
4. "Dilución en serie": este término se utiliza con frecuencia y se refiere a un problema de
dilución "múltiple". En otras palabras, se hace una dilución inicial y luego esta dilución se usa
para hacer una segunda dilución, y así sucesivamente.
Por ejemplo, se realiza una dilución en serie 1: 2 utilizando un volumen de suero de 1 ml.
Esta expresión indica que se agrega 1 mL de suero a 1 mL de H2O y luego se mezcla. Esta

2. dilución inicial es 1: 2. Luego, se agrega 1 mL de esta dilución a 1 mL de H2O diluyendo más
la muestra. Se continúa este mismo proceso.
Las diluciones deben usarse con cuidado y el cálculo de los factores de dilución debe
realizarse con precisión, ya que un error puede afectar seriamente el resultado de una
prueba. Lea atentamente el siguiente material para comprender la variedad de formas en
que se utilizan las diluciones.
Preparación de diluciones
La primera regla para realizar diluciones es la lectura cuidadosa de las instrucciones
de procedimiento. Por ejemplo:
"Una muestra de suero de 1 ml diluida a 50 ml no es lo mismo que:" Una muestra de suero
de 1 ml añadida a 50 ml ".
Si se hacen varias diluciones una tras otra, la dilución final se puede calcular simplemente
multiplicando cada factor de dilución involucrado. Para ilustrar, considere las siguientes
situaciones:
Se diluyó una muestra de suero 1:20 y luego se diluyeron 2 ml de eso a 10 ml, y se añadió 1
ml de eso a 4 ml usando H2O. Se descartaron exactamente 2 mL de esta última dilución y el
resto se diluyó a 30 mL.
¿Cuál fue la dilución final de la muestra de suero? Lea cada porción con atención.
1/20 x 2/10 x 1/5 x 3/30 = 6 / 30.000 = 1 / 5.000 o 1: 5000
Siempre reduzca la respuesta final a una fracción con el mínimo denominador posible.
En el área de inmunología o serología, las diluciones en serie, a veces denominadas
diluciones serológicas, se utilizan ampliamente en los procedimientos de prueba. Las
diluciones en serie generalmente se refieren a diluciones de la misma proporción hechas
repetidamente a partir de la dilución anterior. Las instrucciones para preparar estas
diluciones en serie se pueden escribir de varias formas. Para ilustrar, considere los
siguientes dos ejemplos:
Ejemplo 1:
Se colocan ocho tubos de ensayo en una gradilla. Al primer tubo agregue 3 mL de solución
salina. A cada uno de los siete tubos restantes, agregue 2 ml de solución salina. Al primer
tubo agregue 1 mL de suero y mezcle bien. Transfiera 2 ml del tubo n. ° 1 al tubo n. ° 2 y
mezcle bien. A continuación, se transfieren 2 ml del contenido del tubo n. ° 2 al tubo n. ° 3 y
se repite el procedimiento para los tubos restantes, descartando finalmente 2 ml del último
tubo. ¿Cuál es la dilución de suero en el tubo n. ° 8?
Dilución 1/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 = 1/512
Ejemplo 2:
Se agrega un ml de suero a 3 ml de solución salina en el primer tubo de una serie de ocho.
Luego se realiza una dilución en serie 1: 2. ¿Cuál es la dilución de suero en el octavo tubo?

3. 1/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 x 2/4 = 1/512
Tanto el ejemplo 1 como el ejemplo 2 ilustran cómo el mismo problema de dilución en serie
puede expresarse de dos formas diferentes. En el primer ejemplo se proporciona un
esquema de procedimiento paso a paso. Regrese y observe el ejemplo 1. En el primer tubo
se añadió 1 mL de suero a 3 mL de solución salina. Para calcular la dilución contenida en
este tubo, aplique lo siguiente.
volumen de suero / volumen total de solución = 1 ml / l ml de suero + 3 ml de solución salina
= 1/4
En el segundo tubo se agregaron 2 mL de la primera dilución a 2 mL de solución salina:
1/4 x 2/4 o 1/4 x 1/2 = 1/8 en el segundo tubo
Al transferir 2 ml de dilución de un tubo a un segundo tubo que contiene 2 ml de solución
salina y continuar haciéndolo, esto en realidad está haciendo una dilución en serie 1: 2.
PROBLEMAS:
1. Hiciste una dilución de suero 1: 2. Luego agregaste 2 mL de eso a 4 mL de agua. Luego, 1
ml de eso se diluyó a 8 ml. ¿Cuál fue la dilución final del suero?
2. Tomó 4 ml de una solución de glucosa y la diluyó a 10 ml. Luego se hizo una dilución 1:10
de eso. ¿Cuál fue la dilución final?
3. Al realizar un procedimiento serológico, agrega 1 ml de suero a 5 ml de solución salina.
Luego se realiza una dilución en serie 1: 2. ¿Cuál es la dilución de suero contenida en el
tubo 6?
4. Se colocan seis tubos en una gradilla. A los seis tubos, agregue 2 ml de agua. Luego se
agrega 1 mL de suero al primer tubo y se mezcla bien. Luego transfiere 1 ml de eso al
segundo tubo y vuelve a mezclar bien. Continúa la transferencia de 1 mL de mezcla de un
tubo a cada tubo subsiguiente, finalmente desechando 1 mL del tubo 6. ¿Cuál es la dilución
de suero contenida en el tubo 6?
5. ¿Cómo prepararía una serie de tubos con una dilución de 1: 4 de modo que al final del
procedimiento terminara con 3 ml de solución en cada tubo?
6. ¿Cómo prepararía una serie de tubos para una dilución 1: 2 de modo que termine con 0,5
ml de solución en cada tubo al final del procedimiento?
Determinación de concentraciones de diluciones
Si desea determinar la concentración de una sustancia en una dilución particular, multiplique
la concentración original por la dilución. Para ilustrar, considere lo siguiente:
Ejemplo 1:
Tenías una solución con 4 g de glucosa por mL. Diluye esta solución original agregando 1 ml
de ella a 9 ml de agua. ¿Cuál es la dilución que preparó?
Al agregar 1 ml de solución a 9 ml de agua, ha preparado una dilución 1:10. Por lo tanto:
4 g / mL x 1/10 = 4 g / mL / 10 = 0.4 g / mL
Ejemplo 2:
Si tuviera una solución de glucosa de 100 mg / dL y realizó una dilución 1: 5, ¿qué
concentración de glucosa contiene la dilución?
100 mg / dL x 1/5 = 100 mg / dL / 5 = 20 mg / dL
Problemas:

4. 7. ¿Cuál es la concentración final de su solución cuando tomó 1 mL de una solución de 100
mg / dL y agregó 9 mL de agua?
8. Tenía una solución de glucosa de 1000 mg / dL. Tomó 1 ml de eso y lo diluyó a 5 ml.
Luego tomó 4 mL de eso y lo agregó a 12 mL de agua. ¿Cuál es la concentración final de su
solución de glucosa?
Elaboración de estándares
Otra forma común en que usamos los problemas de dilución es haciendo estándares para
nuestras pruebas. Diluimos los estándares de "existencias" para hacer estándares de
"trabajo". Estos estándares de trabajo se utilizan luego para probar y calcular
concentraciones desconocidas. Por ejemplo, podemos tener un estándar de glucosa
estándar de 10 mg / mL. Cuando analizamos los niveles de glucosa en pacientes, también
necesitamos ejecutar un estándar para calcular los resultados. El estándar de trabajo debe
estar dentro del campo de juego de los valores normales. El individuo normal puede tener
una glucosa de entre 60 y 90 mg / dL, por lo que un buen estándar de trabajo de glucosa
sería de aproximadamente 100 mg / dL. Ahora nos enfrentamos a la preparación de tal
estándar de trabajo.
1. Dado que el estándar stock se expresa en mg / mL y el estándar de trabajo se expresa en
mg / dL, primero debemos convertir la concentración de ambos a las mismas unidades.
Stock estándar = 10 mg / mL x 100 mL / 1dL = 1,000 mg / dL
2. Para determinar la dilución que se debe hacer para producir un estándar de trabajo de la
concentración deseada, usamos la siguiente ecuación:
concentración deseada de estándar de trabajo / concentración de stock estándar. =
dilución requerida
Usando la información de nuestro ejemplo, ahora vemos:
100 mg / dl = 1/10
1000 mg / dL
Por lo tanto, se debe hacer una dilución 1:10 del estándar de reserva para obtener un
estándar de trabajo de la concentración deseada de 100 mg / dL, es decir, una parte (mL o lo
que sea) de stock cs 10 partes de solución total (qs = cantidad suficiente para hacer).
3. Para determinar las cantidades reales de estándar de reserva y diluyente necesarias para
preparar el estándar de trabajo, utilice las siguientes ecuaciones.
Vol. Deseado x concentración deseada / concentración de stock. = Vol. De stock
estándar necesario
[estándar de trabajo de volumen total necesario] - [estándar de volumen de stock a
usar] = volumen de diluyente necesario
Suponga que queremos preparar 50 mL de un estándar de trabajo de glucosa de 100 mg /
dL a partir del estándar original de 10 mg / mL.
50 ml necesarios x 1/10 = 5 ml de stock estándar
Se necesitan 50 ml - 5 ml estándar estándar = 45 ml de diluyente
Por lo tanto, para preparar 50 ml de estándar de trabajo, se agregan 5 ml de estándar madre
a 45 ml de diluyente (como agua).
Problemas:
9. ¿Cómo prepararía 50 mg / dL de solución de glucosa de trabajo a partir de una solución
madre de glucosa de 2,0 g / dL?

5. 10. ¿Cómo haría un patrón de trabajo de ácido úrico de 4 mg / dL a partir de un patrón de
ácido úrico de reserva de 200 mg / dL?
11. Tienes un suero con 7 g / dL de proteína. ¿Cuál es la concentración en mg / dL de
proteína en el sexto tubo de una dilución en serie 1: 2 del suero?
12. 5 ml de un estándar de nitrógeno de urea madre contienen 1 mg de nitrógeno. 5 mL se
diluyen a 10 mL. 1 ml de esto se vuelve a diluir a 10 ml. 2,5 ml de esto se vuelven a diluir a
25 ml. ¿Cuál es la concentración de nitrógeno por mL de la dilución final?
13. Si usa 5 ml de glucosa madre que contiene 10 mg / ml y se diluye a 100 ml, ¿cuál es la
concentración de glucosa por ml en la dilución?
14. ¿Cómo diluiría un estándar de reserva de urea de 1 mg / ml para que sea equivalente a
un estándar de trabajo de 5 mg / dL?