1. PRACTICO No 2
ANTICOAGULANTES
Una vez extraída la sangre, ésta se va coagular mantenerla
incoagulable mediante la adición de un anticoagulante.
La mayoría de los exámenes hematológicos requiera que la
sangre sea total y fluida. Para ello se utilizan sustancias
llamadas anticoagulantes, que retirando el calcio o inhibiendo
otros factores de la coagulación, consiguen mantener la
sangre fluida. Estos anticoagulantes, generalmente, no
interfieren la composición de la sangre de modo que no
perjudican el resultado final del examen.
CARACTERÍSTICAS BÁSICAS DE LOS ANTICOAGULANTES
MÁS USADOS EN HEMATOLOGÍA
- No alterar el tamaño de los hematíes.
- No produce hemólisis.
- Evita al máximo la agregación plaquetaria.
- No alterar la morfología de los leucocitos.
- La sangre tratada con anticoagulante debe
procesarse lo antes posible, incluso mantenida bajo
refrigeración (4 ºC) si no pasan de las 2 horas.
- El tiempo máximo entre la extracción de la
sangre y su procesamiento depende del
coagulante de elección y no debe ser más de
4 horas, a excepción del anticoagulante EDTA
(etilendiaminotetracético) que puede ser hasta 24 horas
(en refrigeración a 4 ºC).
- Los anticoagulantes pueden emplearse en forma sólida o
líquida. Los primeros están indicados para la
determinación de los parámetros hematológicos, ya
que no producen, como los anticoagulantes líquidos,
dilución de la sangre.
ANTICOAGULANTES SÓLIDOS

2. 1.- ETILENDIAMINOTETRACETICO (EDTA)
Es la sal disódica o tripotásica del ácido
etilendiaminotetracético. La sal disódica (Na 2). EDTA)
es menos soluble que la sal tripotásica (K3)EDTA).
Estos compuestos realizan su acción a través de un efecto
quelante sobre el calcio, al fijarlo impiden su activación y, por
ende, la coagulación sanguínea.
VENTAJAS
- Respeta la morfología eritrocitaria
(especialmente la sal tripotásica) y leucocitaria,
de manera que permite una demora de dos horas en
la realización del frotis sanguíneo después de la
extracción sanguínea.
- Asegura la conservación de los elementos sanguíneos
durante 24horas si la sangre se mantiene a 4 C.
- Al inhibir la aglutinación de las plaquetas, facilita su
recuento o su expresión semicuantitativa a partir del
frotis.
- La concentración recomendada de EDTA es de 1,5
mg/ml. de sangre. Una mayor cantidad de
anticoagulante puede producir retracción celular,
con disminución del hematocrito, y un aumento de la
concentración media de la hemoglobina. Un exceso de
sangre con relación al anticoagulante produce formación
de microagregados que pueden alterar los
resultados. El empleo de tubos al vacío con una gota
de EDTA tripotásica comercial para 5 ml de sangre es
de interés práctico dado que es cien veces más
soluble facilitando la mezcla de sangre con

3. anticoagulante.
DESVENTAJAS
- Usado en exceso afecta a los eritrocitos y a los
leucocitos, a los cuales les produce encogimiento y
cambios en su forma, por ello debe cuidarse de agregar la
cantidad correcta de sangre al anticoagulante.
2.- ANTICOAGULANTE DE WINTROBE
- Es una mezcla de oxalato de amonio y potasio. Actúa
por precipitación del calcio, es fácil de preparar. Se emplea
en forma de polvo en proporción de 2 deoxalato de amonio
por 1 de oxalato de potasio. La cantidad recomendada es de
2 mg x ml de sangre.
- Este anticoagulante no afecta el volumen globular medio y
puede usarse para determinaciones de hemoglobina,
hematocrito y recuento globular, pero para los
extendidos queda limitada a los primeros minutos,
tampoco es útil para el recuento plaquetario porque produce
formación de agregados plaquetarios.
- Para 5ml de sangre se utilizan 0.5ml de la mezcla de
anticoagulante (desecado en estufa a 37 C. o a temperatura
ambiente antes de utilizarlo) esta dilución anticoagulante
actúa para la fijación del calcio y debe usarse siempre
desecado para no diluir la sangre
3.- Heparina
El nombre de heparina proviene del griegohepar que
significa hígado, ya que fue aislado por primera vez de las
células de este tejido. Es un mucopolisacárido ácido.
Presenta el inconveniente de que si no se agita
rápidamente con la sangre después de extraída pueden
formarse microcoágulos, aunque no altera el volumen
eritrocitario ni la morfología de los leucocitos. No es
recomendable para el frotis sanguíneo porque

4. produce un fondo azul en la lámina.
La heparina de sodio o litio puede usarse en forma sólida o
líquida, en proporción de 0,1 - 0,2 mg de heparina por 1
ml de sangre.
ANTICOAGULANTESLÍQUIDOS.
1.- Citrato trisódico
- Es de elección para las pruebas de hemostasia y la
velocidad de sedimentación.
- Actúa a través de la precipitación del calcio. La
concentración depende de la prueba por realizar.
- Para pruebas de hemostasia se emplea en proporción de 1:
9 (0,5 ml de anticoagulante para 4,5 ml de sangre total).
- Para la determinación de la VSG (Velocidad de
Sedimentación Globular) es1:4 (0,5 ml de anticoagulante para
2 ml de sangre).
2.- Oxalato sódico
- Recomendado también para las pruebas de
hemostasia. Se emplea en proporción de un volumen de
anticoagulante para 4 vol. de sangre.
CODIGO DE COLORES INTERNACIONALES DE LOS
TUBOS COLECTORES MUESTRA SANGUINEA
Tapa roja: Sin anticoagulante (Tubo seco). Destinado a
serología, bioquímica,
inmunología.
Tapa violeta Con EDTA. Contiene anticoagulante, destinado
a hematimetrias.
Tapa azul: Con CITRATO DE SODIO. Destinado a pruebas
de prueba coagulación.
Tapa negro: Con CITRATO SÓDICO. Destinado VSG
(velocidad de sedimentaciónglobular).

5. Tapa amarillo: Destinado a la bioquímica.
Tapa verde: Con HEPARINA. Contiene un separador que se
interpone ente las
Células sanguíneas y el suero.
VALORES NORMALES DE LA COAGULACION
SANGUINEA
1.- tiempo coagulación.- 6-10 minutos.
2.- Tiempo protrombina.- de 12 segundos.
3.- Tiempo hemorragia.- 1 a 6 minutos.
MATERIALES.
- Todo referente al práctico uno.
- Anticoagulante EDTA.
PROCEDIMIENTO
- Extraer la sangre según técnica descrita.
- Vaciar 1 gota de EDTA al tubo de ensayo para 5 ml de
sangre.
- Remover el tubo lentamente durante treinta segundos.
- Esperar el tiempo determinado y observar para su
lectura. . Después de un periodo de 1 a 3 horas, a
temperatura de 37º C dejará separas de la parte coagulada
un líquido: el suero.