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[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],[object Object],2011 Biochimie Biochemistry Poster  6
Introduction De nombreuses études épidémiologiques réalisées en milieu clinique ont révélé une association entre le retard de croissance intra-utérin (RCIU) et la programmation métabolique du fœtus, ce qui accroît la susceptibilité aux maladies cardiovasculaires et l’apparition des complications à l’âge adulte.  Notre objectif est d'évaluer les expressions géniques et protéiques de facteurs pro-inflammatoires au niveau de placentas provenant des grossesses gémellaires caractérisées par un fœtus normal et un avec retard de croissance.
Objectifs  Vérifier, dans un modèle de grosses gémellaire, si les expressions génique et protéique placentaires de facteurs pro-inflammatoires, de bio-marqueurs d’inflammation, d’intégrité endothéliale et de marqueurs du stress oxydatif sont augmentées en cas de retard de croissance intra-utérin. Vérifier si les concentrations de ces marqueurs sont augmentées dans le sang de cordons de nouveau-nés avec retard de croissance intra-utérin.
Matériel et Méthodes Les biopsies placentaires (~0,3 g), prélevées après césarienne, ont été immédiatement congelées dans l'azote liquide. L’ARN total a été isolé par  Trizol et l’expression génique évaluée par PCR  semi-quantitative. L’expression protéique a été mesurée par Western blot. Le retard de croissance intra-utérin a été défini comme un poids de naissance inférieur au 10 ième  percentile. Vingt-six paires de placentas ont été analysées. Les facteurs pro-inflammatoires suivants ont été étudiés: Il-1b, IL-6, TNFa. Les bio-marqueurs d’inflammations suivant ont été étudiés: CRP, sICAM-1. Les mêmes facteurs et bio-marqueurs, ainsi que les LDLox et le MDA, ont été mesurés dans le sang de cordon Les comparaisons intra-paire des bio-marqueurs ont été effectuées en utilisant le test de Wilcoxon   selon le cas .
Matériel et Méthodes Marqueurs du sang de cordon Les méthodes d’analyses sont les suivantes: C-Réactive Protéine (Immunonéphélométrie, Immage , Beckman-Coulter) Il-6, TNFa, sICAM-1: ELISA (R&D systems) SAA: ELISA (Autogen Bioclear) LDL oxydés (Cayman Diagnostics) Malonaldéhyde (CLHP) Leduc L et al.Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 2011;156:46-9
Caractéristiques cliniques Valeur de p: <0.01 26 Nombre de sujets 33 ± 1 Âge maternel (ans) 34 ± 1 Âge de gestation (sem) RCIU Cont rôles 360 ±  22* 414 ± 27 Pds placentaire (g) 1671 ±  161* 2223 ±  159 Pds nouveau-nés(g)
Marqueurs du sang de cordon *Test de Student pour valeurs pairées. Moy ± ET  Leduc et al. Eur J Obstet Gyncol Reprod Biol 2011;156:46-9 0,326 306 ± 20 283 ± 19 MDA (nmol/l 0,003 2,4 ± 0,4 1,3 ± 0,2 LDLox (kU/l) 0,771 0,020 ± 0,002 0,021 ± 0,003 CRP (mg/l) 0,655 52 ± 11 48 ± 8 SAA (  g/ml) 0,228 398 ± 16 390 ±  17 sICAM (  g/l) 0,308 137 ± 45 127 ±  44 TNF   (ng/l) 0,546 40,3 ± 5,5 33,2 ± 2,9 Il-6 (ng/l) Valeur p* RCIU Contr ôles
Variables placentaires (ARNm) ,[object Object],[object Object],0,001 0,71 ± 0,81 1,40 ± 1,32 I  b/NF  b 0,001 0,63 ±  0,50 0,43 ± 0,43 CRP 0,001 0,72 ± 0,54 0,53 ± 0,42 SAA) 0,001 0,54 ± 0,34 0,38 ± 0,32 sICAM-1 0,001 0,49 ± 0,30 0,35 ± 0,28 TNF  0,001 0,40 ± 0,30 0,30 ± 0,26 Il-6 Valeur p* RCIU Contr ôles
Discussion et conclusion Cette étude portant sur des grossesses gémellaires démontre que, les concentrations des marqueurs de l’inflammation ne sont pas modifiées dans le sang de cordon de nouveau-nés avec RCIU et que seuls les LDLox, marqueurs du stress oxydatifs, le sont. Par contre, l’expression génique (concentrations relatives des ARMm) des facteurs pro-inflammatoires ainsi que de ceux des marqueurs de dommage endothélial est augmentée dans le placenta  des nouveau-nés avec RCIU. Ces résultats indiquent que l’homéostasie des cascades de signalisation impliquées dans les processus inflammatoire et de stress oxydatifs est perturbée au niveau placentaire dans le RCIU et que le placenta pourrait jouer le r ôle de protecteur du foetus. La relation entre ces perturbations métaboliques et le développement de maladies à  l’âge adulte (hypothèse de Barker) demeure à être démontrée

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  • 1.
  • 2. Introduction De nombreuses études épidémiologiques réalisées en milieu clinique ont révélé une association entre le retard de croissance intra-utérin (RCIU) et la programmation métabolique du fœtus, ce qui accroît la susceptibilité aux maladies cardiovasculaires et l’apparition des complications à l’âge adulte. Notre objectif est d'évaluer les expressions géniques et protéiques de facteurs pro-inflammatoires au niveau de placentas provenant des grossesses gémellaires caractérisées par un fœtus normal et un avec retard de croissance.
  • 3. Objectifs Vérifier, dans un modèle de grosses gémellaire, si les expressions génique et protéique placentaires de facteurs pro-inflammatoires, de bio-marqueurs d’inflammation, d’intégrité endothéliale et de marqueurs du stress oxydatif sont augmentées en cas de retard de croissance intra-utérin. Vérifier si les concentrations de ces marqueurs sont augmentées dans le sang de cordons de nouveau-nés avec retard de croissance intra-utérin.
  • 4. Matériel et Méthodes Les biopsies placentaires (~0,3 g), prélevées après césarienne, ont été immédiatement congelées dans l'azote liquide. L’ARN total a été isolé par Trizol et l’expression génique évaluée par PCR semi-quantitative. L’expression protéique a été mesurée par Western blot. Le retard de croissance intra-utérin a été défini comme un poids de naissance inférieur au 10 ième percentile. Vingt-six paires de placentas ont été analysées. Les facteurs pro-inflammatoires suivants ont été étudiés: Il-1b, IL-6, TNFa. Les bio-marqueurs d’inflammations suivant ont été étudiés: CRP, sICAM-1. Les mêmes facteurs et bio-marqueurs, ainsi que les LDLox et le MDA, ont été mesurés dans le sang de cordon Les comparaisons intra-paire des bio-marqueurs ont été effectuées en utilisant le test de Wilcoxon selon le cas .
  • 5. Matériel et Méthodes Marqueurs du sang de cordon Les méthodes d’analyses sont les suivantes: C-Réactive Protéine (Immunonéphélométrie, Immage , Beckman-Coulter) Il-6, TNFa, sICAM-1: ELISA (R&D systems) SAA: ELISA (Autogen Bioclear) LDL oxydés (Cayman Diagnostics) Malonaldéhyde (CLHP) Leduc L et al.Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol 2011;156:46-9
  • 6. Caractéristiques cliniques Valeur de p: <0.01 26 Nombre de sujets 33 ± 1 Âge maternel (ans) 34 ± 1 Âge de gestation (sem) RCIU Cont rôles 360 ± 22* 414 ± 27 Pds placentaire (g) 1671 ± 161* 2223 ± 159 Pds nouveau-nés(g)
  • 7. Marqueurs du sang de cordon *Test de Student pour valeurs pairées. Moy ± ET Leduc et al. Eur J Obstet Gyncol Reprod Biol 2011;156:46-9 0,326 306 ± 20 283 ± 19 MDA (nmol/l 0,003 2,4 ± 0,4 1,3 ± 0,2 LDLox (kU/l) 0,771 0,020 ± 0,002 0,021 ± 0,003 CRP (mg/l) 0,655 52 ± 11 48 ± 8 SAA (  g/ml) 0,228 398 ± 16 390 ± 17 sICAM (  g/l) 0,308 137 ± 45 127 ± 44 TNF  (ng/l) 0,546 40,3 ± 5,5 33,2 ± 2,9 Il-6 (ng/l) Valeur p* RCIU Contr ôles
  • 8.
  • 9. Discussion et conclusion Cette étude portant sur des grossesses gémellaires démontre que, les concentrations des marqueurs de l’inflammation ne sont pas modifiées dans le sang de cordon de nouveau-nés avec RCIU et que seuls les LDLox, marqueurs du stress oxydatifs, le sont. Par contre, l’expression génique (concentrations relatives des ARMm) des facteurs pro-inflammatoires ainsi que de ceux des marqueurs de dommage endothélial est augmentée dans le placenta des nouveau-nés avec RCIU. Ces résultats indiquent que l’homéostasie des cascades de signalisation impliquées dans les processus inflammatoire et de stress oxydatifs est perturbée au niveau placentaire dans le RCIU et que le placenta pourrait jouer le r ôle de protecteur du foetus. La relation entre ces perturbations métaboliques et le développement de maladies à l’âge adulte (hypothèse de Barker) demeure à être démontrée