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2011                                                        Poster 85
                                                             Immunologie
                                                              Immunology



    La lymphoprolifération et la
   Sécrétion des Interleukines des
           Enfants Obèses
Bouanane Samira1, merzouk1, babaAhmed1, saker1, mokhtari1,benkalfat1 ,
babaahmed2 ,narce3

1 -Laboratoire PPABIONUT, Université de Tlemcen, Algérie
2 -Service de pédiatrie, CHU de Tlemcen
3 -INSERM UMR 866, faculté des sciences Dijon, France
Introduction
L’obésité est devenue la 1ère maladie non infectieuse de
l’histoire. Par ce qu’elle a été longtemps considérée comme
une maladie des pays riches, l’obésité constitue désormais
un problème majeur en Afrique. L’Algérie n’est pas
épargnée par ce fléau des temps modernes puisque la
prévalence du surpoids et de l’obésité chez les enfants de 6
à 12 ans atteint les 25%. L’obésité est souvent associée à
des altérations du système immunitaire.

    L’objectif de cette étude a été de déterminer l’impact
    de l’obésité sur la prolifération lymphocytaire et la
    sécrétion des interleukines chez des enfants obèses
    comparés à des enfants témoins de la même tranche
    d’âge scolarisés dans la région de Tlemcen (Algérie)
Matériels & méthodes
                       Population étudiée

Caractéristiques          Enfants témoins           Enfants obèses
Nombre                           26                        26
Sexe(Garçon/Fille)              15/11                     14/12
Age (ans)                     7.82±0.59                8.31 ±0.22
Taille (m)                    1.13±0.01                1.15±0.02
Poids (Kg)                    27.19±1.31              43.20±1.77***
IMC (Kg/m2)                   21.4±0.50                32.72±0.53***


                       Prélèvements sanguins

              Tube héparine             Sang total+ Ficoll (1.075)
Paramètres étudiés
                Analyses immunologiques

 Isolement des lymphocytes

 Test de transformation lymphocytaire (TTL)         Agents mitogènes:
ConA, LPS


Comptage des lymphocytes            Bleu de Trypan, MTT [3-(4,5-
Dimethyl thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tétrazolium bromide]

Dosage des protéines          Méthode de Lowry et al. (1951)

Dosage des Interleukines ( IL-2 et IL-6)        Kit Eliza (Genzyma,
Cambridge MA, USA)
35                                               Résultats                                                                               25                              b
                                                                                                                                                                                                                                                         enfants témoins
                                                                                                   b
                                          Nombre de cellules(105/puits)


                                                                      30                                                                                                                                       20                                        enfants obèses
                                                                                                                                                                                                                                                   b**




                                                                                                                                                                            Nombre re de cellules(105/puits)
                                                                      25
                                                                                                                                                                                                               15
                                                                                                                                                                                                                                                   *
                                                                      20                                 b**
                                                                                                         *
                                                                      15                                                                                                                                       10         a
                                                                      10        a       a*                                                                                                                                       a*
                                                                                                                                                                                                               5
                                                                          5

                                                                          0                                                                                                                                    0
                                                                               Prolifération                                                                                                                             Prolifération         LPS
                                                                                                  ConA
                                                                               basale                                                                                                                                    basale

                                                           Figure de la prolifération des lymphocytes en absence ou en présence de l’agent mitogène chez les enfants obèses
                                                           et témoins
                                                                                                                                                                      450
                                                           500                                            b                                                                                                                           b




                                                                                                                             Teneurs en protéines totales µg/puits)
                                                                                                                                                                      400
Teneurs en protéines totales (µg/puits)




                                                           450
                                                                                                                                                                      350
                                                           400                                                                                                                                                                             b***
                                                           350                                                  b***                                                  300
                                                           300                                                                                                        250
                                                           250                                                                                                        200
                                                           200                      a                                                                                                                     a         a*
                                                                                                                                                                      150
                                                           150                               a*
                                                                                                                                                                      100
                                                           100
                                                                                                                                                                      50
                                                                          50
                                                                           0                                                                                            0
                                                                                                                                                                            Prolifération                                                LPS
                                                                               Prolifération             ConA
                                                                               basale                                                                                       basale


                       Figure des protéines totales (µg/puits)des lymphocytes en absence ou en présence de l’agent mitogène chez les
                       enfants obèses et témoins
4500
                                                              b*                                                                          6000
                                 4000
                                                                                   enfants témoins                                                               b




                                                                                                        Taux d’Interleukines -6 (pg/ml)
                                                                                                                                          5000
Taux d’Interleukines-2 (pg/ml)




                                 3500
                                                                                   enfants obèses
                                 3000
                                                                                                                                          4000
                                 2500                                                                                                                                  b***
                                                                                                                                          3000
                                 2000                                b***
                                 1500                                                                                                     2000

                                 1000           a
                                                                                                                                          1000
                                                         a*
                                  500                                                                                                               a      a*
                                    0                                                                                                        0
                                                                                                                                                 Prolifération   LPS
                                         Prolifération        ConA                                                                               basale
                                         basale



                                                                            Obèses vs. Témoins ***p<0.001




                                        Figure de la production des interleukines 2 (IL-2) et 6 (IL-6) par les lymphocytes T et B isolés chez les enfants
                                                                                      obèses et témoins
Discussion
L’obésité et le surpoids entrainent des altérations du système
immunitaire. En effet, nos résultats montrent clairement que
les enfants obèses présentent une diminution               de la
prolifération à l’état basal des lymphocytes T et B, ou stimulée
par l’agent mitogène (ConA ou LPS) chez les enfants obèses
comparés aux enfants témoins. De même, la prolifération des
lymphocytes exprimée par le contenu des protéines des
cellules suit le même profil que celle exprimée par le nombre
de cellules. Quelque soit l’incubation les teneurs en protéines
des lymphocytes T et B sont réduites chez les enfants obèses
comparés à leurs témoins. Ces altérations sont dues au fait
que les enfants obèses présentent une diminution des
interleukines ( IL-2 et IL-6), facteurs importants de maturation
et de croissance des lymphocytes T et B.
Conclusion
Le système immunitaire est altéré au cours de l’obésité. L’obésité
affecte non seulement la fonctionnalité des cellules du système
immunitaire mais aussi leur profil de sécrétion des cytokines. Il y a
chez l’obèse une diminution de l’activité des lymphocytes T, de la
prolifération lymphocytaire, avec un état inflammatoire chronique.
Nos résultats mettent en évidence les perturbations de la fonction
lymphocytaire chez ces enfants obèses. L’obésité infantile est
associée à une réduction de la lymphoprolifération T et B et de la
production des IL-2 et IL-6.



 Remerciements :
 - Membres du Laboratoire de recherche de Physiologie, Physiopathologie et Biochimie de la
 nutrition: PPABIONUT, notamment Pr MERZOUK H., Dr MOKHTARI N., Dr BABA AHMED FZ.
 -Pr NARCE Michel, Directeur du projet TASSILI, Dijon, France
 -Dr BABA AHMED S., Pédiatre au CHU de Tlemcen, Algérie
 -Parents des enfants ayant accepté de participer à cette étude.
 Ce travail a été réalisé grâce au soutien financier du projet national CNEPRU (1020060002)
 et TASSILI.

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  • 1. 2011 Poster 85 Immunologie Immunology La lymphoprolifération et la Sécrétion des Interleukines des Enfants Obèses Bouanane Samira1, merzouk1, babaAhmed1, saker1, mokhtari1,benkalfat1 , babaahmed2 ,narce3 1 -Laboratoire PPABIONUT, Université de Tlemcen, Algérie 2 -Service de pédiatrie, CHU de Tlemcen 3 -INSERM UMR 866, faculté des sciences Dijon, France
  • 2. Introduction L’obésité est devenue la 1ère maladie non infectieuse de l’histoire. Par ce qu’elle a été longtemps considérée comme une maladie des pays riches, l’obésité constitue désormais un problème majeur en Afrique. L’Algérie n’est pas épargnée par ce fléau des temps modernes puisque la prévalence du surpoids et de l’obésité chez les enfants de 6 à 12 ans atteint les 25%. L’obésité est souvent associée à des altérations du système immunitaire. L’objectif de cette étude a été de déterminer l’impact de l’obésité sur la prolifération lymphocytaire et la sécrétion des interleukines chez des enfants obèses comparés à des enfants témoins de la même tranche d’âge scolarisés dans la région de Tlemcen (Algérie)
  • 3. Matériels & méthodes Population étudiée Caractéristiques Enfants témoins Enfants obèses Nombre 26 26 Sexe(Garçon/Fille) 15/11 14/12 Age (ans) 7.82±0.59 8.31 ±0.22 Taille (m) 1.13±0.01 1.15±0.02 Poids (Kg) 27.19±1.31 43.20±1.77*** IMC (Kg/m2) 21.4±0.50 32.72±0.53*** Prélèvements sanguins Tube héparine Sang total+ Ficoll (1.075)
  • 4. Paramètres étudiés Analyses immunologiques  Isolement des lymphocytes  Test de transformation lymphocytaire (TTL) Agents mitogènes: ConA, LPS Comptage des lymphocytes Bleu de Trypan, MTT [3-(4,5- Dimethyl thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tétrazolium bromide] Dosage des protéines Méthode de Lowry et al. (1951) Dosage des Interleukines ( IL-2 et IL-6) Kit Eliza (Genzyma, Cambridge MA, USA)
  • 5. 35 Résultats 25 b enfants témoins b Nombre de cellules(105/puits) 30 20 enfants obèses b** Nombre re de cellules(105/puits) 25 15 * 20 b** * 15 10 a 10 a a* a* 5 5 0 0 Prolifération Prolifération LPS ConA basale basale Figure de la prolifération des lymphocytes en absence ou en présence de l’agent mitogène chez les enfants obèses et témoins 450 500 b b Teneurs en protéines totales µg/puits) 400 Teneurs en protéines totales (µg/puits) 450 350 400 b*** 350 b*** 300 300 250 250 200 200 a a a* 150 150 a* 100 100 50 50 0 0 Prolifération LPS Prolifération ConA basale basale Figure des protéines totales (µg/puits)des lymphocytes en absence ou en présence de l’agent mitogène chez les enfants obèses et témoins
  • 6. 4500 b* 6000 4000 enfants témoins b Taux d’Interleukines -6 (pg/ml) 5000 Taux d’Interleukines-2 (pg/ml) 3500 enfants obèses 3000 4000 2500 b*** 3000 2000 b*** 1500 2000 1000 a 1000 a* 500 a a* 0 0 Prolifération LPS Prolifération ConA basale basale Obèses vs. Témoins ***p<0.001 Figure de la production des interleukines 2 (IL-2) et 6 (IL-6) par les lymphocytes T et B isolés chez les enfants obèses et témoins
  • 7. Discussion L’obésité et le surpoids entrainent des altérations du système immunitaire. En effet, nos résultats montrent clairement que les enfants obèses présentent une diminution de la prolifération à l’état basal des lymphocytes T et B, ou stimulée par l’agent mitogène (ConA ou LPS) chez les enfants obèses comparés aux enfants témoins. De même, la prolifération des lymphocytes exprimée par le contenu des protéines des cellules suit le même profil que celle exprimée par le nombre de cellules. Quelque soit l’incubation les teneurs en protéines des lymphocytes T et B sont réduites chez les enfants obèses comparés à leurs témoins. Ces altérations sont dues au fait que les enfants obèses présentent une diminution des interleukines ( IL-2 et IL-6), facteurs importants de maturation et de croissance des lymphocytes T et B.
  • 8. Conclusion Le système immunitaire est altéré au cours de l’obésité. L’obésité affecte non seulement la fonctionnalité des cellules du système immunitaire mais aussi leur profil de sécrétion des cytokines. Il y a chez l’obèse une diminution de l’activité des lymphocytes T, de la prolifération lymphocytaire, avec un état inflammatoire chronique. Nos résultats mettent en évidence les perturbations de la fonction lymphocytaire chez ces enfants obèses. L’obésité infantile est associée à une réduction de la lymphoprolifération T et B et de la production des IL-2 et IL-6. Remerciements : - Membres du Laboratoire de recherche de Physiologie, Physiopathologie et Biochimie de la nutrition: PPABIONUT, notamment Pr MERZOUK H., Dr MOKHTARI N., Dr BABA AHMED FZ. -Pr NARCE Michel, Directeur du projet TASSILI, Dijon, France -Dr BABA AHMED S., Pédiatre au CHU de Tlemcen, Algérie -Parents des enfants ayant accepté de participer à cette étude. Ce travail a été réalisé grâce au soutien financier du projet national CNEPRU (1020060002) et TASSILI.