Réalisation d'un antibiogramme et mise en évidence d'une résistance aux antibiotiques

1. TP 10 Variation génétique bactérienne et résistance aux antibiotiques.
Activité 1.
Monsieur Boyer est malade (fièvre, gorge gonflée, maux de tête). Il se rend donc chez
son médecin traitant. Celui-ci lui diagnostique une infection bactérienne et lui prescrit
un antibiotique : l’ Erythromycine.
Mais après quinze jours de traitement, Monsieur Boyer ressent toujours les symptômes
de la maladie et il doit retourner chez son médecin. Celui-ci décide alors de faire un
prélèvement, de mettre en culture les bactéries responsables de sa maladie et de les
envoyer à un laboratoire.
Vous êtes le technicien de laboratoire. Vous cherchez à comprendre pourquoi l’
Erythromycine n’a pas permis de soigner Monsieur Boyer, et vous devez proposer un
nouveau traitement.
Réalisation d’un antibiogramme.
Vous disposez d’une boîte de Pétri dans laquelle les bactéries issues du prélèvement ont
été mis en culture (fond rose) ; une boîte de Pétri, stérile, sans culture bactérienne est
présentée sur la paillasse professeur.
Sur le couvercle de la boîte de Pétri indiquez la lettre correspondant à chacun des
antibiotiques à tester : A = Amoxicilline, C = Céfotaxime,
E = Erythromycine, P = Pénicilline et V = Vancomycine
À l'aide d’une pince, prélevez un disque pour antibiogramme, trempez-le dans le tube
d’amoxicilline, égouttez-le, puis posez-le délicatement sur la gélose à l’emplacement
prévu par le gabarit.
Rincez la pince, essuyez-la et renouvelez l’opération pour chacun des autres
antibiotiques.
Refermez la boîte et laissez incuber de 15 à 30 minutes.
Présentez vos résultats, vos conclusions et préconisations.

2. Activité 2.
Après une amélioration de son état pendant 3 jours suite au traitement
d’antibiothérapie, Mr Boyer se sentant en forme, décide d’interrompre le traitement,
les symptômes alors réapparaissent quelques jours plus tard. Un test réalisé révèle la
présence d’une souche bactérienne Coli SHV2.
Vous disposez de la séquence anagène du gène de la betalactamase de la souche Coli
SHV1 (souche ancêtre) et de la souche Coli SHV2. La betalactamase est une enzyme
naturellement présente dans les bactéries. Elle a la capacité, dans certains cas, de
dégrader certains antibiotiques de la famille des betalactamines comme la céfotaxime.
A partir de l’exploitation du fichier anagène et de vos éventuelles connaissances,
vous expliquerez à Mr Boyer comment est apparue la souche résistante, et pourquoi
il ne devait pas interrompre son traitement.
Activité 2.
Après une amélioration de son état pendant 3 jours suite au traitement
d’antibiothérapie, Mr Boyer se sentant en forme, décide d’interrompre le traitement,
les symptômes alors réapparaissent quelques jours plus tard. Un test réalisé révèle la
présence d’une souche bactérienne Coli SHV2.
Vous disposez de la séquence anagène du gène de la betalactamase de la souche Coli
SHV1 (souche ancêtre) et de la souche Coli SHV2. La betalactamase est une enzyme
naturellement présente dans les bactéries. Elle a la capacité, dans certains cas, de
dégrader certains antibiotiques de la famille des betalactamines comme la céfotaxime.
A partir de l’exploitation du fichier anagène et de vos éventuelles connaissances,
vous expliquerez à Mr Boyer comment est apparue la souche résistante, et pourquoi
il ne devait pas interrompre son traitement.