2. • TSU Histotecnologo y embalsamador
• Universidad veracruzana
• Técnicas de investigación Criminal
• Equipo 4
3. La huella genética (también llamada
prueba de ADN o análisis de ADN) es una técnica
que se utiliza para distinguir entre los individuos
de una misma especie utilizando muestras de su
ADN.
4. SU invención se debe al Dr. Alec Jefrfreys de la
universidad de Leicester, quien dio a conocer su
nueva técnica en 1984. El fue el que descubrió que
en ciertas regiones del ADN habían pequeños
fragmentos que llaman Mini-Satelites, que solo se
repiten cierto numero de veces diferentes siempre
en cada individuo.
5. Además desarrollo una técnica para
analizar estas repeticiones de minisatelites en las personas. Así gracias a
esta técnica se produce en cada
individuo un código de barras igual que
una huella digital.
6. En 1984, él y sus colegas desarrollaron una
manera de utilizar una propiedad recientemente
descubierta de ADN, zonas aisladas de gran
variabilidad entre los individuos llamados
polimorfismos de longitud de fragmentos de
restricción (RFLP), para la identificación, el
forense de huellas dactilares de ADN original.
En 1986, la policía pidió a Jeffreys ayuda para
encontrar a un hombre que había violado y
matado a dos niñas. Las pruebas de ADN
exoneraron el principal sospechoso. A través de
una redada genética, la policía encontró el autor,
Colin Pitchfork, que se dio cuando él le pidió a un
amigo para una muestra de sangre sustituto.
7. La técnica se basa en que dos seres humanos tienen
una gran parte de su secuencia de ADN en común y
para distinguir a dos individuos se puede explotar la
repetición de secuencias altamente variables
llamadas minisatélites o satélites.
Dos seres humanos no emparentados será poco
factible que tengan el mismo número de minisatélites
o satélites.
8. Es posible establecer una selección ,que es muy
poco probable que haya surgido por casualidad,
salvo en el caso de gemelos, que tendrán idénticos
perfiles genéticos pero no las huellas dactilares.
La huella genética se utiliza en la medicina forense
para identificar a los sospechosos con muestras de
sangre, cabello, saliva o semen y también ha dado
lugar a varias exoneraciones de condenados.
9. Igualmente se utiliza en aplicaciones como la
identificación de los restos humanos, las pruebas de
paternidad, la compatibilidad en la donación de
órganos, el estudio de las poblaciones de animales
silvestres, y el establecimiento del origen o la
composición de alimentos.
También se ha utilizado para generar hipótesis sobre
las migraciones de los seres humanos en la
prehistoria.
11. Muestras de referencia
Se debe realizar una extracción de ADN que puede
proceder de muestras tales como:
• Artículos personales
• Banco de muestras
12. • Parientes.
• Restos humanos previamente identificados.
• Algunas muestras de referencia se recolectan con
un hisopo bucal.
14. Análisis por RFLP
RF corresponde a Restriction Fragments (fragmentos
de restricción). Son los fragmentos de ADN resultantes
del corte mediante enzimas de restricción.
L corresponde a Length (longitud) se refiere a la
longitud de los fragmentos de restricción.
P corresponde a Polymorphism (polimorfismo),
palabra de origen griego que significa literalmente
"muchas formas". La longitud de algunos de los
fragmentos de restricción difiere en buena medida
entre individuos, por lo cual son posibles muchas
formas, o longitudes, de ADN.
15. • El análisis consiste en hacer un ensayo de
hibridación de Southern o Southern blot, y usar
sondas específicas para detectar los VNTR
16. • En primer lugar el ADN que se va a analizar se
separa de otros materiales. A continuación, debe
cortarse en fragmentos de diferentes tamaños
usando enzimas de restricción, que son
proteínas que cortan el ADN sin dañar las bases.
Los fragmentos se ordenan por tamaño
empleando la electroforesis en gel.
• El ADN, que tiene carga negativa, avanza en el
campo eléctrico.
17. Las moléculas más pequeñas se mueven más
rápidamente a través del gel, por lo que se localizarán
más alejadas del origen que los fragmentos más
grandes. Luego por calor o solución alcalina, se aplica
gel con el fin de desnaturalizar el ADN y se separa en
fragmentos individuales. Una vez realizado esto el ADN
esta ahora listo para ser analizados utilizando una
sonda radioactiva de reacción de hibridación.
18. Análisis por PCR (reacción en cadena de
la polimerasa)
• Técnica de biología molecular, cuyo objetivo es
obtener un gran número de copias de un fragmento de
ADN particular, partiendo de un mínimo; en teoría
basta partir de una única copia de ese fragmento
original, o molde. Esta sirve para amplificar un
fragmento de ADN; su utilidad es que tras la
amplificación resulta mucho más fácil identificar con
una alta probabilidad, virus o bacterias causantes de
una enfermedad, identificar personas (cadáveres) o
hacer investigación científica sobre el ADN
amplificado.
19. • Estos usos derivados de la amplificación han
hecho que se convierta en una técnica muy
extendida.
20. Análisis por AmpRFLP
• técnica de amplificación de regiones polimórficas,
preferiblemente el locus D1S80. Este análisis pueden
ser automatizado, y permite la fácil creación de árboles
filogenéticos basados en la comparación de las
muestras individuales de ADN.
• Basado en el número variable de repeticiones en
tándem (VTNR) para distinguir diversos polimorfismos
alelos, que son separados en un gel de poliacrilamida
utilizado en una escalera alelica. Bandas podrían ser
visualizados por tincíon de gel de plata. Un lugar
popular para la toma de huellas dactilares es el locus
D1S80. Al igual que los métodos basados en PCR, el
ADN degradado o en cantidades muy pequeñas de ADN
puede causar alélica de abandono.
21. Análisis STR
• Consiste en la amplificación de secuencias con
pequeñas repeticiones en tándem que no se
conservan dentro de la especie. Una vez
amplificadas se separan los fragmentos para
comprobar el número de repeticiones (mediante
electroforesis capilar o en gel), de forma que se
pueden distinguir patrones de repeticiones que
pueden ser comparables y asociables
22. Análisis del cromosoma Y
• Se han creado cebadores específicos para
regiones del cromosoma Y que amplifican
secuencias solo heredadas por parte paterna. Por
ello, este tipo de análisis sólo sirve para
comparar familiares por parte del padre y
varones
23. Análisis mitocondrial
• Se usa en muestras muy degradadas, ya que el
DNA mitocondrial posee más copias que el
nuclear. Se amplifican las regiones HV1 y HV2 y
se comparan siempre con familiares por parte
materna ya que las mitocondrias son herencia
exclusiva de la madre. Los científicos forenses
amplían la región HV1 y HV2 del ADN y luego
cada región es secuenciada en un único
nucleótido y se compara las diferencias con la
referencia.
24. Aplicaciones prácticas de la huella
genética
• Ciencia forense. Comparar sospechosos con muestras de
sangre, cabello, saliva o semen debitadas.
• Identificación de restos humanos por comparación con
muestras de familiares.
• Pruebas de Paternidad
• Estudiar la compatibilidad en donaciones de órganos.
• Estudios de evolución de poblaciones animales salvajes.
• Estudio de la composición de los alimentos.
• Generación de hipótesis sobre las migraciones humanas
en la historia.
25. 1. Extracción del ADN
Se puede extraer ADN de casi cualquier tejido
humano. Para los ensayos de paternidad lo más
habitual es usar células bucales del interior de la
mejilla. Otras fuentes de ADN procedente de la
escena de un delito pueden ser sangre, semen,
tejido de una víctima mortal, células del folículo
capilar o incluso saliva. El ADN extraído de las
pruebas policiales se comparará con el ADN
extraído de muestras de referencia, de individuos
conocidos.
27. Lo esencial en la recuperación del
material:
•Minimizar la contaminación de la muestra
•Especial cuidado con cada elemento
•Penalizar falsos negativos y positivos
Por elemental que parezca:
•Laboratorios sólo estudian aquello que se remite
•Cuando? inicia la muestra en el laboratorio
28.
29. Normas generales
1.- Procurar condiciones de máxima esterilidad, (guantes,
pinzas, tijeras etc.).
2.- Volver a limpiar o utilizar un nuevo instrumento para
recoger un indicio diferentes.
3.- Usar diferentes recipientes para cada indicio.
4.- Etiquetar perfectamente cada uno de los recipientes
haciendo referencia a:
a. fecha y hora;
b. identificación de la víctima;
c. localización del indicio;
d. tipo de indicio;
e. número del mismo;
f. nombre de la persona que lo recoge;
g. referencia al caso judicial.
30. 5.- Enviar lo más rápidamente posible al Juzgado o
laboratorio.
6.- Es fundamental y básico tomar muestras testigo de la
víctima y sospechoso.(siempre con autorización de la
persona implicada).
7.- Tomar la filiación de todas las personas que han
intervenido o colaborado en la recogida de las evidencias
por si se produce algún problema de contaminación
cruzada
31.
32. NORMAS GENERALES EN CASOS ESPECIALES
Indicios líquidos. Se deben recoger con una jeringa
estéril; la sangre debe mantenerse anti coagulada con
EDTA. También se pueden utilizar algodón, gasa, o
hisopos estériles, para la recolección.
Indicios húmedos. Se debe dejarlos secar a
temperatura ambiente.
Manchas secas: Las podemos encontrar sobre
objetos transportables (cuchillo, bolígrafo, armas,
elementos de limpieza, etc.) o sobre objetos no
transportables (muebles, paredes, sanitarios, etc.)
33. Restos sólidos. Con la misma precaución,
procederemos a su recolección y almacenamiento.
Cuando sean antiguos podremos tomarlos directamente
usando guantes, pero sin son recientes, frágiles o
maleables debemos usar pinzas
Pelos. Siempre se mantendrá el cuidado que las
normas generales aconsejan, debiendo ser recogidos con
pinzas.
36. Ejemplos de utilización de la “huella
genética”
• El primer caso en que se utilizó esta técnica fue en un caso de
inmigración al Reino Unido. Se trataba de un chico originario de
Ghana al que, al volver de un viaje a su país, se le negó la residencia
porque su documentación parecía falsificada. Las pruebas de ADN
demostraron con un 99,997% de probabilidad, que era hermano de
los demás hijos de su madre, de nacionalidad británica, por lo que
pudo quedarse en el Reino Unido.
37. Ejemplos de utilización de la “huella
genética”
• Otro caso, de los primeros casos de repercusión internacional, fue el
de Josef Mengele, criminal de guerra nazi, cuyos supuestos restos
fueron descubiertos en 1985 en un cementerio brasileño. En 1988 se
comparó el ADN extraído de un hueso del esqueleto con el ADN de
la sangre de la esposa y el hijo de Mengele. La conclusión, con un
99,94% de probabilidad fue positiva para la identificación de los
restos encontrados como los pertenecientes a Mengele.
38. Ejemplos de utilización de la “huella
genética”
• La aceptación de la huella
genética como método
forense,
en
casos
criminales, tardó bastante
más. La condena de una
persona sobre esta base fue
considerada durante años
demasiado aventurada, a
pesar
de
que
su
comparación con otros
métodos menos precisos,
como
la
identificación
visual, le beneficiaba.
39. Ejemplos de utilización de la “huella
genética”
• En casos recientes, se ha
exonerado
a
personas
condenadas incluso a cadena
perpetua y a la pena de
muerte en su momento, sobre
la base de su ADN. El primer
caso
fue
el
del
estadounidense
Kirk
Bloodsworth, condenado a la
pena de muerte en 1985 por
el asesinato y violación de
una niña de nueve años. La
revisión del caso se produjo
en 1992 con el resultado de
que Bloodsworth quedó en
libertad en 1993.
40. Ejemplos de utilización de la “huella
genética”
• Uno de los casos más famosos de aplicación de la huella genética fue
la Oveja Dolly, presentada en 1997 como el primer mamífero
clonado de una célula adulta. Esta afirmación no se pudo sostener
científicamente hasta que se realizó la comprobación de que su ADN
era idéntico al de la oveja donante.
• Fue el equipo de Jeffreys el que probó "más allá de cualquier duda
razonable que Dolly procede de una célula del tejido mamario
tomada de la oveja adulta donante", explicó entonces Esther Signer,
autora del análisis.
41. Ejemplos de utilización de la “huella
genética”
• En determinados países este tipo de pruebas son voluntarias salvo
en caso de orden jurídicial, ya que podrían usarse como pruebas
determinantes en juicios si así lo creyese conveniente el juez de un
caso.
• El siguiente paso es el dado por algunos países, entre ellos EEUU4 y
U.K., creando bases de datos con los perfiles genéticos de muchos de
sus habitantes que los facilitaría la resolución de casos criminales
por comparación de perfiles.
42. Ejemplos de utilización de la “huella
genética”
• En la actualidad, Alec J. Jeffreys continua estudiando la técnica de
huella genética realizando recientes estudios. Concretamente, en
2006 se publicó un estudio donde se estudiaba cómo una única
hebra de DNA puede proporcionar información de las
recombinaciones ectópicas poniendo de manifiesto las diferentes
vías de recombinación meiótica en la α-globina y su relación con la
deriva de poblaciones.6 Y posteriormente, en 2007, se publicó el
estudio de regiones de los minisatélites altamente polimórficas
(VNRT’s) en el flujo genético a través de la evolución de ratones.