RanaBENAZZOUNA
Intérêts du marquage au
68
Ga pour la TEP
Application au Fucoïdane
Rana BEN AZZOUNA FRIM - Team4
PLAN
Générateur
Chimie
DOTANOC
Fucoïdan
Introduction
RanaBENAZZOUNA
Générateur
Chimie
DOTANOC
Fucoïdan
Introduction
1
Le choix du radionucléide dépend :
- de la période physique du radionucléide qui doit être assez longue pour
permettre la ...
Introduction
68
Ga
- Période : 67,83 minutes
- Emax(β+
) = 1899 keV
- Emission β+
: 89 %
- photon γ à 1077 keV : 3,22 %
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Générateur chimique Générateur GMP
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≥ 70% en début de vie
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Introduction
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Protocole 68Ga-DOTANOC et TE-GEP
Essai clinique multicentrique en collaboration avec le CHRU de Nantes
« Etude dia...
DOTANOCProduction
DOTANOCProduction
DOTANOCCQ
Critères qualité Spécifications
Contrôles libératoires
1 Activité recueillie ≥ 150MBq en fin de fabrication
2 Te...
Production automatisée
Avantages Contraintes
Possibilité de production à l’hôpital
dans un centre non équipé de
cyclotron
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DOTANOC
Cas clinique Bichat-Beaujon
Contexte clinique
- Tumeur neuroendocrine pancréatique opérée et radiofréquence de deu...
DOTANOC
Cas clinique Bichat-Beaujon
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Générateur
Chimie
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Fucoïdan
Introduction
RanaBENAZZOUNA
Générateur
Chimie
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Fucoïdan
5
Introduction
RanaBENAZZOUNA
Fucoïdan
C’est quoi?
Chevolot, L; Mulloy, B; Ratiskol, J; Foucault, A; Colliec-Jouault, S. A disaccharide r...
RanaBENAZZOUNA
Intérêt en biologie
Fucoïdan
Ligand de la P-Sélectine
K. Ley, The role of selectins in inflammation and
dis...
Sialyl Lewis X
Fucoïdan
Ligand naturel de la P-sélectine : PSGL-1
Bachelet et al, Biochimica et Biophysica Acta 2009
KD = ...
Rouzet F et al,
J Nucl Med 2011
Transaxial Coronal Sagittal
SPECT/CT
Histology
Infective endocarditis in rat
Fucoïdan: Pre...
RanaBENAZZOUNA
Fucoïdan
TEP
Fonctionnalisation: Equipe Paris 13: Pierre Saboural, Frédéric Chaubet
1) Amination du fucoïda...
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Fucoïdan
TEP
RanaBENAZZOUNA
Fucoïdan
TEP
CQ: Nadia Bouchemal: Laboratory CSPBAT, Paris 13 University, Sorbonne Paris Cité, CNRS UMR
724...
RanaBENAZZOUNA
Fucoïdan
Marquage: simple, pas de chimie complexe
- 100 nmoles d’ Asphy-Nodaga
- Tampon acétate pH 4.5
- El...
RanaBENAZZOUNA
Fucoïdan
TEP
Modèle d’endocardite infectieuse, rat
Conclusion et perspectives
Conclusion et perspectives
RadioMedix  développement de kit GalioMedix® : pour préparer 68
Ga-DOTATATE
AAA  Kits d’analogues de la somatostatine à ...
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Intérêts du marquage au 68Ga pour la TEP-application au fucoïdan

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Marquage au gallium 68, fonctionnalisation d'un polysaccharide, développement de traceur polysaccharidique pour l'imagerie TEP cardiovasculaire

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Intérêts du marquage au 68Ga pour la TEP-application au fucoïdan

  1. 1. RanaBENAZZOUNA Intérêts du marquage au 68 Ga pour la TEP Application au Fucoïdane Rana BEN AZZOUNA FRIM - Team4
  2. 2. PLAN Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan Introduction
  3. 3. RanaBENAZZOUNA Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan Introduction 1
  4. 4. Le choix du radionucléide dépend : - de la période physique du radionucléide qui doit être assez longue pour permettre la production et l’utilisation du radiotraceur, et pas très longue par rapport à la demi-vie biologique afin d’éviter une irradiation inutile du patient. - Le mode de désintégration - La radiochimie du traceur - La disponibilité et le coût - La cinétique du traceur. Introduction
  5. 5. Introduction 68 Ga - Période : 67,83 minutes - Emax(β+ ) = 1899 keV - Emission β+ : 89 % - photon γ à 1077 keV : 3,22 % - photon γ à 1833 keV : 0,137 %
  6. 6. Introduction 11 C 13 N 15 O 18 F 52 Fe 62 Zn /62 Cu 64 Cu 66 Ga68 Ge/68 Ga 76 Br 82 Sr/82 Rb 86 Y 124 I 44 Ti/44 Sc 110 In (20,4 min) (9,96 min) (2,05 min) (110 min) (67,6 min) (9,74 min) (76 sec) (3.97 h) Générateur Cyclotron
  7. 7. PLAN Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan Introduction
  8. 8. RanaBENAZZOUNA Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan Introduction 2
  9. 9. Générateur chimique Générateur GMP Générateur Rendement d’élution ≥ 70% en début de vie ≥ 45% après 3 ans ou 400 élutions > 60 % de l’activité nominale Impuretés 68 Ge ≤ 0,005 % ≤ 0,001 % Impuretés métalliques ++++ Fe < 10 μg / GBq Zn < 10 μg / GBq Microbiologie ??? Stérile Endotoxines bactériennes ??? < 30UI/mL Générateur 68 Ge/68 Ga Matrice : TiO2 Eluant: HCl 0.1N
  10. 10. Générateur 68 Ge/68 Ga 90
  11. 11. Générateur 68 Ge/68 Ga Production du 68 Ge Roesch and Riss. The Renaissance of the 68Ge/68Ga Radionuclide Generator Current Topics in Medicinal Chemistry, 2010, Vol. 10, No. 15 Zn2+ Fe3+ Cu2+
  12. 12. PLAN Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan Introduction
  13. 13. RanaBENAZZOUNA Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan Introduction 3
  14. 14. Marquage au 68 Ga Cible Vecteur ? Fixation stable Transferrine NOTA DOTA Spacer
  15. 15. + 68 Ga3+ Marquage au 68 Ga + 68 Ga3+
  16. 16. HCl 0,1N Purification Marquage au 68 Ga 1ère difficulté du marquage: impuretés
  17. 17. < 3< 3 > 7> 7Hydrolyse du GaHydrolyse du Ga pH (Ga(H2O)6)3+ stable 3 7 pH marquage Stabilité vecteur Stabilité du Ga3+  Utilisation de tampons 2ème difficulté de marquage: le gallium ne se fixe que sous forme Ga3+ Marquage au 68 Ga
  18. 18. PLAN Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan Introduction
  19. 19. RanaBENAZZOUNA Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan 4 Introduction
  20. 20. DOTANOC Protocole 68Ga-DOTANOC et TE-GEP Essai clinique multicentrique en collaboration avec le CHRU de Nantes « Etude diagnostique comparative multicentrique et prospective de la TEP/TDM au 68Ga-DOTANOC et des procédures d’imagerie conventionnelle (scintigraphie à l’OctréoScan® et TDM/IRM) dans le bilan des tumeurs endocrines gastro-entéro-pancréatiques » Investigateur principal : Dr. Catherine Ansquer (CHU de Nantes)
  21. 21. DOTANOCProduction
  22. 22. DOTANOCProduction
  23. 23. DOTANOCCQ Critères qualité Spécifications Contrôles libératoires 1 Activité recueillie ≥ 150MBq en fin de fabrication 2 Test d’intégrité du filtre maintien d’une pression de 2 bars 3 Caractères organoleptiques Solution Claire et incolore 4 Volume 10 mL (volume maximal injectable chez l’homme) 5 pH 4,5-7 6 PRC par HPLC >90% Contrôles post-libératoires 7 Stérilité (after release) Stérile (conformément à la méthode de ) 8 Teneur en 68 Ge (after release) < 0,001% de l’activité totale à libération 9 Endotoxines (after release) 175UI/10mL. (volume maximum injectable de 10mL)  17,5UI/mL 10 Ethanol (after release) < 79g/L (< 10%V/V). 11 Acétone résiduelle (after release) < 7,15 g/L (< 50 mg par jour d après ICH guidline on residual solvant ; 1994)
  24. 24. Production automatisée Avantages Contraintes Possibilité de production à l’hôpital dans un centre non équipé de cyclotron Investissement ++++  équipement: module de synthèse locaux: enceinte classe C dans un environnement classe C Dosimétrie très avantageuse Contrôle qualité: existence dans le centre d’équipements adéquats pour le CQ: - HPLC, CPG, nécessaire pour le contrôle microbiologique… Chronophage: une journée de travail pour une production sans compter les contrôles post- libératoires
  25. 25. DOTANOC Cas clinique Bichat-Beaujon Contexte clinique - Tumeur neuroendocrine pancréatique opérée et radiofréquence de deux nodules hépatiques. - TDM et IRM: deux nodules hépatiques, suspicion de métastases hépatiques Octreoscan -La fixation hépatique est homogène sans foyer d’hyperfixation visualisé - Le foyer d’hyperfixation hépatique en tomoscintigraphie semble artefactuel Absence de foyer d’hyperfixation pathologique au niveau du foie et ailleurs
  26. 26. DOTANOC Cas clinique Bichat-Beaujon
  27. 27. PLAN Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan Introduction
  28. 28. RanaBENAZZOUNA Générateur Chimie DOTANOC Fucoïdan 5 Introduction
  29. 29. RanaBENAZZOUNA Fucoïdan C’est quoi? Chevolot, L; Mulloy, B; Ratiskol, J; Foucault, A; Colliec-Jouault, S. A disaccharide repeat unit is the major structure in fucoidans from two species of brown algae. Carbohydr. Res 2001, 330, 529–535 Structure of sulfated oligofucoidan constitutive of algal fucoidan from Ascophyllum nodosum Polyfucose avec des groupements esters sulfates
  30. 30. RanaBENAZZOUNA Intérêt en biologie Fucoïdan Ligand de la P-Sélectine K. Ley, The role of selectins in inflammation and disease, Trends Mol Med 9 (2003) 263-8 thrombine Berman et al, J Clin Invest 1986 Immunofluorescent localization of P-selectin in whole platelets.
  31. 31. Sialyl Lewis X Fucoïdan Ligand naturel de la P-sélectine : PSGL-1 Bachelet et al, Biochimica et Biophysica Acta 2009 KD = 1,2 nM Binding of Fucoidan on P-selectin Fucoïdan: an analogue of PSGL-1 Intérêt en biologie Fucoïdan
  32. 32. Rouzet F et al, J Nucl Med 2011 Transaxial Coronal Sagittal SPECT/CT Histology Infective endocarditis in rat Fucoïdan: Preuve de concept : SPECT
  33. 33. RanaBENAZZOUNA Fucoïdan TEP Fonctionnalisation: Equipe Paris 13: Pierre Saboural, Frédéric Chaubet 1) Amination du fucoïdan 2) Fixation du chélatant
  34. 34. RanaBENAZZOUNA Fucoïdan TEP
  35. 35. RanaBENAZZOUNA Fucoïdan TEP CQ: Nadia Bouchemal: Laboratory CSPBAT, Paris 13 University, Sorbonne Paris Cité, CNRS UMR 7244, SBMB team, F-93017, Bobigny, France
  36. 36. RanaBENAZZOUNA Fucoïdan Marquage: simple, pas de chimie complexe - 100 nmoles d’ Asphy-Nodaga - Tampon acétate pH 4.5 - Elution directe dans le flacon CQ : HPLC, ES, Nitrate de Na PRC = 89% sans purification post-marquage pH : 4 TEP Incubation 5 minutes à température ambiante
  37. 37. RanaBENAZZOUNA Fucoïdan TEP Modèle d’endocardite infectieuse, rat
  38. 38. Conclusion et perspectives
  39. 39. Conclusion et perspectives
  40. 40. RadioMedix  développement de kit GalioMedix® : pour préparer 68 Ga-DOTATATE AAA  Kits d’analogues de la somatostatine à marquer au 68 Ga Kit lyophilisé renfermant le peptide Kit lyophilisé renfermant le peptide Elution du 68Ga à partir du générateur Chauffage 10’ à 95 °C CQ 68 Ga-DOTATATE prêt à être administré Conclusion et perspectives Kit 68 Ga-Fucoïdan ?

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