1. U s e o f t h e S O S - c h r o m o t e s t S p o t A s s a y a s a S c r e e n i n g
S y s t e m f o r D e t e c t i n g G e n o t o x i c C o m p o u n d s i n C r u d e
P l a n t E x t r a c ts
D a n i e l A r r i e t a B a e z , ^ G e r a r d o Z e p e d a V a l l e j o , ^ P a t r i c i a C a n o Sánchez,^ M a t i l d e Breña V a l l e ,^
R i c a r d o R e y e s C h i l p a ' ' a n d M a n u e l Jiménez E s t r a d a^
i n s t i t u t o de Química, U N A M . Ciudad Universitaria. Coyoacán. CP 0 4 5 1 0 , México DF, México;
^ D e p a r t a m e n t o de Química Orgánica, Escuela Nacional de Ciencias Biológicas-IPN, Prolongación Carpió y
Plan de a y a l a . CP 1 1 3 4 0 , México DF. México; ^ D e p a r t a m e n t o de Biología, I n s t i t u t o Nacional de
Investigaciones Nucleares, Carretera Federal México-Toluca Km 3 8 . México
S u m m a f 7 — A n S O S - c h r o m o t e s t s p o t a s s a y w a s u s e d t o d e t e c t g e n o t o x i c c o m p o u n d s i n c r u d e p l a nt
e x t r a c t s T h e m e t h o d a l l o w s s i m u l t a n e o u s t e s t i n g o f e x t r a c t s f r o m d i f f e r e n t s p e c i e s i n e i t h e r a l i q u i d o r a
s o l t d c r y s t a l l i n e f o r m . E x t r a c t s f r o m t w o s p e c i e s o f t h e g e n u s S e n n a , n a t i v e t o t h e s t a t e o f M o r e l o s , Méx­i
c o , w e r e a s s a y e d , F o u r g e n o t o x i c c o m p o u n d s w e r e i s o l a t e d . a n d w e r e i d e n t i f i e d a s q u e r c e t i n a n d r u t in
f r o m 5. wislizení. a n d 5,7-di-0-methylrutÍn a n d 5 , 7 - d i - O - m e t h y l q u e r c e t i n f r o m S. skinneri. The S O S - c h r o ­m
o t e s t s p o t a s s a y p r o v e d t o b e u s e f u l f o r a c t i v i t y - g u i d e d f r a c t i o n a t i o n a t t h e b e g i n n i n g o f s c r e e n i n g f or
g e n o t o x i c c o m p o u n d s i n c r u d e p l a n t e x t r a c t s.
K e y w o r d s ; SOS-chromotest, genotoxic compounds. Senna, flavonoids. a n t i t u m o r a l compounds.
I n t r o d u c t i o n
T h e u s e o f e x t r a c t s o f m e d i c i n a l p l a n t s h a s
i n c r e a s e d i n r e c e n t d e c a d e s , b u t H t t l e I n f o r m a t i o n i s
a v a i l a b l e o n t h e i r p o t e n t i a l r i s k t o h e a l t h . M a n y o f
t h e s e p l a n t s c o n t a i n c h e m i c a l s u b s t a n c e s k n o w n t o
b e m u t a g e n i c a n d / o r c a r c i n o g e n i c . E v a l u a t i o n o f t h e
m u t a g e n i c a c t i v i t y o f m e d i c i n a l p l a n t s i s n e e d e d , i n
o r d e r t o estímate t h e r i s k t o h u m a n h e a l t h t h a t
m a y r e s u l t f r o m t h e i r p r o l o n g e d u s e . O n t h e b a s i s o f
e t h n o b o t a n i c a l i n f o r m a t i o n , a n u m b e r o f g e n e r a l
t o x i c i t y b i o a s s a y s h a v e b e e n d e v e l o p e d a s s c r e e n i ng
a s s a y s ( 1 ).
T h e g e n u s Senna is k n o w n t o p o s s e s s i m p o r -
t a n t m e d i c i n a l p r o p e r t i e s , a n d i s a r i c h s o u r c e o f
a n t h r a q u i n o n e s a n d f l a v o n o i d s ( 2 ) . T h e b r o ad
s p e c t r u m o f b i o l o g i c a l a c t i v i t y w i t h i n t h e g r o u p ,
a n d t h e m u l t i p U c i t y o f a c t i o n s s h o w n b y Senna,
a r e r e l a t e d t o t h e p r e s e n c e o f f l a v o n o i d s , w h i c h
a r e b e n z o - l , 4 - p y r o n e d e r i v a t i v e s i s o l a t e d f r om
n a t u r a l s o u r c e s , F r o m t h e p h a r m a c o l o g i c a l p o i nt
o f v i e w , f l a v o n o i d s a r e o n e o f t h e m o s t i n t r i g u i n g
c l a s s e s o f b i o l o g i c a l l y a c t i v e c o m p o u n d s . A n u m ­b
e r o f k n o w n f l a v o n o i d s w i t h p l a n a r a n d n o n - p l a -
n a r r i n g s y s t e m s s h o w h i g h t o x i c i t i e s a n d
a n t i t u m o r a l a c t i v i t i e s ( 3 ) . D i e t a r y f l a v o n o i d s a r e
k n o w n t o b e a n t i p r o l i f e r a t i v e , a n d m a y p l a y a n
i m p o r t a n t r o l e i n p r e v e n t i n g c a n c e r s , e s p e c i a l ly
t h o s e o f t h e g a s t r o i n t e s t i n a l t r a c t ( 4 ) . T h e a n t i t u ­m
o r a l a c t i v i t y o f n a t u r a l l y o c c u r r i n g f l a v o n o i ds
c o u l d b e r e l a t e d t o t h e i r g e n o t o x i c i t y , a n d a g e n o -
t o x i c i t y a s s a y c a n b e u s e d t o d e t e c t f l a v o n o i d s a t
t h e b e g i n n i n g o f a s e t o f b i o l o g i c a l a s s a y s . P r e v i -
c u s s t u d i e s h a v e s h o w n a s t r o n g a s s o c t a t i on
b e t w e e n S O S g e n o t o x i c i t y a n d a n t i t u m o r a l a c t i v ­i
t y ( 5 ) . S e v e r a l p u b l i c a t i o n s h a v e d e s c r i b e d t e c h -
n i q u e s f o r d e t e c t i n g t h e m u t a g e n i c i t y a n d
g e n o t o x i c i t y o f Senna, but i t i s n e c e s s a r y t o u s e
c o m p o n e n t s i n a puré f o r m ( 6 , 7 ) . T h e S O S - c h r o ­m
o t e s t i s a c o l o r i m e t r i c a s s a y t h a t m e a s u r e s t h e
g e n e e x p r e s s i o n i n d u c e d b y g e n o t o x i c a g e n t s . T h i s
s h o r t - t e r m g e n o t o x i c a s s a y i s o n e o f t h e m o s t
r a p i d a n d m o s t s i m p l e t e s t s f o r d e t e c t i n g g e n o t o x ­i
c i t y ( 8 ) . I n t h i s s t u d y , i t w a s u s e d t o d e t e c t a n d
i s o l a t e g e n o t o x i c c o m p o u n d s f r o m c r u d e p l a nt
e x t r a c t s t h r o u g h a n a c t i v i t y - g u i d e d p u r i f i c a t i o n
p r o c e s s . F o r t h i s p u r p o s e , q u a l i t a t i v e d a t a f r om
t h e v a r i o u s f r a c t i o n s a r e s u f T i c i e n t t o p e r m i t m o n -
i t o r i n g o f t h e p u r i f i c a t i o n p r o c e s s .
M a t e r i a l s a n d M e t h o d s
P l a n t m a t e r i a l
S. skinneri and S. wislizení w e r e c o l l e c t e d f r om
M o r e l o s S t a t e , México, a n d w e r e c l a s s i f i e d a t t h e
H e r b a r i o N a c i o n a l d e l I n s t i t u t o d e Biología, U N A M
( M E X U ) .
M i c r o o r g a n i s m s
G e n o t o x i c c o m p o u n d s w e r e d e t e c t e d b y u s i n g
E s c h e r i c h i a cali P Q 3 7 [ c r i t i c a l m a r k e r s:
s r i A : : M u d ( A p l a c ) c t s , l a c ( U 1 6 9 , m a l - H , uvr-í-, g a l E
g a l Y , P h o C ) J ( 8 ) .

2. 8 8 D A . Baez et al.
F i g u r e 1: S t r u c t u r e s o f g e n o t o x i c c o m p o u n d s i s o l a t e d f r o m Senna wislizení a n d Senna
skinneri
C u l t u r e m e d i a
M 6 3 médium c o n t a i n s 1 5 g D i f c o m i n i m a l a g a r,
1 3 , 6 g K H 2 P O 4 , 2 g ( N H 4 ) S 0 4 , 0 . 5 m g FeSOí.THgO
a n d 0 . 2 g M g S 0 4 . 7 H 2 0 p e r l i t r e o f d i s t i l l e d w a t e r ,
a d j u s t e d t o p H 7 w i t h K O H . S T A médium p l a t es
u s e d i n t h e S O S - c h r o m o t e s t s p o t a s s a y w i t h o u t
m e t a b o l i c a c t i v a t i o n c o n t a i n e d 2 m l l a c t o s e ( 2 0 % ),
0 , 5 m l g l u c o s e ( 2 0 % ) , 2 m l t r y p t o p h a n ( 1 % ) , 2 m l
u r a c i l ( 1 % ) , 2 m l t h i a m i n e ( 1 % ) , 2 m l ampiciUín
( l O m g / m l ) a n d 2 m l X g a l { 2 0 m g / m l D M S O ) p e r U t r e
o f M 6 3 médium. T h e S T B médium p l a t e s u s e d i n
t h e S O S - c h r o m o t e s t s p o t t e s t w i t h m e t a b o l i c a c t i ­v
a t i o n c o n t a i n e d t h e s a m e S T A médium, b u t w i t h ­o
u t g l u c o s e.
A c t i v a t i o n m i x t u r e
A n S 9 m i c r o s o m e f r a c t i o n w a s p r e p a r e d f r o m r a ts
p r e - t r e a t e d w i t h A r o c l o r 1 2 5 4 . T h e a c t i v a t i o n m i x ­t
u r e p e r l O m g o f S 9 m i x c o n s i s t e d o f 0 . 2 m l s a l t s o l u -
t i o n ( 1 . 6 5 M K C l + 0 . 4 M M g C l 2 . 6 H 2 0 ) , 0 . 5 m l G - 6 - P
( I M ) , O . l S m l N A D P ( O . I M ) , 2 . 5 m l t r i s b u f f er
[ t r i s ( h y d r o x y m e t h y l ) m e t h y l a m i n e ] ( 0 . 4 M , p H 7.4),
a n d 6 . 1 m l L u r i a médium.
R e a g e n t s a n d t e s t s a m p l e s
5 - B r o m o - 4 - c h l o r o - 3 - i n d o l y l - p - g a l a c t o s i d e ( X g a l)
M i t o m y c i n C ( M M C ) w a s f r o m S i g m a ( T o i u c a , M e x -

3. S c r e e n i n g a y s t e m f o r g e n o t o x i n s i n p l a n t e x t r a c ts
F i g u r e 2: M i t o m y c i n C p o s i t i v e c o n t r ol
A blue ring round the inhibition zone indícales that the compound is genotoxic.
F i g u r e 3: S O S - c h r o m o t e s t s p o t a s s a y o f S e n n a wislizeni
Fraction 1 and fraction 4 from a methanolic extmct shoufd genutoxic activity.

4. 90 D A . Baez et al.
F i g u r e 4: S O S - c h r o m o t e s t s p o t a s s a y o f Senna skinneri
Fraction 2 and fraction 3 from a methanolic extract ahowed genotoxic activity.
i c o ) . Q u e r c e t i n ( 1 ) a n d r u t i n ( 2 ) w e r e i s o l a t e d f r o m
a m e t h a n o l i c e x t r a c t o f S. wislizeni, and 5 , 7 - d i - O -
m e t h y l r u t i n ( 3 ) a n d 5 , 7 - d i - O - m e t h y l q u e r c e t i n ( 4 )
w e r e i s o l a t e d f r o m S. skinneri. T h i s a s s a y u s e d 2 0 | il
o f a l O m g / m l c r u d e p l a n t e x t r a c t o r f l a v o n o i d p e r
píate.
S O S - c h r o m o t e s t s p o t a s s a y p r o c e d u re
O . l m l o f a n o v e r n i g h t c u l t u r e o f t h e s t r a i n t o b e
t e s t e d w a s d i l u t e d i n 5 m l o f L u r i a - a m p i c i l l i n
médium, a n d t h e c u l t u r e w a s i n c u b a t e d a t 3 7 ' ' C i n a
g y r a t o r y i n c u b a t o r t o a c o n c e n t r a t i o n o f 2 x 1 0 ^
b a c t e r i a ' m l . F r a c t i o n s o f O . l m l o f t h e c u l t u r e w e re
t h e n d i s t r i b u t e d i n t o t e s t t u b e s . F o r t h e m e t a b o l i c
a c t i v a t i o n t e s t , 0 . 4 m l o f S 9 m i x w a s a d d e d t o e a ch
t e s t t u b e , f o l l o w e d b y 2 . 5 m l o f m e l t e d t o p a g a r a t
4 5 - 5 0 ' ' C . T h e t u b e w a s t h e n v o r t e x e d a n d t h e c o n ­t
e n t a w e r e p o u r e d i m m e d i a t e l y o n t o a n S T B
médium píate. l O m l o f t h e e x t r a c t o r c o m p o u n d t o
b e t e s t e d w a s s p o t t e d o n t o t h e c e n t r e o f t h e píate.
A f l e r i n c u b a t i o n o v e r n i g h t a t 3 7 ' ' C , t h e p r e s e n c e o f
a b l u e r i n g a r o u n d a z o n e o f i n h i b i t i o n i n d i c a t ed
t h a t a c o m p o u n d w a s g e n o t o x i c ( 8 ) . T h e a s s a y w a s
p e r f o r m e d i n triplícate, w i t h M M C a n d H j O ,
. • e s p e c t i v e l y , a s p o s i t i v e a n d n e g a t i v e c o n t r o l a.
A c t i v e c o m p o u n d i s o l a t i o n
T h e g r o u n d a e r i a l p a r t s o f S. skinneri and 5 . wislizeni
( 4 0 0 g ) w e r e e x t r a c t e d s u c c e s s i v e l y w i t h h e x a n e a n d
m e t h a n o l a t r o o m t e m p e r a t u r e . P r e l i m i n a r y r e s u l ta
s h o w e d t h a t o n l y t h e m e t h a n o l i c e x t r a c t w a s a c t i v e i n
t h e S O S - c h r o m o t e s t s p o t a s s a y . T h e d r i e d m e t h a n o l i c
e x t r a c t w a s s u b j e c t e d t o p r e p a r a t i v o t h i n - l a y e r c h r o -
m a t o g r a p h y íTIX:;) w i t h e t h y l a c e t a t e : m e t h a n o l : w a t er
( 2 0 : 3 : 1 ) , t o g i v e f o u r fractiorj.
T w o a c t i v e c o m p o u n d s w e r e i s o l a t e d f r o m S. wis­lizeni,
w h i c h w e r e i d e n t i f i e d a s q u e r c e t i n a n d r u t i n ,
respectiveíy, b y c o l u m n c h r o m o t o g r a p h y . T w o
o t h e r a c t i v e c o m p o u n d s , 5.7-di-0-methyÍrutÍn a n d
5 , 7 - d i - O - m e t h y l q u e r c e t i n . w e r e i s o l a t e d f r o m S.
skinneri ( F i g u r e 1 ; 1 0 ) .
R e s u l t s a n d D i s c u s s i on
T h e g e n u s Senna c o m p n s e s w i l d p l a n t s , h e r b s a n d
s h r u b s , w h i c h a r e u s e d i n t h e i n d i g e n o u s M e x i c an

5. S c r e e n i n g s y s t e m For g e n o t o x i n s i n p l a n t e x t r a c ts 9 1
F i g u r e 5: Q u e r c e t i n a n d 5 , 7 - d i - O - m e t h y l q u e r c e t i n w e r e r e s p o n s i b l e f o r g e n o t o x i c a c t i v i t y i n
t h e o r i g i n a l m e t h a n o l i c e x t r a ct
m e d i c i n a l s y s t e m . O n t h e b a s i s o f e t h n o b o t a n i c a l
i n f o r m a t i o n , w e i d e n t i f i e d 2 3 Senna species i n
M o r e l o s , México, s i x o f w h i c h w e r e n a t i v e s p e c i e s.
S e v e r a l c o m p o u n d s h a v e b e e n i s o l a t e d f r om
Senna, a m o n g w h i c h t h e flavonoids, w h i c h s h o w a
h i g h t o x i c i t y a n d a n t i t u m o r a l a c t i v i t y , a r e a n
i m p o r t a n t g r o u p.
T h e a n t i n e o p l a s t i c a c t i v i t i e s o f c o m p o u n d s a re
r e l a t e d t o t h e i r a b i l i t y t o i n d u c e g e n o t o x i c a c t i v i ty
a n d / o r m u t a t i o n s i n S a l m o n e l l a typhimurium
T A 9 8 , T A I O O a n d T A 1 0 2 . E m p i r i c a l r e l a t i o n s h i p s
b e t w e e n g e n o t o x i c p o t e n c y , m u t a g e n i c p o t e n c y a nd
a n t i t u m o r a l a c t i v i t y h a v e b e e n r e p o r t e d ( 5 ).
T h e r e a r e a n u m b e r o f m e t h o d s f o r i n v e s t i g a t i n g
m u t a g e n i c i t y a n d g e n o t o x i c i t y b u t , i n m o s t o f t h e se
m e t h o d s , t h e i s o l a t e d c o m p o u n d s h a v e t o b e p u r i -
fied b e f o r e t h e y c a n b e t e s t e d f o r b i o l o g i c a l a c t i v i t y .
A s c r e e n i n g m e t h o d w a s r e q u i r e d f o r a l a r ge
g r o u p o f e x t r a c t s t h a t c o u l d d e t e c t a n y g e n o t o x ic
c o m p o u n d s p r e s e n t , a n d w h i c h w o u l d p e r m i t s u b s e -
q u e n t a c t i v i t y - g u i d e d p u r i f i c a t i o n . B e c a u s e t he
m a i n p u r p o s e o f t h i s w o r k w a s t o d e t e c t a n d i s o l a te
g e n o t o x i c c o m p o u n d s f r o m c r u d e p l a n t e x t r a c t s,
a n d b e c a u s e o t h e r c o m p o n e n t s o f t h e s e e x t r a c ts
c o u l d i n t e r f e r e c o l o r i m e t r i c a l l y w i t h a H q u i d - b a s ed
p r o t o c o l , o n l y q u a n t i t a t i v e d a t a r e l a t i n g t o t h e u se
o f t h e S O S - c h r o m o t e s t a s s a y a r e r e p o r t e d .
F o r t h i s p u r p o s e , t h e S O S - c h r o m o t e s t s p o t a s s ay
w a s u s e d t o i d e n t i f y g e n o t o x i c s u b s t a n c e s . T h is
a s s a y i s b a s e d o n t h e S O S r e s p o n s e o f E. coli t o
D N A - d a m a g i n g a g e n t s , f o U o w i n g i n c u b a t i o n o f t h e
t e s t e r s t r a i n w i t h t h e t e s t a g e n t . A f t e r a l l o w i n g s u f -
ficient t i m e f o r p r o t e i n s y n t h e s i s , t h e i n d u c t i o n o f
P - g a l a c t o s i d a s e i s d e t e c t e d o n i n d i c a t o r p l a t e s c o n -
t a i n i n g a s u b s t r a t e (Xgaü = 5 - b r o m o - 4 - c h l o r o - 3 -
i n d o l y l - p - D - g a l a c t o s i d e ) w h i c h r e l e a s e s a c o l o u r ed
d y e w h e n i t i s h y d r o l y s e d b y p-gEÜactosidase. A b l u e
r i n g a r o u n d a n i n h i b i t i o n z o n e indícates t h a t t h e
c o m p o u n d i s g e n o t o x i c ( 8 ).
T h e S O S - c h r o m o t e s t W E I S a p p l i e d t o e x t r a c t s o f S .
skinneri and S. wislizeni, in o r d e r t o i d e n t i f y c o m ­p
o u n d s w i t h g e n o t o x i c a c t i v i t y . N o p r e v i o u s p h y t o -
c h e m i c a l s t u d i e s h a d b e e n r e p o r t e d.
T h e g r o u n d a e r i a l p a r t s o f S . skinneri and S. wis­lizeni
( 4 0 0 g ) w e r e e x t r a c t e d s u c c e s s i v e l y w i th
h e x a n e a n d m e t h a n o l . E x t r a c t s w e r e s u b j e c t e d t o a
p r e l i m i n a r y s t u d y w i t h t h e S O S - c h r o m o t e s t s p ot
a s s a y , a n d o n l y t h e m e t h a n o l i c e x t r a c t s s h o w e d a
g e n o t o x i c a c t i v i t y , i n d i c a t e d b y t h e p r e s e n c e o f a
b l u e r i n g a r o u n d a z o n e o f i n h i b i t i o n o n t h e píate.

6. 92 D A - B a e i et ai.
T h e a s s a y s w e r e p e r f o r m e d i n t r i p H c a t e . M M C a n d
H 2 O w e r e u s e d a s p o s i t i v e a n d n e g a t i v e c o n t r o l s,
respectiveíy ( F i g u r e 2 ; M M C p o s i t i v e c o n t r o l ) .
T h e a c t i v e e x t r a c t s w e r e s e p a r a t e d b y p r e p s i r a -
t i v e T L C ( e t h y l acétateiMeOHiHaO [ 2 0 : 3 : 1 ] ) t o g i v e
f o u r f r a c t i o n s f r o m e a c h o f t h e m . T h e s e f r a c t i o ns
w e r e t e s t e d b y t h e S O S - c h r o m o t e s t a s s a y . T w o f r a c ­t
i o n s f r o m S . wislizeni s h o w e d g e n o t o x i c a c t i v i ty
( F i g u r e 3 : f r a c t i o n 1 a n d f r a c t i o n 4 ) . A c t i v e f r a c ­t
i o n s w e r e s u b j e c t e d t o c o l u m n c h r o m o t o g r a p h y o n
s i h c a , a n d t w o p r i n c i p a l c o m p o u n d s w e r e i s o l a t ed
a n d i d e n t i f i e d a s q u e r c e t i n a n d r u t i n ( F i g u r e 1 ; R f
= 9 a n d 0 . 3 . respectiveíy; K O H 5 % ) ; i H - N M R a n d
1 3 C - N M R s p e c t r a w e r e i d e n t i c a l t o t h o s e r e p o r t ed
i n t h e l i t e r a t u r e ( 9 ) .
T h e a c t i v e f r a c t i o n s f r o m S. skinneri gave t w o
a c t i v e c o m p o u n d s ( F i g u r e 4 ) , w h i c h h a d p r e v i o u s l y
b e e n c h a r a c t e r i s e d a s 5 , 7 - d i - O - m e t h y l r u t i n a n d t h e
a g l y c o n e , 5 , 7 - d i - O - m e t h y l q u e r c e t i n ( F i g u r e 1 ; R f =
0 . 2 3 a n d 0 . 5 5 , respectiveíy; K O H 5 % ; 1 0 ) .
Q u e r c e t i n a n d 5 , 7 - d i - O - m e t h y l q u e r c e t i n ( c o m ­p
o u n d s 1 a n d 4 ) w e r e t e s t e d a t t h e s a m e c o n c e n ­t
r a t i o n , i n o r d e r t o demónstrate t h a t t h e y w e re
r e s p o n s i b l e f o r t h e g e n o t o x i c a c t i v i t y i n t h e o r i g i ­n
a l m e t h a n o l i c e x t r a c t ( F i g u r e 5 ) . T h e m u t a g e n i c ­i
t y o f t h e s e c o m p o u n d s h a s a l r e a d y b e e n r e p o r t ed
i n t h e l i t e r a t u r e ( 6 , 7 ) . I s o l a t e d fiavonoids h a ve
s t r u c t u r a l f e a t u r e s t h a t a p p e a r t o b e e s s e n t i a l f o r
g e n o t o x i c a n d m u t a g e n i c a c t i v i t y : a b a s i c fiavonoid
s t r u c t u r e w i t h a f r e e h y d r o x y l g r o u p a t p o s i t i o n 3
a n d a k e t o g r o u p a t p o s i t i o n 4 — a s t r u c t u r e t h a t
p e r m i t s t h e protón o f t h e 3 - h y d r o x y l g r o u p t o t a u -
t o m e r i s e t o f o r m t h e 3 - k e t o c o m p o u n d a n d a 2 , 3
d o u b l e - b o n d . C o m p o u n d s t h a t s h o w g e n o t o x i c a n d
m u t a g e n i c a c t i v i t y c a n p o s s e s s a n t i n e o p l a s t ic
a c t i v i t y .
T h e a m o u n t o f q u e r c e t i n i s o l a t e d f r o m S. wis­lizeni
w a s h i g h e r t h a n t h e levéis f o u n d i n m e d i c i n a l
p r o d u c t s a n d i n t h e r e g u l a r d i e t ( 1 1 ) . T h e r e f o r e , w e
c o n c l u d e t h a t n o r i s k n e c e s s a r i l y e x i s t s i n t h e t h e r -
a p e u t i c u s e o f t h i s p l a n t .
T h e S O S - c h r o m o t e s t s p o t a s s a y - b a s e d m e t h od
c a n h e l p i n i n v e s t i g a t i n g c o m p o u n d s i n c r u d e
e x t r a c t s f r o m m e d i c i n a l p l a n t s , a n d c a n b e u s e d
s u c c e s s f u U y w i t h s o l i d c r y s t a l l i n e s a m p l e s , I t a l s o
p r o v i d e s a m e t h o d t h a t c o u l d b e u s e d t o g u i d e t h e
p u r i f i c a t i o n o f g e n o t o x i c c o m p o u n d s.
A c k n o w l e d g e m e n t s
T h e a u t h o r s a r e i n d e b t e d t o J u a n A n t o n i o C o r r ea
( I N I N ) f o r technicíd a a s i s t a n c e i n t h e b i o l o g i c al
a s s a y s . W e t h a n k M C C i t l a l i G u e r r e r o f o r r e v i e w i n g
t h e m a n u s c r i p t . T h i s w o r k w a s f u n d e d b y a C O N A -
C y T ( N o . 9 1 9 8 8 ) a n d a P I F I - I P N s c h o l a r s h i p .
R e c e i v e d 2 4 . 0 7 . 0 1 ; r e c e i v e d in f i n a l f o r m 2 6 . 1 0 . 0 1;
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