Ce diaporama a bien été signalé.
Nous utilisons votre profil LinkedIn et vos données d’activité pour vous proposer des publicités personnalisées et pertinentes. Vous pouvez changer vos préférences de publicités à tout moment.

طرق عزل الخلايا الجذعية

3 069 vues

Publié le

Publié dans : Sciences
  • Soyez le premier à commenter

طرق عزل الخلايا الجذعية

  1. 1. ‫تقديم‬: ‫غمكين‬‫ي‬ ‫القاض‬ ‫محمد‬ ‫و‬ ‫حسن‬ ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬ ‫وفصل‬ ‫عزل‬ ‫من‬‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬‫املبادىء‬‫االساسية‬ ‫العالجية‬ ‫التطبيقات‬ ‫الى‬
  2. 2. ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬ ‫عزل‬ ‫طرق‬ ‫الخواص‬‫على‬‫املعتمدة‬‫الفصل‬‫ق‬‫طر‬‫الفيزوكيميائية‬: ‫بواسطة‬‫الفصل‬‫التثفيل‬ ‫على‬‫اعتمادا‬ ‫الفصل‬‫ة‬‫ر‬‫القد‬‫االلتصاقية‬‫للخاليا‬
  3. 3. ‫بواسطة‬ ‫الفصل‬‫التثفيل‬ ‫ماهو‬‫؟‬ ‫التثفيل‬
  4. 4. Differential centrifugation *‫ف‬ ‫جيدا‬ ‫فصل‬ ‫تعطي‬ ‫ال‬ ‫تقليدية‬ ‫طريقة‬‫حالة‬ ‫ي‬ ‫بالكثافة‬ ‫المتقاربة‬ ‫والمواد‬ ‫الخاليا‬ *‫مخت‬ ‫بسرعات‬ ‫مرات‬ ‫عدة‬ ‫للتثفيل‬ ‫وتحتاج‬‫لفة‬ *‫للتثفيل‬ ‫اخرى‬ ‫طرق‬ ‫عدة‬ ‫تطوير‬ ‫تم‬ ‫التثفيل‬ ‫منها‬‫بمدروج‬‫التراكيز‬ Density gradient centrifugation
  5. 5. Density gradient centrifugation *‫الفصل‬ ‫انبوب‬ ‫ضمن‬ ‫متدرجة‬ ‫كثافته‬ ‫تكون‬ ‫ضمنه‬ ‫التثفيل‬ ‫يتم‬ ‫الذي‬ ‫المحلول‬.
  6. 6. ‫قسمين‬ ‫الى‬ ‫التثفيل‬ ‫من‬ ‫النوع‬ ‫هذا‬ ‫يقسم‬: • rate-zonal centrifugation “discontinuous” • Isopycnic centrifugation “continuous” Density gradient centrifugation 50 30 10
  7. 7. Density gradient centrifugation particles are separated solely on the basis of their density Isopycnic = same density
  8. 8. *‫التثفيل‬ ‫بواسطة‬ ‫الدموية‬ ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬ ‫فصل‬:
  9. 9. ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬‫الميزنشيمية‬ Mesenchymal Stem cell Adipose-derived stem cells: Isolation, expansion and differentiation ‫ميكانيكية‬ ‫طرقة‬ ‫انزيمية‬ ‫طرقة‬ ‫كريات‬ ‫حل‬ ‫محلول‬ ‫الحضن‬ ‫التثفي‬‫ل‬ ‫الزرع‬ ‫التحريك‬ ‫محلول‬ ‫مع‬ ‫الحضن‬ ‫الكريات‬ ‫حل‬ ‫التثفي‬‫ل‬ ‫الزرع‬ ‫التثفي‬‫ل‬ ‫الفلتر‬‫ة‬ ‫االنزيم‬ ‫اضافة‬ ‫ساعة‬ ‫لمدة‬ ‫الحضن‬
  10. 10. ‫الزرع‬ ‫على‬ ‫اعتمادا‬ ‫الفصل‬ ‫القدرة‬ ‫على‬ ‫اساسي‬ ‫بشكل‬ ‫تعتمد‬‫االلتصاقية‬‫للخاليا‬ ‫سطحية‬ ‫لجزيئات‬ ‫امتالكها‬ ‫نتيجة‬ ‫اكثر‬‫مايعزل‬‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬ ‫هو‬ ‫الطريقة‬ ‫بهذه‬‫الميزنشيمية‬ Mesenchymal Stem/Stromal Cells (MSC)
  11. 11. ‫الزرع‬ ‫على‬ ‫اعتمادا‬ ‫الفصل‬ ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬ ‫تؤخذ‬‫الميزنشيمية‬Mesenchymal Stem‫من‬: ‫النقي‬ ‫بذل‬ ‫شحمي‬ ‫نسيج‬ ‫السري‬ ‫الحبل‬ ‫دم‬
  12. 12. ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬‫الميزنشيمية‬ Mesenchymal Stem cell Adipose-derived stem cells: Isolation, expansion and differentiation ‫ميكانيكية‬ ‫طرقة‬ ‫انزيمية‬ ‫طرقة‬
  13. 13. ‫عزل‬ ‫طريقة‬: •‫النسيج‬ ‫عزل‬ •‫هضم‬‫بالكوالجيناز‬ •‫تثفيل‬ «‫تطفو‬ ‫الشحم‬ ‫من‬ ‫كبيرة‬ ‫كمية‬ ‫تحوي‬ ‫التي‬ ‫الخاليا‬» ‫حبيبات‬ ‫تشكل‬ ‫الجذعية‬ ‫السلفية‬ ‫الخاليا‬«‫رسابة‬»‫طبق‬ ‫على‬ ‫تزرع‬ ‫زرع‬.
  14. 14. ‫بالغشاء‬ ‫الفلترة‬ Membrane Filtration ‫خاصتي‬ ‫على‬ ‫تعتمد‬ ‫وبسيطة‬ ‫سهلة‬ ‫خالل‬ ‫المرور‬ ‫على‬ ‫والقدرة‬ ‫االلتصاق‬ ‫االغشية‬ ‫مسامات‬«‫الحجم‬» ‫الدموية‬ ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬ ‫على‬ ‫طبقت‬CD34 “enrichment”
  15. 15. Affinity-based techniques ‫االلفة‬ ‫على‬ ‫المعتمدة‬ ‫الطرق‬ ‫رئيسي‬ ‫بشكل‬ ‫تقنتين‬ ‫تتضمن‬: Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS) ‫الخلوي‬ ‫الجريان‬ ‫بواسطة‬ ‫الفرز‬ Immunomagnetic Cell Separation ‫المغناطيسية‬ ‫الجزيئات‬ ‫على‬ ‫المعتمد‬ ‫الفرز‬ ‫جزيئات‬ ‫على‬ ‫رئيسي‬ ‫بشكل‬ ‫تعتمدان‬marker‫سطحية‬ ‫اهمها‬ ‫من‬cluster of differentiation “CD”
  16. 16. Surface molecular marker
  17. 17. ‫الخلوي‬ ‫الجريان‬ ‫مستضد‬ ‫مع‬ ‫ضد‬ ‫ارتباط‬ ‫صورة‬ ‫للجهاز‬ ‫صورة‬
  18. 18. Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS) :
  19. 19. Immunomagnetic Cell Separation Magnetic-activated cell sorting (MACS) ‫مع‬ ‫مرتبطة‬ ‫صغيرة‬ ‫مغناطيسية‬ ‫جزيئات‬ ‫تستعمل‬‫االضداد‬
  20. 20. ‫الطرق‬ ‫تقييم‬. ‫والفلترة‬ ‫والزرع‬ ‫التثفيل‬‫باالغشية‬: ‫بسيطة‬ ‫طرق‬–‫معقدة‬ ‫اجهزة‬ ‫تحتاج‬ ‫ال‬–‫ورخيصة‬- ‫واسع‬ ‫مستوى‬ ‫على‬ ‫تطبيقها‬ ‫يمكن‬ ‫التعطي‬‫ف‬ ‫اولية‬ ‫كخطوة‬ ‫تستخدم‬ ‫عالي‬ ‫نوعي‬ ‫فصل‬‫ي‬ ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬ ‫عزل‬ ‫عملية‬ ‫المغناطيسي‬ ‫والفصل‬ ‫الخلوي‬ ‫الجريان‬: ‫االض‬ ‫من‬ ‫مزيج‬ ‫نستخدم‬ ‫ان‬ ‫يمكن‬ ‫للفصل‬ ‫عالية‬ ‫نوعية‬ ‫تعطي‬‫داد‬ ‫ومعدات‬ ‫ألجهزة‬ ‫تحتاج‬«‫الخلوي‬ ‫الجريان‬» ‫لل‬ ‫السطحية‬ ‫بالجزيئات‬ ‫جيدة‬ ‫معرفة‬ ‫هناك‬ ‫تكون‬ ‫الن‬ ‫تحتاج‬‫خاليا‬ ‫ل‬ ‫البيولوجية‬ ‫الخواص‬ ‫من‬ ‫تغير‬ ‫قد‬ ‫المغناطيسية‬ ‫الجزيئات‬‫لخاليا‬
  21. 21. ‫مائيين‬‫ين‬‫ر‬‫طو‬ ‫على‬‫املعتمدة‬ ‫فصل‬ ‫تقنية‬ATPS Aqueous Two-Phase Systems (ATPS) ‫غير‬ ‫مائيين‬ ‫وسطين‬ ‫وجود‬ ‫على‬ ‫تعتمد‬ ‫استخالص‬ ‫تقنية‬‫مزوجين‬ polymer–polymer and polymer–salt systems. Most commonly used polymers include : polyethylene glycol (PEG) and dextran salts are phosphates, sulfates, and citrates
  22. 22. defined by their physicochemical properties such as hydrophobicity, size, and net surface charge ‫العملية‬ ‫لتحسين‬ ‫اضداد‬ ‫اضافة‬ ‫يمكن‬.
  23. 23. based on cellular morphological and biophysical differences such as mass, charge, size, density, shape, and rigidity. FFF is achieved within an empty capillary channel by the combined action of a transporting laminar flow of mobile phase and a field that is applied perpendicularly to the flow Field Flow Fractionation “FFF”
  24. 24. ‫التثفيل‬ ‫والفلترة‬ ‫ع‬‫ر‬‫الز‬ ‫املغناطيسية‬‫والجزيئات‬ ‫ي‬‫الخلو‬ ‫الجريان‬ ‫وطريقة‬ ‫االستخالص‬ATPS ‫على‬‫معتمدة‬‫طريقة‬Field Flow Fractionation “FFF” ‫التثفيل‬ ‫والفلترة‬ ‫ع‬‫ر‬‫الز‬ ‫املغناطيسية‬‫والجزيئات‬ ‫ي‬‫الخلو‬ ‫الجريان‬ ‫وطريقة‬ ‫االستخالص‬ATPS ‫على‬‫معتمدة‬‫طريقة‬Field Flow Fractionation “FFF” ‫الجذعية‬ ‫الخاليا‬ ‫ل‬‫عز‬‫ق‬‫وطر‬ ‫تقنيات‬

×