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MICROSCOPIA DE LUZ




Lic. Ingrid Berganza
¿ QUE ES UN MICROSCOPIO
   Es un instrumento que se utiliza para ver lo
    no visible a los ojos humanos.
   Permite aumentar las imágenes de las
    células hasta 1000 veces y tiene acceso a
    detalles de hasta 0.2 micras.
PRIMEROS MICROSCOPISTAS
   Antonio van Leewenhoek:
       Se le suele atribuir el desarrollo de este aparato
       Constaban de una lente pequeña y convexa,
        montada sobre una plancha, con un mecanismo
        para sujetar el material que se iba a examinar
        (la muestra o espécimen).
       Este uso de una única lente convexa se conoce
        como microscopio simple, en el que se incluye
        la lupa, entre otros aparatos ópticos.
Microscopio simple de Leewenhoek
HISTORIA DEL MICROSCOPIO
   1608: ZACARIAS JANSESN: construye un
    microscopio con dos lentes convergentes
   1611: KEPLER: sugiere la fabrica de microscopio
    compuesto
   1665: HOOKE: estudia cortes de corcho y describe
    poros como cajas que el llama “células”. Describe
    hongos filamentosos.
   1674: LEEWENHOEK: Descubre protozoarios y
    los denomina “animáculos”. En 1683 observa
    bacterias por primera vez.
   Microscopio usado por Robert Hooke
   El lente objetivo fue adaptado al final de un
    mecanismo de fuelle
   Un foco de iluminación sobre el especímen y
    un único lente




   Leewenhoek dibuja las bacterias y las publica
    en 1684
   Se distinguen varios tipos morfológicos de
    bacterias comunes
   A,C,F y G: forma de bastón
   E: forma esférica o cocoide
   H: paquetes de cocos
HISTORIA DEL MICROSCOPIO
   1828: W. NICOL: Desarrolla la microscopía con
    luz polarizada.
   1838: SCLEIDEN y SCHWANN: Proponen teoria
    celular y declaran a la celula como unidad
    estructural y funcional en plantas y animales.
   1876: ABBÉ: Perfecciona el diseño del
    microscopio por efectos de la difracción en la
    formación de la imagen.
   1881: RETZIUS: Describe diferentes tejidos y lego
    con otros colaboradores desarrollan nuevas
    tinciones y proponen fundamentos de anatomía
    microscópica.
   1886: ZEISS: Fabrica serie de lentes, permitiendo
    ver estructuras en límites teóricos de la luz visible.
HISTORIA DEL MICROSCOPIO
   1908: KÖKLER y SIEDENTOPF: DesarrollaN el
    microscopio de fluorescencia.
   1930: LEBEDEFF: Diseña y construye el primer
    microscopio de interferencia.
   1932: ZERNIKE: Microscopio electrónico de
    contraste de fases.
   1937: ERNST RUSKA Y MAX KNOLL: Primer
    Microscopio electrónico.
   1952: NOMARSKI: Inventa el contraste de
    interferencia diferencial para microscopio de luz.
   1981: Aparece el microscopio de efecto túnel o
    microscopio electrónico de Transmisión (MET).
TIPOS DE MICROSCOPIO
   Microscopio de luz
     Microscopio de campo claro
     Microscopio de campo oscuro
     Microscopio de fluorescencia
     Microscopio de contraste de fases
     Microscopio de luz polarizada
   Microscopio electrónico
     Microscopio de transmisión electrónica
     Microscopio de transmisión electrónica de
      barrido
Microscopio de campo claro
 Rango de aumentos generalmente entre 40
  y 1000. Es el normalmente utilizado para
  estudiar los cortes en parafina o metacrilato
  (histológicos), las extensiones citológicas,
  tinciones normales y exámenes directos
Microscopio de campo oscuro
   Es el mismo microscopio de campo claro,
    usando un condensador que bloquea los
    rayos de luz directos y desvía en un ángulo
    oblicuo la luz proveniente de un espejo,
    solo se observan los bordes iluminados de
    los objetos.
Microscopio de Fluorescencia
 Microscopio que permite estudiar la
  fluorescencia propia de algunos tejidos o la
  fluorescencia que nosotros podemos
  inducir en ellos, mediante sustancias
  llamadas fluorocromos
Microscopio de Contraste de Fases
Las ondas luminosas pasan a través de objetos
  transparentes, y salen en fases diferentes
  según las propiedades de los materiales por
  los que pasan, por lo tanto unas estructuras
  son más oscuras que otras
Microscopio de Luz Polarizada
   Consiste en un microscopio óptico común
    al que se añade una óptica especial
    (prismas de Nicol) que permite identificar
    las características de birrefringencia de
    algunos tejidos.
Microscopio Electrónico de Transmisión
MET: es el habitualmente utilizado para diagnóstico
  anatomopatológico. Utilizan haces de electrones
  proyectados desde un cañón y enfocado por una
  lente electromagnética sobre el objeto.
  Resolución de 0.001μm
Microscopio Electrónico de Barrido
   Tiene menor resolución que el MET. Es
    útil para dar imágenes tridimensionales con
    sombreado, usando una delgada capa de
    metal pesado (platino) sobre el objeto
PARTES DEL MICROSCOPIO OPTICO
 Sistema óptico
     OCULAR: Lente situada cerca del ojo del
      observador. Amplía la imagen del objetivo.
     OBJETIVO: Lente situada cerca de la
      preparación. Amplía la imagen de ésta.
     CONDENSADOR: Lente que concentra los
      rayos luminosos sobre la preparación.
     DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que
      entra en el condensador.
     FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el
      condensador.
PARTES DEL MICROSCOPIO OPTICO


   Sistema mecánico
        SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes:
         el pie o base y el brazo.
        PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación.
        CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares.
         Puede ser monocular, binocular, …..
        REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes
         objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.
        TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que
         aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el
         enfoque correcto.
OCULAR

TORNILLO
 MACROMETRICO   CABEZAL


TORNILLO        REVOLVER
MICROMETRICO    OBJETIVO DE MAYOR AUM.
     BRAZO      OBJETIVO DE MENOR AUM.
                PRESILLA O PINZA
                PATINA
                 DIAFRAGMA
                ESPEJO

                 BASE o SOPORTE
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  • 1. MICROSCOPIA DE LUZ Lic. Ingrid Berganza
  • 2. ¿ QUE ES UN MICROSCOPIO  Es un instrumento que se utiliza para ver lo no visible a los ojos humanos.  Permite aumentar las imágenes de las células hasta 1000 veces y tiene acceso a detalles de hasta 0.2 micras.
  • 3. PRIMEROS MICROSCOPISTAS  Antonio van Leewenhoek:  Se le suele atribuir el desarrollo de este aparato  Constaban de una lente pequeña y convexa, montada sobre una plancha, con un mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espécimen).  Este uso de una única lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos ópticos.
  • 5. HISTORIA DEL MICROSCOPIO  1608: ZACARIAS JANSESN: construye un microscopio con dos lentes convergentes  1611: KEPLER: sugiere la fabrica de microscopio compuesto  1665: HOOKE: estudia cortes de corcho y describe poros como cajas que el llama “células”. Describe hongos filamentosos.  1674: LEEWENHOEK: Descubre protozoarios y los denomina “animáculos”. En 1683 observa bacterias por primera vez.
  • 6. Microscopio usado por Robert Hooke  El lente objetivo fue adaptado al final de un mecanismo de fuelle  Un foco de iluminación sobre el especímen y un único lente  Leewenhoek dibuja las bacterias y las publica en 1684  Se distinguen varios tipos morfológicos de bacterias comunes  A,C,F y G: forma de bastón  E: forma esférica o cocoide  H: paquetes de cocos
  • 7. HISTORIA DEL MICROSCOPIO  1828: W. NICOL: Desarrolla la microscopía con luz polarizada.  1838: SCLEIDEN y SCHWANN: Proponen teoria celular y declaran a la celula como unidad estructural y funcional en plantas y animales.  1876: ABBÉ: Perfecciona el diseño del microscopio por efectos de la difracción en la formación de la imagen.  1881: RETZIUS: Describe diferentes tejidos y lego con otros colaboradores desarrollan nuevas tinciones y proponen fundamentos de anatomía microscópica.  1886: ZEISS: Fabrica serie de lentes, permitiendo ver estructuras en límites teóricos de la luz visible.
  • 8. HISTORIA DEL MICROSCOPIO  1908: KÖKLER y SIEDENTOPF: DesarrollaN el microscopio de fluorescencia.  1930: LEBEDEFF: Diseña y construye el primer microscopio de interferencia.  1932: ZERNIKE: Microscopio electrónico de contraste de fases.  1937: ERNST RUSKA Y MAX KNOLL: Primer Microscopio electrónico.  1952: NOMARSKI: Inventa el contraste de interferencia diferencial para microscopio de luz.  1981: Aparece el microscopio de efecto túnel o microscopio electrónico de Transmisión (MET).
  • 9.
  • 10. TIPOS DE MICROSCOPIO  Microscopio de luz  Microscopio de campo claro  Microscopio de campo oscuro  Microscopio de fluorescencia  Microscopio de contraste de fases  Microscopio de luz polarizada  Microscopio electrónico  Microscopio de transmisión electrónica  Microscopio de transmisión electrónica de barrido
  • 11. Microscopio de campo claro  Rango de aumentos generalmente entre 40 y 1000. Es el normalmente utilizado para estudiar los cortes en parafina o metacrilato (histológicos), las extensiones citológicas, tinciones normales y exámenes directos
  • 12. Microscopio de campo oscuro  Es el mismo microscopio de campo claro, usando un condensador que bloquea los rayos de luz directos y desvía en un ángulo oblicuo la luz proveniente de un espejo, solo se observan los bordes iluminados de los objetos.
  • 13. Microscopio de Fluorescencia  Microscopio que permite estudiar la fluorescencia propia de algunos tejidos o la fluorescencia que nosotros podemos inducir en ellos, mediante sustancias llamadas fluorocromos
  • 14. Microscopio de Contraste de Fases Las ondas luminosas pasan a través de objetos transparentes, y salen en fases diferentes según las propiedades de los materiales por los que pasan, por lo tanto unas estructuras son más oscuras que otras
  • 15. Microscopio de Luz Polarizada  Consiste en un microscopio óptico común al que se añade una óptica especial (prismas de Nicol) que permite identificar las características de birrefringencia de algunos tejidos.
  • 16. Microscopio Electrónico de Transmisión MET: es el habitualmente utilizado para diagnóstico anatomopatológico. Utilizan haces de electrones proyectados desde un cañón y enfocado por una lente electromagnética sobre el objeto. Resolución de 0.001μm
  • 17. Microscopio Electrónico de Barrido  Tiene menor resolución que el MET. Es útil para dar imágenes tridimensionales con sombreado, usando una delgada capa de metal pesado (platino) sobre el objeto
  • 18. PARTES DEL MICROSCOPIO OPTICO  Sistema óptico  OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del objetivo.  OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.  CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.  DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.  FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
  • 19.
  • 20. PARTES DEL MICROSCOPIO OPTICO  Sistema mecánico  SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.  PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación.  CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular, …..  REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.  TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto.
  • 21. OCULAR TORNILLO MACROMETRICO CABEZAL TORNILLO REVOLVER MICROMETRICO OBJETIVO DE MAYOR AUM. BRAZO OBJETIVO DE MENOR AUM. PRESILLA O PINZA PATINA DIAFRAGMA ESPEJO BASE o SOPORTE