1.
EVALUATION
par les FACILITATEURS
Rendement parasitaire
chez l’anophèle
Rakotoarivelo Rivonirina Andry
1

2.
Introduction
Devenir des gamétocytes ingérés par l’anophèle
au cours d'un repas sanguin dépend:
Facteurs liés à l’anophèle
Facteurs externes
Rendement parasitaires chez l’anophèle
Infectivité des gamétocytes pour les moustiques:
Indice gamétocytaire; Infectivité des individus
Rendement du développement sporogonique:
Rendement interstade; Rendement global
Gamétocytes ? Sporozoites ?
C Boudin, V Robert. Bull Soc Pathol Exot 2003.

3.
Plasmodium chez l’anophèle
Cycle sporogonique
H0 H3-5 H18-30 H36-48 J8-16
Gamétocytes Zygotes Ookinètes Oocystes Sporozoites
CK Moreira et al. International Journal for Parasitology 2004.
04/04/2002 Atelier Paludisme 2008 3

4.
Mesure quantitative du cycle sporogonique
Gouagna et al: P. falciparum – An. gambiae
Gamétocytes: Coloration au Giemsa
Microscope optique
Stade pré-oocyste (Zygotes H3, Ookinètes H24) et
oocystes J2: Ac monoclonal anti-Pfs25+marqueur IF
Microscope avec lumière fluorescente
Stade oocystes J7: Coloration au mercurochrome
Microscope optique
.
LC Gouagna et al. Tropical Medecine International Health 1998
04/04/2002 Atelier Paludisme 2008 4

5.
Gouagna et al: P. falciparum – An. gambiae
2 RF 1 OOK OOK - OOC2: Rendement = 61.4 %
Rendement global (RF - OOC7) = 25.7 %
LC Gouagna et al. Tropical Medecine International Health 1998.
04/04/2002 Atelier Paludisme 2008 5

6.
Mesure quantitative du cycle sporogonique
Siden et al: P. berghei – An. stephensi
Technique: Green fluorescent protein (GFP) / intégration de
plasmide PbGFPCON dans le génome de P. berghei
Microscope
Gamétocytes Gamète mâle Ookinètes Oocystes Sporozoites
femelle et mâle B Franke-Fayard et al. Molecular & Biochemical Parasitology 2004.
RE Sinden et al. PloS Pathogens 2007.
D’après C Lavazec. 2008.
04/04/2002 6

7.
Mesure quantitative du cycle sporogonique
Siden et al: P. berghei – An. stephensi
77 gamètes 1 ookinète (OOK)
35 - 72 OOK 1 oocyste (OOC)
1 OOC 54 - 72 sporozoites
dans les glandes salivaires
Hypothèse: intervention visant
chaque étape (ookinète,
oocystes, sporozoites)
RE Sinden. Parassitologia 1999.
RE Sinden et al. PloS Pathogens 2007.
7

8.
Facteurs interférents sur le cycle sporogonique
Mécanismes de défense de l’anophèle contre les
parasites:
Enzymes digestives de l’anophèle
Défense immunitaire de l’anophèle: nitric oxide
synthase (NOS)
Hemocytes: phagocytose, laminin, thioester-
containing protein (TEP1)
Facteurs sanguins ingérés avec le repas sanguin: Ac,
compléments, leucocytes,…
S Blandin, EA Levashina. Current Opinion in Immunology 2004.
04/04/2002 Atelier Paludisme 2008 8

9.
Intérêts
Mesure quantitative du cycle sporogonique permet
l’identification:
Des stades parasitaires vulnérables à une
action de lutte chez lez moustiques
Des cibles parasitaires de l’immunité
bloquant la transmission
Du rôle épidémiologique de cette immunité
par rapport à l’ensemble des mécanismes
non immunologiques qui dépendent du
parasite et du vecteur.

10.
Perspective
Gamétocytes Sporozoites
Nombre des gamétocytes ≈ sporozoites
Gamétocytes entraîne une Défenses immunitaires
transmission du paludisme Modifications génétiques
Facteurs externes
LC Gouagna et al.East Afr Med J 2003.
Moustique transgénique transmission
du paludisme
AK Ghosh et al. Insect Bioch Molecul Biol 2002.
Cibles parasitaires de l’immunité bloquant la
transmission: vaccin bloquant la transmission
C Lavazec et al. Infection and immunity 2007.
04/04/2002 10

11.
Conclusion
Rendement parasitaire
Diminuer la gametocytémie: antimalariques
Bloquer la transmission: vaccin bloquant la transmission
Mettre au point les moustiques transgéniques
Élimination du paludisme
Lutte multifactorielle
Participation active de tout le monde
« Si on veut, on peut »
04/04/2002 Atelier Paludisme 2008 11

12.
Références
1. C Boudin, V Robert. Plasmodium falciparum : Epidémiométrie de la transmission homme-
moustique et de l’infection chez le vecteur. Bull Soc Pathol Exot 2003; 96: 335-340.
2. CK Moreira, MT Marrelli, M Jacobs-Lorena. Gene expression in Plasmodium: from gametocytes to
sporozoites. International Journal for Parasitology 2004; 34: 1431–40.
3. LC Gouagna et al.The early sporogonic cycle of Plasmodium falciparum in laboratory infected-
Anopheles gambiae: an estimation of parasite efficacy.Trop Med Inter Health 1998;3:21-28.
4. B Franke-Fayard et al. A Plasmodium berghei reference line that constitutively expresses GFP at a
high level throughout the complete life cycle. Molecular & Biochemical Parasitology 2004; 137:
23–33.
5. RE Sinden et al. Progression of Plasmodium berghei through Anopheles stephensi Is Density-
Dependent. Plos Pathogens 2007;3:e195.
6. RE Sinden. Plasmodium differentiation in the mosquito. Parassitologia 1999; 41:139-48.
7. S Blandin, EA Levashina. Mosquito immune responses against malaria parasites. Current Opinion
in Immunology 2004; 16:16–20.
8. LC Gouagna et al. Infectivity of Plasmodium falciparum gametocytes in patients attending rural
health centres in western Kenya. East Afr Med J 2003; 80:627-34.
9. AK Ghosh, LA Moreira, M Jacobs-Lorena. Plasmodium–mosquito interactions, phage display
libraries and transgenic mosquitoes impaired for malaria transmission. Insect Biochemistry and
Molecular Biology 2002; 32: 1325–31.
10. C Lavazec et al. Carboxypeptidases B of Anopheles gambiae as Targets for a Plasmodium
falciparum Transmission-Blocking Vaccine. Infection and Immunity 2007;75: 1635–42.
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13.
Misaotra tompoko!