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11-- F. Castelli, G. Carosi. (1997).F. Castelli, G. Carosi. (1997). DiagnosisDiagnosis ofof
malariamalaria infection.Healthinfection.Health CoCo--operationoperation paperspapers..
15:10915:109--136.136.
22-- M.M.--T.Ekala, F. Lekoulou, S. Djikou, G.T.Ekala, F. Lekoulou, S. Djikou, G.
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66-- Anon.Diagnostic du paludisme. citedAnon.Diagnostic du paludisme. cited
http://www.md.ucl.ac.be./stages/hygtop:Wery:plamodiums/http://www.md.ucl.ac.be./stages/hygtop:Wery:plamodiums/
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lele monde.Edmonde.Ed JohnLibeyEurotexJohnLibeyEurotex, Paris., Paris.
http://www.Johnhttp://www.John Libbey.eurotex.frLibbey.eurotex.fr
88-- Anon.(2006).Infect Genet .6(6):459Anon.(2006).Infect Genet .6(6):459-- 63.citted63.citted
http//www.ncbi.nlm.gov/entrez/query.fcgi?http//www.ncbi.nlm.gov/entrez/query.fcgi?dbdb==pubmedpubmed
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http://http://babelfish.altavista.combabelfish.altavista.com//babaelfishbabaelfish//trurl_pagetrurl_pagecontcont
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Les méthodes de diagnostic biologique du paludisme

  • 1. Dr Rakotoarivony Marie ClDr Rakotoarivony Marie Cléémencemence Atelier sur le Paludisme 2007Atelier sur le Paludisme 2007 LES METHODES DE DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE DU PALUDISME EVALUATION par les FACILITATEURS
  • 2. PLANPLAN IntroductionIntroduction QuQu’’est ce quest ce qu’’un diagnostic biologique?un diagnostic biologique? Quelles sont les diffQuelles sont les difféérentes mrentes mééthodesthodes spspéécifiques?cifiques? La comparaison entre ces diffLa comparaison entre ces difféérentsrents mmééthodesthodes ConclusionConclusion
  • 3. INTRODUCTIONINTRODUCTION En dEn déépit des efforts dpit des efforts dééployployéés en faveurs en faveur de leur prde leur préévention et de leur traitement,vention et de leur traitement, les maladies infectieuses et leles maladies infectieuses et le paludisme en particulier demeurent unpaludisme en particulier demeurent un problproblèème important de santme important de santéé publiquepublique au niveau mondialau niveau mondial Un diagnostic rapide et prUn diagnostic rapide et préécis occurecis occure une bonne prise en charge du patient .une bonne prise en charge du patient .
  • 4. QUQU’’EST CE QUEST CE QU’’UNUN DIAGNOSTICDIAGNOSTIC BIOLOGIQUE DUBIOLOGIQUE DU PALUDISME?PALUDISME?appui de lappui de l’é’évocation cliniquevocation clinique ddéétecte les acctecte les accèès simples et les accs simples et les accèèss graves du paludismegraves du paludisme éévalue lesvalue les ééchecs thchecs théérapeutiquesrapeutiques ((ééventuellement)ventuellement)
  • 5. Goutte épaisse Sérologie PCR TDR Frottis sanguin Diagnostic biologique LES DIFFLES DIFFÉÉRENTESRENTES METHODES DE DIAGNOSTICMETHODES DE DIAGNOSTIC BIOLOGIQUEBIOLOGIQUE
  • 6. L A MICROSCOPIEL A MICROSCOPIE met enmet en éévidence les parasites plasmodialesvidence les parasites plasmodiales dans le sangdans le sang nnéécessite un microscope optique et descessite un microscope optique et des colorantscolorants Un personnel qualifiUn personnel qualifiéé LectureLecture àà 100 champs microscopiques100 champs microscopiques (oculaire 10X(oculaire 10X -- objectif 100X )objectif 100X ) RRéésultats quantitatifssultats quantitatifs
  • 7. surface plus petite que le frottis.surface plus petite que le frottis. hhéémolyse des globules rougesmolyse des globules rouges DDéétecte destecte des parasitparasitéémiesmies 33--5 parasites/5 parasites/µµll La sensibilitLa sensibilitéé 20 fois plus que FM20 fois plus que FM Met enMet en éévidence les formesvidence les formes éérythrocytaires derythrocytaires de PlasmodiumPlasmodium La GoutteLa Goutte éépaissepaisse
  • 8. Le frottis minceLe frottis mince (FM)(FM) quantitquantitéé de sang plusde sang plus faible que sur une GEfaible que sur une GE Pas dPas d’’hhéémolyse demolyse de GRGR Lecture avecLecture avec immersionimmersion PolyparasitPolyparasitéémiemie possiblepossible mise en dmise en dééfaut enfaut en cas decas de parasitparasitéémiemie faiblefaible sensibilitsensibilitéé ththééoriqueorique est de 20est de 20 àà 30 fois30 fois moindre qumoindre qu’’avec GEavec GE DDéétecte 100tecte 100--200200 parasites/parasites/µµll
  • 9.
  • 10. La sLa séérologierologie Utilise les techniques ( ELISA,Utilise les techniques ( ELISA, immunofluorescenceimmunofluorescence ……)) mesure les anticorps smesure les anticorps séériques (contact antriques (contact antéérieurrieur du sujet avec le parasite)du sujet avec le parasite) utilisutiliséé sur le plansur le plan éépidpidéémiologie, sur certainemiologie, sur certaine forme clinique de paludisme viscforme clinique de paludisme viscééralral éévolutif, ouvolutif, ou desdes éétudes rtudes réétrospectivestrospectives
  • 11. bandelettes rbandelettes rééactivesactives DDéétection antigtection antigééniquenique RRééponse rapide (moins de 15 minutes),ponse rapide (moins de 15 minutes), rréésultats sous forme dsultats sous forme d’’un trait sur la bandeletteun trait sur la bandelette Ne nNe néécessite pas de compcessite pas de compéétence particulitence particulièèrere SensibilitSensibilitéé de dde déétectiontection àà >90% chez les patients>90% chez les patients >100 parasites/>100 parasites/µµll Le Test de diagnosticLe Test de diagnostic rapide(TDR)rapide(TDR)
  • 12. HRP2HRP2 PlasmodiumPlasmodium falciparumfalciparum++++++ pas de distinction 3 autrespas de distinction 3 autres espespèèces entre euxces entre eux (( P. ovaleP. ovale,, P.P. malariaemalariae,, P.P. vivaxvivax)) ClairanceClairance àà > 2 semaines> 2 semaines SensibilitSensibilitéé 10HPM soit une10HPM soit une parasitparasitéémiemie 0.02 %0.02 % pLDHpLDH 4 esp4 espèècesces plasmodialsplasmodials Moins sensibleMoins sensible Clairance en rapportClairance en rapport avec laavec la parasitemieparasitemie DDéétection antigtection antigéénique ( RDT )nique ( RDT )
  • 13.
  • 14. La technique de PCRLa technique de PCR (Polymerase Chain Reaction )(Polymerase Chain Reaction ) amplifie les samplifie les sééquences reconnues et les rendquences reconnues et les rend facilement repfacilement repéérables.rables. beaucoup plus sensible, dbeaucoup plus sensible, déétecte 1 plasmodium/10mltecte 1 plasmodium/10ml sang (5fois plus faible que GE)sang (5fois plus faible que GE) n'est pas encoren'est pas encore éévaluvaluéée dans le diagnostic due dans le diagnostic du paludisme dpaludisme d’’urgenceurgence Outil de rechercheOutil de recherche MatMatéériels chers et compliquriels chers et compliquééss
  • 15.
  • 16. Comparaison des mComparaison des mééthodesthodes de diagnostic biologiquesde diagnostic biologiques Source : Thierry Fandeur Atelier palu 2003
  • 17. conclusionconclusion Variétés diagnostics Prise en charge PRECOCE Utilisation rationnelle des médicaments Diagnostic RAPIDE Microscopie/TDR de choix Morbidité mortalité
  • 18. Merci de votreMerci de votre AttentionAttention!!
  • 19. RRééfféérences bibliographiquesrences bibliographiques 11-- F. Castelli, G. Carosi. (1997).F. Castelli, G. Carosi. (1997). DiagnosisDiagnosis ofof malariamalaria infection.Healthinfection.Health CoCo--operationoperation paperspapers.. 15:10915:109--136.136. 22-- M.M.--T.Ekala, F. Lekoulou, S. Djikou, G.T.Ekala, F. Lekoulou, S. Djikou, G. Dubreuil,S.Issifou & F.Ntoumi. (1999).Dubreuil,S.Issifou & F.Ntoumi. (1999). ÉÉvaluation dvaluation d’’une mune mééthode simple et rapidethode simple et rapide dd’’extraction de lextraction de l’’ADN de plasmodium falciparumADN de plasmodium falciparum àà partir de gouttespartir de gouttes éépaisses de patientspaisses de patients gabonais. Ngabonais. N°°2031.2031. <Parasitologie>.<Parasitologie>. 33--Anon.(2000).Diagnostic du paludisme18Anon.(2000).Diagnostic du paludisme18 septembre.septembre. Biologie.hialaveraBiologie.hialavera@wanadoo.fr@wanadoo.fr
  • 20. 44-- O.Gaye,G. MC Laughlin, M. Diouf, S.O.Gaye,G. MC Laughlin, M. Diouf, S. DialloDiallo. (1998)Etude. (1998)Etude comparative decomparative de cinqcinq mmééthodesthodes de diagnosticde diagnostic biologiquebiologique dudu paludismepaludisme: la: la gouttegoutte éépaisse,lapaisse,la mmééthodethode QBC, LaQBC, La sondesonde ADN ,la PCR et leADN ,la PCR et le ParasightParasight FF test.Mtest.Méédecinedecine dd’’AfriqueAfrique Noire .45(4).Noire .45(4). 55-- David Bell, Rouel Go, Cynthia Miguel, John Walker,David Bell, Rouel Go, Cynthia Miguel, John Walker, Lillibeth Cacal &Allan Saul.(2001).Diagnostic du paludismeLillibeth Cacal &Allan Saul.(2001).Diagnostic du paludisme dans une rdans une réégion reculgion reculéée des Philippines:comparaison dee des Philippines:comparaison de plusieurs techniques et de leur acceptation par les agentsplusieurs techniques et de leur acceptation par les agents de santde santéé et la communautet la communautéé. Bulletin of world Health. Bulletin of world Health Organisation 79(10):933Organisation 79(10):933-- 941.941. 66-- Anon.Diagnostic du paludisme. citedAnon.Diagnostic du paludisme. cited http://www.md.ucl.ac.be./stages/hygtop:Wery:plamodiums/http://www.md.ucl.ac.be./stages/hygtop:Wery:plamodiums/ wery1310.htmlwery1310.html 28/02/2007.28/02/2007.
  • 21. 77-- J.Mouchet,PierreJ.Mouchet,Pierre CarnevaleCarnevale, Marc, Marc CoosemansCoosemans,Jean,Jean JulvezJulvez, Sylvie, Sylvie ManguinManguin, Dominique Richard, Dominique Richard LenobleLenoble,, JacquesJacques CircoulonCircoulon.(2004)Biodiversit.(2004)Biodiversitéé du paludisme dansdu paludisme dans lele monde.Edmonde.Ed JohnLibeyEurotexJohnLibeyEurotex, Paris., Paris. http://www.Johnhttp://www.John Libbey.eurotex.frLibbey.eurotex.fr 88-- Anon.(2006).Infect Genet .6(6):459Anon.(2006).Infect Genet .6(6):459-- 63.citted63.citted http//www.ncbi.nlm.gov/entrez/query.fcgi?http//www.ncbi.nlm.gov/entrez/query.fcgi?dbdb==pubmedpubmed &&cmdcmd==RetrieveRetrieve&&doptdopt=A=A……26/02/200726/02/2007 99-- MendirattaDK,MendirattaDK,BhutadaBhutada k,k,NarangaPNarangaP.(2006).Evaluation de.(2006).Evaluation de diffdifféérentes mrentes mééthodes pour le diagnostic de la malaria.thodes pour le diagnostic de la malaria. Journal indien de la Microbiologie MJournal indien de la Microbiologie Méédicale.24:49dicale.24:49-- 51.51. http://http://babelfish.altavista.combabelfish.altavista.com//babaelfishbabaelfish//trurl_pagetrurl_pagecontcont entent??lplp==en_fren_fr&&trurltrurl=http%3a2=http%3a2……01/03/2007.01/03/2007.