Standardisation du test DMFA - Parole de Junior de la 7e édition du Cours international « Atelier Paludisme » - Gaye Abdoulaye - Sénégal - ablayeg@yahoo.fr

1. Standardisation du test
DMFA
Gaye A; Gadiaga L; Diop A;
Konaté L; Boudin C, Sokhna, C

2. Définition du DMFA
C’est le test de gorgement direct des
moustiques d’élevage à travers une
membrane ou de l’anglo-saxon: Direct
Membrane Feeding Assay

3. Objectifs du test DMFA
• Obtenir un taux de gorgement optimal
• Obtenir un taux d’infection optimal

4. Technique d’élevage des
moustiques
 Facteurs essentiels liés aux larves
 Facteurs essentiels liés aux adultes

5. Facteurs liés aux larves (1)
 Nature et quantités d’eau
• Eau pure ou naturelle (à défaut: eau
robinet décontaminé pendant 48 heures)
• Quantité d’eau: ne doit pas dépasser un
centimétre, c’est important pour le
réchauffement de l’eau des larves

6. Facteurs liés aux larves (2)
 Alimentation: farine nutritives riche en protéine;
commercialisé sous le nom de Tetra Micro Min®
(pour alevins)
 Température: condition constante de
température (28 – 30°C)

7. Facteurs liés aux adultes (1)
 Température / humidité: condition constante
de température (25°C) et d’humidité (70 -
80%)
 Alimentation: jus sucré, saccharose (10%):
important, lors de l’émergence des adultes

8. Facteurs liés aux adultes (2)
 Sélection des femelles agréssives
• Gorgement des moustiques de 3 jours
affamés par 12 heures de diète sur lapin
• Aspirer les moustiques gorgés et les mettre
dans une cage (femelles agressives)
• Sélection , faite tous les jours pour
augmenter l’effectif des femelles
agréssives

9. Facteurs liés aux adultes (3)
 Lemême principe est adopté pour la
sélection des femelles agréssives sur
membrane de parafilm

10. Matériels et Méthodes

11. Dispositif expérimental du test
6 1
9
5
8
7
3
12
10
4
2
11
Légendes 8: Voie d’aération de la
: Thermoplongeur
1: chambre basale
2: Bain-Marie 9: Rampe de suspension
3: Conduit d’entrée d’eau à 37°C dans les cellules des cellules de
4: Conduit de recyclage d’eau gorgement
5: Voie pour introduire le sang 10: Cadre de support
6: Tuyau de connexion intercellulaire 11: Table
7: Cage à moustiques 12: Connexion au
secteur éléctrique

12. Paramètres intervenant sur la
standardisation du DMFA
Gorgement Infection
• Étirement de la •Température du
membrane. sang
• Densité des • Groupe sanguin
moustiques
• Mise à jeun des
moustiques.

13. Résultats

14. Étirement de la membrane
(gorgement)
Taux de
Origine du
Étirement gorgement Comparaison
sang
(%)
moyen 51,1 Χ2 = 14,1
Sang A
p < 10-3
maximum 87,2
moyen 74 Χ2 = 5
Sang B
maximum 91,5 p < 0,02

15. Densité optimale de gorgement
(gorgement)
Densité de
Sang A Sang B
moustiques
50 88,2 (51) 85,4 (48)
Χ2 = 38,9
Χ2 = 41,6
100 91,6 (108) 92,1 (102) p < 10-5
p < 10-4
150 59,0 (154) 58,9 (151)

16. Mise à jeun des moustiques
(gorgement)
Taux de gorgement
% (effectif)
1ère manipulation 2 ème manipulation
Jus sucré 47 (123) 54,4 (112)
Eau 53 (148) 50,7 (142)
À jeun (15 h) 84 (139) 88,2 (136)
Comparaison Χ2 = 45,1 p < 10-4 Χ2 = 50,4 p < 10-4

17. Température du sang (infection)
1ere Manipulation 2eme Manipulation
Thermostat 37 38 39 40 37 38 39 40
Cellules 35,6 36,3 37 37,9 36 36,8 36,9 37,6

18. Groupes sanguins (infection)
Variation du taux d’infection des moustiques gorgés sur un mélange de globules rouges
parasités de groupe sanguin O+ et de sérums de même groupe (OWN homologue) ou de
groupe sanguin différent (AB, B+ et A-).
0,8
0,7
0,6
% de moustiques +
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0 OW (homologue) AB (compatible) B+ (hétérologue) A- (hétérologue)
type de sérum s testés

19. Conclusion
 Facteursimportants pour la
standardisation du DMFA sont:
- Étirement de la membrane
- Densité des moustiques
- Diète des moustique
-Température du sang
- Groupe sanguin

20. Merci de votre aimable attention
MISOTRA