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Entomologie moléculaire et
 étude de la structuration
 génétique des anophèles

      Présentée par Laurence Randrianasolo
             laurandrianas@yahoo.fr
         Institut Pasteur de Madagascar

                                             1
               Atelier Paludisme 2004
1- Problématiques
1.1- Taxonomie

1.1.1- Principe :
      - la morphologie
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                                      Anopheles nili
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1.1.2- Inconvénients
      - Il y a des complexes d’espèces jumelles
                                                       2
1.2- Cytogénétique
1.2.1- Principe
 Déterminer les inversions chromosomiques
 caractéristiques de chaque espèce.

1.2.2- Inconvénients
 - parfois absence d’inversion typique
 - présent seulement dans les femelles semi-
 gravides

                                               3
2- Entomologie moléculaire
2.1- Avantages de l’étude sur ADN

  2.1.1- Une stabilité de la molécule
         conservation par dessiccation ou
                immersion à l’alcool

  2.1.2- Génome présente des mutations
         - identification
         - étude des polymorphismes
          - étude du flux génétique
          - étude de la phylogénie
                                            4
2.1- Avantages de l’étude sur
              ADN
2.1.3- ADN ribosomal

                                                       Anopheles nili




                                                Anopheles carnevalei
                                                Anopheles ovengensis
                                                Anopheles somalicus
                                                Anopheles nili


 (Source : Kengne P. et al. Med. Vet. Entomol. 2003)                    5
2.1- Avantages de l’étude sur ADN
2.1.3- ADN ribosomal
  une structure commune composée 18S, 5.8S et 28S séparées les
  unes aux autres par ETS, ITS1, ITS2 et IGS.
      étude des complexes d’espèces

2.1.4- ADN mitochondrial
  stable de génération en génération
      étude de la phylogénie

2.1.5- Microsatellite
   très instable
     étude du flux génétique                                 6
2.2- Méthodes d’étude de
                l’ADN
Technique         principe          avantages        inconvénients

              une sonde d’ADN -rapide              -affinité moins de
Hybridation   connue qui va se -moins cher         90%
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Polymerase    Réaction de       -très sensible     -non quantitative
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                                                                     7
2.2- Méthodes d’étude de l’ADN : PCR

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                                                                 8
Exemple : complexe Anopheles nili




                                                          9
    (Source : Kengne P. et al. Med. Vet. Entomol. 2003)
3- Structuration génétique d’une
             population

3.1- Evaluation de la variation génétique

    - étude de la fréquence des génotypes
    - étude du flux génique



                                            10
3.2- Facteurs influençant la
     structuration génétique d’une
               population
- croisement préférentiel entre génotypes
  similaires tend vers la réduction du nombre
  des hétérozygotes
- taille de la population influence la fréquence
  des gènes
- migration modifie la fréquence génique
- mutation apportent de nouveaux gènes
- sélection change la fréquence génique
                                                   11
4-Apport de l’entomologie
             moléculaire

-Elle permet d’ expliquer les échecs d’un
  programme de lutte anti-vectorielle.

-Elle permet d’ orienter les nouvelles
  approches de lutte anti-vectorielle.


                                            12
Références
•http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?CMD=Text&DB=PubMed
•http://sunsite.berkeley.edu/PCR/
•http://www.google.fr/search?hl=fr&ie=UTF-8&oe=UTF-
8&as_qdr=all&q=IRD+AND+biologie+moleculaire+AND+anopheles&btnG=Recherche+Google&meta=
•http://www.pasteur.fr/recherche/RAR/RAR2001/Bbmi.html
•http://www.tours.inra.fr/sfpar/j-EntomologieMedicale/Fontenille.pdf
•http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/codegenet/CodeGenet.htm
•http://www.tours.inra.fr/sfpar/j-EntomologieMedicale/Fontenille.pdf
•Walter J. Tabachnik and William C. Black IV. Population genetics in vector biology. The biology of disease
vectors.Chapitre25:417-437
•Jaroslam Krywinski and Nora J. Besansky. Molecular systematics of anopheles : from subgenera to
subpopulations. Annu Rev Entomol. 2003;48:111-39.
•Walter J. Tabachnik and William C. Black IV.Molecular taxonomy and systematics of arthropod vectors.
The biology of disease vectors. chapitre 26:438-470
•J. Pinto, MJ. Donnelly, CA Sousa, V. Gil, C. Ferreira, N. Elissa, VE. Do Rosario et D. Charlwood. Genetic
structure of Anopheles gambiae (Diptera: Culicidae) in Sao Tomé and Principe (West Africa)/ implications
for malaria control. Molecular Ecology, 2002;11:2183-2187.




                                                                                                              13
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