2. Factores de riesgo
para el cáncer de mama
• Edad avanzada • Edad 1er embarazo
• Menarquia precoz • Uso de estrógenos
• Menopausia tardía • Fact. dietéticos
• Nuliparidad • Anteced. familiares
3. 30
Antecedentes
familiares
25
2 familiares 21,1 %
20 (1:5)
15 1 familiar 13,3 %
(1:8)
10
No familiares 7,8 %
(1:13)
% da d li ba bor P
5
0
i
20 30 40 50 60 70 80
Lancet 2001; 358:1389-99
Edad (años)
(
4. BRCA1 y BRCA2
BRCA1 BRCA2
Año clonación 1994 1995
Cromosoma 17q21 13q12
Exones / ADN 24 exones / 5.6 kb 27 exones / 10.2 kb
Nº aminoácidos 1.863 aa 3.418 aa
Nº mutaciones > 1.230 (500) > 1.380 (300)
Patrón herencia Autos. Dominante Autos. Dominante
Función biológica Mantener integridad del genoma
Breast Information Core: http://research.nhgri.nih.gov/bic
5. Incremento del riesgo de cáncer
(RR)
10
8
6
4
2
0
Menarquia Edad Tardía Mastopatía THS Alcohol Historia BRCA1/2
precoz 1er. Hijo benigna familiar
6. ¿Qué proporción del cáncer de
mama y
de ovario es hereditaria?
Cáncer de mama Cáncer de ovario
15-20%
5-10% 5-10%
Esporádico
Familiar
Hereditario
7. ¿Cuándo debemos sospechar un
Síndrome de Cáncer de Mama y Ovario
Hereditario?
Historia familiar de cáncer de mama
(múltiples miembros de varias generaciones)
Diagnóstico a edad temprana
Afectación bilateral o multifocal
Asociación a otros tumores: cáncer de ovario
Cáncer de mama en varones
Evidencia de transmisión autosómica dominante
8. Genes de susceptibilidad al
Cáncer de Mama Hereditario
BRCA1 20%
BRCA2 20%
TP53 <1%
PTEN <1%
Otros 55%:
Penetrancia variable CHEK 2 5%?
STK11
ATM
Wooster R. N Engl J Med 2003;348:2339-47
9. Genes de susceptibilidad al
Cáncer de Ovario
Cáncer de ovario
BRCA1 (~ 70%)
Hereditario
(5%−10%)
Otros genes (~8%)
HNPCC (~2%) BRCA2 (~20%)
10. Riesgo de cáncer asociado a BRCA1
Cáncer de mama: 50%−85%
Segundo cáncer de mama primario: 40%−60%
Cáncer de ovario: 15%−45%
Posible aumento de riesgo de otros cánceres:
cérvix/cuerpo uterino, páncreas, próstata
11. Riesgo de cáncer asociado a BRCA2
Cáncer de mama en el varón (6%)
Cáncer de mama (50%−85%)
Cáncer de ovario (10%−20%)
Riesgo aumentado de otros cánceres: próstata,
páncreas, …
12. Riesgo de cáncer de mama en portadoras de
mutación en BRCA
100
Portadoras BRCA1+
80 (BCLC)
Riesgo
de 60
cáncer
de mama
(%)
40
20
Población general
0
40 50 60 70 80
Edad
Easton DF et al. Am J Hum Genet 56:265, 1995
15. Biologia del HER2
• Human Epidermal Grow Factor Receptor- 2
neu.
• Protoncogen.
• Cromosoma 17.
• Tirosinquinasa.
• Transmembrana citoplasmatica.
• Receptor de factores de crecimiento.
16. Rol del HER2/neu en Ca de
mama
HER2/neu involucrado
en el crecimiento celular
normal.
La amplificación o sobre
expresión produce
receptores HER2/neu
activados que estimulan el
crecimiento celular
17. HER2+
Asociado a peor
pronostico, mayor
recurrencia y
mortalidad.
Debe ser
incorporado en las
decisiones clínicas
con otros factores
pronóstico.
18. HER2+
Resistencia a
distintos
quimioterápicos.
Esta asociado a
escaso beneficio a
distintas
terapéuticas.
19. Rol del HER2/neu en Ca de mama
PRONOSTICO:
asociado con
agresividad y peor
pronostico
FACTOR
PREDICTIVO:
Identificar
pacientes que se
pueden tratar con
anticuerpos
monoclonales.
21. • Localizado en 17q12-21.32
• Gen c-erb B-2 = HER-2/neu (oncogen)
• Identif. por transfección de células con
ADN neuroblastomas de rata
• Codifica glicoproteína transmembrana
Human EGFR-2 (~pt. v-erb-B del virus
aviar) con actividad T-K
22. • 20-30 % de Ca. mama presentan
amplificación de HER- 2 (o sobreexpresión)
• Alteración Genética Adquirida
• Asociado a mal pronóstico y resistencia al
tratamiento convencional
• HER-2 sirve como TARGET BIOLÓGICO
para terapia con TRASTUZUMAB
• FDA aprobó IHC (DAKO-VMS)
y FISH (Vysis-VMS)
27. Para que se produzca la activación
es necesario que la proteína se dimerice
HOMODÍMEROS
Disoc. rápida de ligando,
1 1 4 4 señalización corta y débil
HETERODÍMEROS
Disoc. lenta de ligando,
2 4 1 2 señalización potente y
prolongada
29. • Southern Blot
Por detección de ADN
• PCR diferencial
• FISH
• Northern Blot Por detección de ARN
• RT-PCR
• Arrays (expresión génica)
• Inmunohistoquímica (ICH)
• Western Blot Por detección de Prot.
32. INMUNOHISTOQUÍMICA
•• Medición de expresión de HER-2/neu
Medición de expresión de HER-2/neu
usando mAbCB11 <5% de F+
usando mAbCB11 <5% de F+
•• Alto valor predictivo negativo 95,5%
Alto valor predictivo negativo 95,5%
(ex. Baja o no detectable)
(ex. Baja o no detectable)
•• Alto valor predictivo positivo 96,2%
Alto valor predictivo positivo 96,2%
(sobreexp.)
(sobreexp.)
•• En moderada expresión:
En moderada expresión:
INCONCLUSO►FISH
INCONCLUSO►FISH
37. FISH
• Aplicar en casos de discordancia entre
Expresión y Clasificación
Histopatológica
• Debería usarse SISTEMÁTICAMENTE
antes de la implementación del
TRASTUZ. debido a la Toxicidad y
costo.
• Provee Mejor información pronóstica
• Asociado a una mejor respuesta al
tratamiento.
42. FISH (HER2/neu) en secciones de carcinoma
ductal de mama (× 1.000): monosomía de
cromosoma 17 y amplificación
de HER2/neu, múltiples señales del locus
específico
(cociente HER2/CEP17 > 10) y señal centromérica
única (verde).
46. Amplificación-sobreexpresion
asociado con:
• Peor grado histológico
• Mayor agresividad biológica
• Menor sobrevida total
• Menor sobrevida libre de enfermedad
• Ausencia de expresión de receptores
hormonales
• Mayor riesgo de metástasis
53. DNA Chip-Biochips-Arrays
• Affymetrix (1993)
• Microseries (microarrays) sobre vidrio y
alta densidad de sondas
• Macroseries (arrays) sobre filtros de nylon
y baja densidad de sondas
• Depósito de cadenas de ADN sobre chips
(GENECHIPS)
• Ultraminiaturización del análisis biológico.
54. DNA Chip-Biochips-Arrays
• Combina técnicas electrónicas con
materiales biológicos
• Analiza grandes volúmenes de información
en tiempos breves
• Incorpora la Bioinformática para
relacionar los datos
• Chips a la carta
• Medición de expresión génica-mutaciones-
polimorfismos
• Monitorea elevados volúmenes de
información Genética
• Información de actividad temporal
61. Nuevas tecnologías
Siglo XXI (?)
DNA arrays
Siglo XIX 1980s 2000 SNP analysis
Multiplex PCR
Proteomics
RH FISH
Histologia Predict de genes aislados Multi-gene predictores (?)
62. ¿Perfil de expresión génica?
Tecnologia de arrays de cDNA
Es una plataforma tecnológica madura, para medir la expresión de
un gran número de genes simultaneamente.
Demostración de que CM es un grupo de enfermedades
heterogéneas.
Demuestra que la Heterogeneidad clínica y biológica CM se explica
por las diferencias en la composición genética
63. Conclusiones
• Debería conocerse el status de HER-2/neu en
TODOS los ca. de mama independiente de la
edad de la paciente y del grado histológico del
tumor.
• La indicación del tratamiento con TTZ
requiere una SELECCIÓN previa mediante
metodologías precisas para estudiar el Gen y
su producto.
• Se debe pensar en el C.M. como un grupo
heterogéneo de enfermedades.
• Se debe explorar más acerca de predictores
en múltiples genes.
I would like to spend the rest of my time to talk about emerging novel diagnostic methods, particularly genomics and proteomics. This slides illustrates how new laboratory techniques have found their way into routine diagnostics. Immunohistochemistry and FISH are now routinely used in the management of breast cancer. Will microarrays and proteomics be the next? These new techniques offer the unique possibility of examining a very large number of genes and proteins to develop predictors of outcome which are made up by many genes rather than a single marker.